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| 貨號 | LZ-01X6430 |
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商品介紹：
kFlour555 Click-iT EdU 流式檢測試劑盒,細胞增殖檢測是評估細胞健康程度、遺傳毒性及抗腫瘤藥物效果的基礎(chǔ)實驗手段。精確的檢測細胞增殖方法是BrdU法。EdU法檢測試劑盒是brdu方法的革命性突破。EdU（5-溴-2-脫氧niao嘧啶）試劑盒是一種嘧啶類似物，可以在DNA合成期整合入DNA雙鏈。EdU法檢測是基于“點擊"反應(yīng)，一種由銅催化的疊氮化合物和炔烴的原子共價反應(yīng)。本試劑盒中，EdU試劑含有炔烴，而kFlour555染料試劑含有疊氮化合物。點擊法的EdU標(biāo)記增殖快速有效，易于使用。只需少量的疊氮化染料即可非常有效地標(biāo)記出整合的EdU。標(biāo)準(zhǔn)化的固定和去污劑促滲可以使檢測試劑進入細胞，而brdu方法則需要DNA變性（如酸變性、熱變性或者用Dnase消化）去暴露BrdU，從而方便BrdU抗體結(jié)合。 |
中文名稱：kFluor555-EdU法細胞增殖檢測試劑盒(流式)
英文名稱：
產(chǎn)品規(guī)格：10T|20T|50T
產(chǎn)品貨號：LZ-01X6430
發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、實驗效果好，我司為您提供免費代測服務(wù)，同時提供最新價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關(guān)操作說明。
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
注意事項：
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用，不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底，避免開蓋時試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用，否則會影響使用效果。
4、樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導(dǎo)致錯誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長時間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融，否則將會增加空白吸收，從而影響檢測結(jié)果。最好小劑量分裝，用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性，則測定不含細胞，僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小，則可以直接加入 MTS ，如果吸光度相對較大，則需要除去培養(yǎng)基，并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細胞兩次，然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進行檢測。
9、細胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時間的長短根據(jù)細胞的類型和細胞的密度等實驗情況而定，對于大多數(shù)情況孵育 1 小時即可，白細胞需要培養(yǎng)較長時間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測，MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
培養(yǎng)操作步驟：
1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學(xué)檢測。
無孢蛋白(ASPN)英文名稱：ASPN ELISA Kit色c氧化1抗體包裝25ml
吻受體(KISS1R)英文名稱：KISS1R ELISA Kit表面趨化因子受體4相關(guān)蛋白4抗體包裝5ml
吻1(KISS1)英文名稱：KISS1 ELISA Kit表面趨化因子受體4相關(guān)蛋白6抗體包裝1g
胃泌抑制肽(GIP)英文名稱：GIP ELISA Kit表面趨化因子受體4相關(guān)蛋白8抗體包裝5g
胃泌(GT)英文名稱：GT ELISA Kit硫軟骨抗體包裝100g
胃蛋白原C(PGC)英文名稱：PGC ELISA Kit上皮類癌相關(guān)抗原抗體包裝25g
胃蛋白原A(PGA)英文名稱：PGA ELISA Kit磷化蛋白磷激PKC/CPI-17抗體包裝5g
味覺受體1型成員2(TAS1R2)英文名稱：TAS1R2 ELISA Kit著絲粒蛋白K包裝100g
尾加壓2受體(UTS2R)英文名稱：UTS2R ELISA Kit腫瘤/抗原1B包裝25g
維生D受體(VDR)英文名稱：VDR ELISA Kit轉(zhuǎn)鐵蛋白受體抗體包裝5g
維生D結(jié)合蛋白(DBP)英文名稱：DBP ELISA Kit8號染色體開放閱讀框K29抗體包裝1g
維生B9(VB9)英文名稱：VB9 ELISA Kit色P450 3A4抗體包裝250mg
維X受體α(RXRα)英文名稱：RXRα ELISA Kit色CYP2D1抗體包裝5g
圍脂滴蛋白4(PLIN4)英文名稱：PLIN4 ELISA KitCD33抗體包裝1g
微粒體S轉(zhuǎn)移1(MGST1)英文名稱：MGST1 ELISA Kit視網(wǎng)膜母瘤結(jié)合蛋白8抗體包裝5g
彼爾姆短桿菌Brevibacterium│permense 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品組織蛋白G試劑盒風(fēng)疹病IgG抗體參考品
銀耳Tremella│fuciformis 質(zhì)量規(guī)格：含量≥98.0%組織蛋白D試劑盒風(fēng)疹病IgM抗體參考品
筑波鏈霉菌Streptomyces│tsukubaensis 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥97.0%，標(biāo)準(zhǔn)品組織蛋白C試劑盒紫堇塊莖堿;Corytuberine
kFluor555-EdU法細胞增殖檢測試劑盒(流式)雷夫松氏 1,4-二溴-2,3-二氟苯維生B12Elisa
白酒 酒精度 3,4,5-三噠維生B2Elisa
桔綠木霉 2,6-吡啶二羧酸二乙酯維生B6Elisa
線蟲被毛孢 1-甲基-3,5-二硝基-2-吡啶酮維生CElisa
枯草芽孢桿 4-苯乙維生DElisa
紫紅曲霉 2,4-二溴-6-氟苯維生D2Elisa
釀酒酵母 2-苯乙鹽酸鹽維生D3Elisa
塔賓曲霉 4--3-乙基維生D受體Elisa
釀酒酵母 單水合物維生EElisa
pAAV-RC2 4--2-氟苯磺酰維生K1Elisa
蕈狀芽孢桿 己二酸二乙酯維生K2Elisa
光黑腹 丁酸香茅酯尾加壓Ⅱ相關(guān)肽Elisa
蜂房哈夫尼 酸香茅酯尾加壓IIElisa
草木樨中華根瘤 橙花乙酸酯胃癌抗原MG7-AgElisa
雞葡萄球 環(huán)己烯-1-酸頻哪酯胃腸癌標(biāo)志物CA199Elisa
(空格分隔,最多3個,單個標(biāo)簽最多10個字符)
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