上海博湖生物科技有限公司
主營產(chǎn)品: 高密度脂蛋白ELISA檢測試劑盒,同型半胱氨酸ELISA檢測試劑盒,游離脂肪酸ELISA檢測試劑盒 |
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實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程,通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR
產(chǎn)品名稱 | |
英文名稱 | Omphalia |
貨號(hào) | BH-P99511 |
產(chǎn)品及特點(diǎn):
本產(chǎn)品包含Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反應(yīng)緩沖液,濃度為2×。具有快速簡便、靈敏度高、特異性強(qiáng)、穩(wěn)定性好等優(yōu)點(diǎn),可大限度的減少人為誤差。使用時(shí)只需加入DNA模板和引物既可。使用方便快捷,能避免PCR操作過程中的污染,使用時(shí)只需取適量2×TaqPCR MasterMix溶液,加入模板和引物,并加入去離子水補(bǔ)足體積,使MasterMix溶液濃度為1×即可進(jìn)行反應(yīng)。使用前請保證充分溶解并混勻,操作需在冰上進(jìn)行。本產(chǎn)品就是為此目的根據(jù) PCR 原理開發(fā)的試劑盒。
具有高靈敏度、高特異性、高穩(wěn)定性
可在同一個(gè)管子中高特異性的執(zhí)行cDNA合成與基于探針的qPCR反應(yīng)。更多優(yōu)點(diǎn)如1.的特異性;2.多重反應(yīng)(高通量);3.反應(yīng)體系配置,無需冰塊;4.無懼高GC含量PCR;5.預(yù)防交叉污染;6.廣泛的設(shè)備兼容性。
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位);在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板??芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
EPHB1 Others Mouse 小鼠 EphB1 / EPHT2 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (標(biāo)準(zhǔn)品)Gentamicin質(zhì)量規(guī)格:效價(jià)測定
人胚肺成纖維細(xì)胞;HFL-ISV(標(biāo)準(zhǔn)品)Rifamycin 質(zhì)量規(guī)格:效價(jià)測定
F81細(xì)胞,貓腎細(xì)胞 人結(jié)腸癌細(xì)胞,LS174T細(xì)胞 CM-H085人臍動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mLSL327SL-327質(zhì)量規(guī)格:>98%,MEK1/2抑制劑
正常大鼠腎細(xì)胞(EGF受體陽性);NRK49F(標(biāo)準(zhǔn)品)Midecamycin質(zhì)量規(guī)格:效價(jià)測定
SCARB1 Others Human 人 SCARB1 / CD36L1 / CLA-1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (標(biāo)準(zhǔn)品)Tobramycin Base質(zhì)量規(guī)格:效價(jià)測定
F9 Others Mouse 小鼠 Coagulation Factor IX / FIX / F9 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 4,4'-異亞丙基二苯氧基乙酸(>98.0%(HPLC)(T))4,4'-Isopropylidenediphexyacetic Acid質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(T)
HL-60 人原髓細(xì)胞白血病細(xì)胞四溴雙酚A(>98.0%(GC)(T))Tetrabromobisphel A質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)(T)
COLO 320DM 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞 COLO 320DM human colorectal adecarcima cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS2-乙酰氨基-2-脫氧-D-半乳糖醛酸2-Acetamido-2-deoxy-D-galacturonic Acid質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
PGF Protein Mouse 重組小鼠 PIGF / PLGF 蛋白2-去乙氧基-2-羥基-1氫-1-乙基2-Desethoxy-2-hydroxy-1H-1-Ethyl Candesartan Cilexetil質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
大鼠周神經(jīng)成纖維細(xì)胞(RPNF)(5×105) HEC-1A, 人內(nèi)膜癌細(xì)胞系 Human甲氧基類似物Candesartan Cilexetil Methoxy Analogue質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
NCR2 Others Human 人 NKp44 / NCR2 / CD336 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) Delta-催激素質(zhì)量規(guī)格:>95%,BRDelta-MSH
小鼠樹突狀細(xì)胞肉瘤細(xì)胞;DCS內(nèi)皮素2,人,犬質(zhì)量規(guī)格:>95%,BREndothelin 2 (human, canine)
CD300LG Others Human 人 CLM-9 / EM4 / CD300LG 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 內(nèi)皮素3,人,大鼠質(zhì)量規(guī)格:>95%,BREndothelin 3, human, rat
SK-N-BE(2)人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞 SK-N-BE (2) in human neuroblastoma cell MEM 45%+/F12 45%+10% FBS趨嗜曙紅細(xì)胞肽質(zhì)量規(guī)格:>95%,BREosiphilotactic Peptide
TG-905細(xì)胞,人腦膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞 熒光假單胞菌 人滋養(yǎng)層絨毛細(xì)胞總RNAHVT NA結(jié)晶玫瑰(>98%,BR)質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRα-(Trichloromethyl)benzyl acetate
雷丸PCR鑒定試劑盒直銷小鼠海馬趾神經(jīng)細(xì)胞(MH-h)(1×106)還原靛藍(lán),英文名或英文縮寫:Indigo,級(jí)別:CP,98%,規(guī)格:1毫克
犬源細(xì)胞硼醋 Boric ccid (cS);Borofcx 11113-20-1
小鼠骨髓瘤細(xì)胞;P3/NSI/1-Ag4-1 小鼠胎兒表皮角質(zhì)形成層細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL茜素紅S,英文名或英文縮寫:Alizarin red,級(jí)別:FMP,50%,規(guī)格:5克
COS-7L, 非洲綠猴腎成纖維細(xì)胞 其它GENEPAGEPLUS5.25%6MUREA*CLDPAK5.25% GENE