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上海金穗生物科技有限公司

光鏡免疫金銀組織化學(xué)原理

時間:2012-10-13閱讀:691
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  免疫金銀染色(immunogold silver staining;IGSS)的基本原理是通過免疫反應(yīng)沉積在抗原位置的膠體金顆粒起著一種催化劑作用,用對苯二酚還原劑將銀離子(Ag+)還原成銀原子(Ag),被還原的銀原子圍繞金顆粒形成一個“銀殼”,“銀殼”一旦形成本身亦具有催化作用,從而使更多銀離子還原并促使“銀殼”越長越大,zui終使抗原位置得到清楚放大。

 
用銀增敏示意圖
 
    該方法只有在抗原存在的情況下,才有金顆粒并促使銀殼的形成。沒有抗原區(qū)域就沒有抗原—抗體反應(yīng),也就不會有顆粒存在,銀離子與對苯二酚的反應(yīng)則很慢,這樣光鏡下就能看到抗原—抗體反應(yīng)部位呈黑色或黑褐色。IGSS方法可提高抗原—抗體反應(yīng)部位金顆粒的可見度,它是一種簡便、特異而敏感的方法。
 
    IGSS可分直接法、間接法和搭橋法。
免疫金銀染色間接法                   免疫金銀染色搭橋法
Ag-抗原;Ab-特異抗體;Gab-金標(biāo)記抗體  Ag-抗原;Abl-特異性一抗;Ab2-橋聯(lián)抗體
         GP-金粒;SP-銀沉淀           Ab3-G-金標(biāo)抗體;GP-金顆粒;SP-銀沉淀

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