張經(jīng)理
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當(dāng)前位置:西安百螢生物科技有限公司>>熒光成像>> 22655Cell Navigator 溶酶體標(biāo)記試劑盒 藍色熒光
參 考 價 | 面議 |
產(chǎn)品型號22655
品 牌AAT Bioquest
廠商性質(zhì)代理商
所 在 地西安市
更新時間:2024-02-01 11:23:05瀏覽次數(shù):181次
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Cell Navigator 溶酶體標(biāo)記試劑盒 藍色熒光 是一套熒光成像工具,用于標(biāo)記亞細胞細胞器,如膜,溶酶體,線粒體,細胞核等?;罴毎麉^(qū)的選擇性標(biāo)記為研究空間細胞事件提供了一種強大的方法和時間背景。
該特定試劑盒設(shè)計用于在Ex / Em =350/440nm處以大斯托克斯位移的藍色熒光標(biāo)記活細胞的溶酶體。該試劑盒使用專有的溶解性染料,可能通過溶酶體pH梯度選擇性地積聚在溶酶體中。溶致指示劑,一種疏水性化合物,很容易滲透完整的活細胞,并被困在溶酶體內(nèi)。進入溶酶體后,其熒光顯著增強。這一關(guān)鍵特征顯著降低了其染色背景,使其可用于多種研究,包括細胞粘附,趨化性,多藥耐藥性,細胞活力,細胞凋亡和細胞毒性。該套件提供所有必要組件。 它適用于懸浮細胞和貼壁細胞。Cell Navigator 溶酶體標(biāo)記試劑盒 藍色熒光是美國AAT Bioquest研發(fā)的產(chǎn)品。
適用儀器
熒光顯微鏡 | |
Ex: | DAPI 濾波片組 |
Em: | DAPI 濾波片組 |
推薦孔板: | 黑色透明底板 |
通道: | DAPI 通道 |
分析方案
概述
準(zhǔn)備細胞
添加染料工作溶液
在37°C孵育30分鐘至2小時
在熒光顯微鏡下Ex / Em = 360 / 445nm(DAPI濾光片組)處進行分析
操作方法
1.準(zhǔn)備溶酶體染色溶液:
1.1解凍LysoBrite Blue(組分A)至室溫。
1.2通過將20μLLysoBrite Blue(組分A)稀釋到10mL活細胞染色緩沖液(組分B)中制備染料工作溶液。
注1:對于一個96孔板,20μLLysoBrite NIR(組分A)就足夠了。 將未使用的LysoBrite Blue(組分A)等分并儲存在<-20℃。 避光,避免反復(fù)凍融循環(huán)。
注2:熒光溶酶體指示劑的濃度根據(jù)具體應(yīng)用而變化。 可以根據(jù)特定細胞類型和細胞或組織對探針的滲透性來修改染色條件。
2.準(zhǔn)備和染色細胞:
2.1對于粘附細胞:在96孔黑色壁/透明底板(100μL/孔/ 96孔板)中或在裝有適當(dāng)培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿內(nèi)的蓋玻片上培養(yǎng)細胞。當(dāng)細胞達到所需的匯合時,加入等體積(如100μL/孔/ 96孔板)的染料加工溶液(來自步驟1.2)。將細胞在37℃,5%CO2培養(yǎng)箱中孵育30分鐘至2小時。使用配有Dapi過濾器組的熒光顯微鏡觀察細胞。
注意:如果細胞看起來沒有充分染色,建議增加標(biāo)記濃度或孵育時間以使染料積累。
2.2對于懸浮細胞:以1,000rpm離心細胞5分鐘以獲得細胞沉淀并吸出上清液。在預(yù)熱的生長培養(yǎng)基中輕輕重懸細胞沉淀,然后加入等體積的染料加工溶液(來自步驟1.2)。將細胞在37℃,5%CO2培養(yǎng)箱中孵育30分鐘至2小時。使用配有Dapi過濾器組的熒光顯微鏡觀察細胞。
注1:如果細胞看起來沒有充分染色,建議增加標(biāo)記濃度或培養(yǎng)時間以使染料積累。
注2:懸浮細胞可以附著在用BD Cell-Tak®(BD Biosciences)處理過的蓋玻片上,并作為貼壁細胞染色(見步驟2.1)。
圖1.使用Cell Navigator 溶酶體染色試劑盒染色的U2OS細胞圖像* Costar黑色96孔板中的藍色熒光*
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