上海博湖生物科技有限公司
主營產(chǎn)品: 高密度脂蛋白ELISA檢測試劑盒,同型半胱氨酸ELISA檢測試劑盒,游離脂肪酸ELISA檢測試劑盒 |
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公司信息
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- 陳經(jīng)理
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- 上海閔行區(qū)碧泉路36弄銀宵大廈B102
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- 200000
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- www.shbhbio-e.com
參考價(jià) | ¥1500 |
-
型號
-
品牌
其他品牌 -
廠商性質(zhì)
經(jīng)銷商 -
所在地
上海市
1×106 | 1500元 | 15 件 可售 |
更新時(shí)間:2024-12-05 13:59:08瀏覽次數(shù):690
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公司產(chǎn)品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
NRK-49F正常大鼠腎細(xì)胞 | 1×106 | P-X1138 |
1、細(xì)胞傳代:
1)細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的 80%面積時(shí),棄 25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用 PBS 清洗細(xì)胞一次;
2)添加 0.25%消化液約 1ml 至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后加入 5ml 培養(yǎng)
液終止消化,再輕輕吹打細(xì)胞使之脫落,然后將懸液轉(zhuǎn)移至 15ml 離心管中,1000rpm 離心 5min;
3)棄上清,沉淀細(xì)胞用 1-2ml 培養(yǎng)基重懸,然后按 1:2 比例進(jìn)行分瓶傳代,最后放入 37℃,5%CO2細(xì)胞
培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
2、細(xì)胞凍存:
1)細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的 80%面積時(shí),棄 25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用 PBS 清洗細(xì)胞一次;
2)添加 0.25%消化液約 1ml 至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后加入培養(yǎng)液終
止消化,輕輕吹打細(xì)胞使之脫落,然后將懸液轉(zhuǎn)移至 15ml 離心管中,1000rpm 離心 5min;
3)用適量的凍存液(FBS:DMSO=9 :1)重懸細(xì)胞,并放置于凍存管中;
4)先將細(xì)胞凍存管放置于-20℃ 1.5h,然后將其移入-80℃過夜,24h 后轉(zhuǎn)入液氮中進(jìn)行長期保存。使用程序
降溫盒可直接放入-80℃。
二、細(xì)胞培養(yǎng)操作
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考,具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。將含有1 mL細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min,棄去上清液,加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10 cm皿中,加入約8 mL培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
b、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,使消化液浸潤所有細(xì)胞,將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2 min(視細(xì)胞情況而定),然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無菌離心管中,1000 rpm離心5 min,棄去上清液,補(bǔ)加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。
c、將細(xì)胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。 3) 細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例;a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液,裝入無菌離心管中,1000 rpm條件下離心4 min,棄去上清液,用PBS清洗一遍,棄盡PBS,進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液,使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL,輕輕混勻,每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識。將凍存管放入-80℃冰箱,24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
三、培養(yǎng)注意事項(xiàng)
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請及時(shí)和我們聯(lián)系。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細(xì)胞因子等,確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題,責(zé)任由 客戶自行承擔(dān)。
3. 用 75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題,部分細(xì)胞由于溫度 變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正常現(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。
4. 貼壁細(xì)胞可以消化,懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞,900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細(xì)胞,再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,用新鮮的培養(yǎng)基重懸 細(xì)胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。
6. 建議客戶收到細(xì)胞后前 3 天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和我司技術(shù)部溝通 交流。由于運(yùn)輸?shù)脑?,個別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時(shí)和我們聯(lián)系,告知細(xì)胞 的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。
7. 該細(xì)胞僅供科研使用。
8. 備注:運(yùn)輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞,請換用按照說明書細(xì)胞培 養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。 收到細(xì)胞后第一次傳代建議 1:2 傳代 。
9. 注意: 1:2 傳代就是 1 個 T25 瓶傳 2 個 T25 瓶或者 2 個 6cm 皿。不是 1 個 T25 瓶傳 2 個10cm 皿。
公司正在出售的產(chǎn)品:
Nox1: 有絲分裂氧化酶1抗體 SGK3 Others Human 人 SGK3 / SGKL 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
(含100mL 酶解緩沖液) 10mL 大鼠Ⅹ(FⅩ)ELISA 試劑盒 p53(Mouse p53/tumor protein) 小鼠p53 96T
NADPH oxidase 3: NADPH oxidase 3抗體 22RV1細(xì)胞,前列腺癌細(xì)胞 人肝癌細(xì)胞,Bel-7405細(xì)胞 CL-0024Anglne(人卵巢癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
HA Others H4N8 甲型流感 H4N8 (A/chicken/Alabama/1/1975) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 大鼠Ⅹ(F10)ELISA試劑盒 cGMP(Mouse Cyclic guanosine monophosphate) 小鼠環(huán)0酸鳥苷 96T
NADPH oxidase 4: NADPH氧化酶NOX家族的成員4抗體 小腸血管內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
CXCL16 Others Rat 大鼠 CXCL16 / SR-PSOX 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 牛支原體ELISA試劑盒 PAP2c (Phosphatidic acid phosphatase 2c) 0脂酸0酸酶2C(抗原) 0.5mg
phospho-c-Jun(Thr93): 0酸化原癌基因c-Jun抗體 小鼠漿細(xì)胞瘤;MPC-11
L929細(xì)胞,小鼠肺成纖維細(xì)胞 SGC7901(胃腺癌細(xì)胞) 大鼠腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞;C6 牛載脂蛋白B100(apo-B100)ELISA 試劑盒 PEPT1 (Peptide-transporters 1) 腸道肽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(小肽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白)多肽 0.5mg
JAK2: 蛋白質(zhì)酪酸激酶JAK2抗體 ICAM1 Others Mouse 小鼠 ICAM-1 / CD54 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
人腎系膜細(xì)胞cDNAHRMC cDNA 牛孕激素/孕酮(PROG)ELISA 試劑盒 PTEN/MMAC1 一種抑制基因抗原 0.5mg
NRK-49F正常大鼠腎細(xì)胞Hacat 人永生化角質(zhì)細(xì)胞 大鼠Wolfram綜合征蛋白1(WFS1)ELISA試劑盒 Human hypothetical protein LOC677340 人假定蛋白LOC677340 96T
RNF12: 環(huán)指蛋白12抗體 SH-77細(xì)胞,小細(xì)胞肺癌 人T細(xì)胞白血病細(xì)胞,T-CEM細(xì)胞 人T淋巴瘤轉(zhuǎn)基因細(xì)胞;Jurkat D,E
EPHA4 Others Human 人 EPHA4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 大鼠WAP四二硫化物核心域蛋白1(WFDC1)ELISA試劑盒 Human hypothetical protein LOC433328 人假定蛋白LOC433328 96T
RNF113B: 環(huán)指蛋白113B抗體 羅猴胎腎細(xì)胞;MA104
CM-R115大鼠小梁網(wǎng)細(xì)胞培養(yǎng)基100mL 大鼠V-Rel網(wǎng)狀內(nèi)皮增生病毒癌基因同源物A(RELA)ELISA試劑盒 MYD88(Human myeloid differentiation primary response gene 88) 人髓樣分化因子初次應(yīng)答基因88 96T