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上海谷研實(shí)業(yè)有限公司
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RT-PCR試劑盒

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產(chǎn)品型號(hào)

品       牌

廠商性質(zhì)代理商

所  在  地上海市

更新時(shí)間:2020-11-20 15:05:04瀏覽次數(shù):809次

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RT-PCR試劑盒是即用型PCR試劑盒的改良產(chǎn)品, 含有Taq DNA 聚合酶、dNTPs、MgCl2、反應(yīng)緩沖液、PCR 增強(qiáng)劑、上樣染料等所有PCR 所需要的成分,用戶只需加入模板和引物即可進(jìn)行PCR 反應(yīng),具有廣泛的用途。

性能指標(biāo):
.試劑盒檢測(cè)特異性為00%
2. 檢測(cè)試劑盒重現(xiàn)性為00%
3. 靈敏度可達(dá)到03/ml
4. 有效期為6個(gè)月產(chǎn)品名稱:RT-PCR試劑盒
運(yùn)輸:低溫、避光、快遞免費(fèi)送貨上門。
用途:生化實(shí)驗(yàn),合成實(shí)驗(yàn)等試驗(yàn)。
運(yùn)輸及保存:低溫運(yùn)輸,-20℃保存, 保存期限為 6 個(gè)月。
自備試劑:樣品 RNA。

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使用方法:
一、樣品 RNA 的制備
、用自選方法抽提病毒樣品 RNA。注意:可以選用本公司的一管式病毒 RNAout
2、或柱式病毒 RNAout。
二:RT(逆轉(zhuǎn)錄)反應(yīng)合成 cDNA
. 按下表配制 RT 反應(yīng)體系(20 μL 體系)
2. 70℃保溫 5 分鐘變性模板后立即冰浴。
3. 嚴(yán)格按順序加入 6μL RT Buffer(含 dNTP)和 2μL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶(含 RI),
反應(yīng)終體積為 20μL。
4. 42℃保溫 60 分鐘。此步為 RT 反應(yīng)。
5. 70℃保溫 0 分鐘以終止反應(yīng),然后放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以直接作為 PCR 模板使用,丌需要純化。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 5-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至0kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.~umol或0~00pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
?啶-2.6-二羧二甲酯 5453-67-8 0次 SureClone RACE Kit -20℃保存

5-溴戊酯 5454-83- 0次 SureClone eTS Core Kit -20℃保存

2-硝苯胺 5455-59-4 0次  

N-(2,3-環(huán)氧丙基)鄰苯二 5455-98- 0次  

N-乙基環(huán)己胺 5459-93-8 0次  

-羥乙基-4-基哌 5464-2-0 套  

甘油縮甲 5464-28-8 套  

2-氨基-4-甲氧苯并噻唑 5464-79-9 7次  

2-硝基亞氨基咪唑烷 5465-96-3 0次  

2-甲氧基-5-硝基-6-基啶 5467-69-6 0次  

2-氨基-4-溴苯乙酮 鹽鹽 5467-72- 套  

2-氨基-4'-溴苯乙酮 2098049 000U p9 siRNA Binding Protein -20℃保存

溴化亞酮 54678-23-8 50次 p9 miRNA Detection Kit -20℃保存

4-氯-2-啶甲 5470-22-4 00次 EMSA Kit -20℃保存

2-基-4-硝基啶-N-氧化物 5470-66-6 50fpu rhAP (c-Jun) 4℃保存
RT-PCR試劑盒生素Ⅷ號(hào)培養(yǎng)基  規(guī)格: 0.ml  Rat deoxypyridinoline,DPD  

標(biāo)準(zhǔn)平板計(jì)數(shù)瓊脂培養(yǎng)基  規(guī)格: 0.ml  Rat advanced glycation end products,AGEs

平板計(jì)數(shù)瓊脂  規(guī)格: 0.2ml  Rat omentin

動(dòng)力-吲哚-尿素培養(yǎng)基基礎(chǔ)  規(guī)格: 0.2ml  Rat Vitamin A,VA

醋鉛培養(yǎng)基  規(guī)格: 0.2ml  Rat Vitamin B2,VB2

EF-8瓊脂  規(guī)格: 0.2ml  Rat Vitamin B6,VB6

雙岐桿菌生化基礎(chǔ)培養(yǎng)基  規(guī)格: 0.ml  Rat Vitamin C,VC

營(yíng)養(yǎng)瓊脂斜面  規(guī)格: 0.ml  Rat Vitamin D,VD

月桂基鹽胰蛋白胨肉湯  規(guī)格: 0.ml  Rat Vitamin D2,VD2

月桂基鹽胰蛋白胨MUG培養(yǎng)基  規(guī)格: 0.ml  Rat Vitamin D3,VD3

EC肉湯  規(guī)格: 0.ml  Rat Vitamin E,VE

新生素增菌肉湯  規(guī)格: 0.ml  Rat Vitamin K,VK

mTSB肉湯  規(guī)格: 0.2ml  Rat Gastrointestinalcancer Marker-CA99

SD-39瓊脂  規(guī)格: 0.2ml  Rat Pepsin,PP

乳糖肉湯培養(yǎng)基  規(guī)格: ml  Rat Motilin,MTL
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)*,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。

 

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