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參數規(guī)格：
產品名稱：PMI基因PCR檢測試劑盒
產品貨號：CP100218
產品規(guī)格：48T  0.1PCR管/48T   0.2PCR管
產品分類：PCR-熒光探針法
產品運輸：低溫運輸
產品保存：-20℃保存
產品有效期：一年
產品特點：本產品就是根據保守區(qū)設計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產品。
PCR反應鑒定——PCR反應條件:

實驗過程：
一、試劑準備
1. DNA模板
2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
      10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
      引物1（10pM）               2μl
      引物2（10PM）              2μl
      Taq酶（2U/μl）            1μl
      DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
     加ddH2O至               50 μl
     視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
實驗注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
使用方法：
一、樣品DNA的制備
用自選方法提取細菌樣品DNA。注意：DNA純化方法是決定檢測靈敏度的關鍵因素。如果不能很好純化樣品DNA，后面的PCR再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備O157:H7標準曲線（以10-10E6這6個10倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原，本產品不提供活體病毒做陽性對照，只提供沒有傳染性的、可以直接使用的DNA片段作為陽性對照。
1. 標記6個離心管，分別為6，5，4，3，2和1號。
2. 用帶芯槍頭分別加入45 μL超純水（用帶芯槍頭，下同）。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用TE緩沖液或超純水10倍梯度稀釋到10E7拷貝/μL（注：請不要將本試劑盒提供的標準品一次性稀釋至10E7拷貝/μL，建議每次稀釋10倍，梯度稀釋至10E7拷貝/μL）。
4. 在6號管中加入5 μL 10E7拷貝/μL的O157:H7陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩1分鐘，得10E6拷貝/μL的陽性對照。
5. 換槍頭，從6號管中取5 μL溶液到5號管中，充分震蕩1分鐘，得10E5拷貝/μL的陽性對照。
6. 換槍頭，從5號管中取5 μL溶液到4號管中，重復上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。
7. NC管中不加任何陽性對照。
8. 從1-6號管中分別取5 μL和待測樣品一起進行定量PCR（見下步），每個樣品做3次重復。PCR后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光PCR Ct值，并以之為縱軸，以濃度的對數值為橫軸，繪制標準曲線。
實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程，最后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括定量和相對定量）和定性分析。
主要服務：DNA或RNA的定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術：引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
好食脈孢菌酶2抗體Human HARS(Histidyl-tRNA synthetase, cytoplasmic) ELISA Kit人蛋白磷酸酶1調控/抑制因子亞基1A(PPP1R1A)免疫試劑盒

釀酒酵母碳水化合物磺基轉移酶10抗體Human IKBKE(Inhibitor of nuclear factor kappa-B kinase subunit epsilon) ELISA Kit人蛋白磷酸酶自身抗體免疫試劑盒

黃疣倫茨氏菌碳水化合物磺基轉移酶11抗體Human PKD2(Polycystin-2) ELISA Kit人蛋白磷酸酶1B(PTP1B)免疫試劑盒

植物乳桿菌碳水化合物磺基轉移酶12抗體Human IFIT1(Interferon-induced protein with tetRatricopeptide repeats 1) ELISA Kit人蛋白聚糖4(PRG4)免疫試劑盒

葉點霉屬碳水化合物磺基轉移酶13抗體Human ICAM-4(Intercellular adhesion molecule 4) ELISA Kit人蛋白脫亞氨酶4(PADI4)免疫試劑盒

雞冠蘑碳水化合物磺基轉移酶14抗體Human SDCBP(Syntenin-1) ELISA Kit人蛋白甲基轉移酶1(PRMT1)免疫試劑盒

釀酒酵母碳水化合物磺基轉移酶2抗體Human ICAM-4(Intercellular adhesion molecule 4) ELISA Kit人蛋白激酶C(PKC)免疫試劑盒

三葉草根瘤菌碳水化合物磺基轉移酶3抗體Human PKD2(Polycystin-2) ELISA Kit人蛋白激酶C beta II(PKC-bII)免疫試劑盒

猴假單胞菌碳水化合物磺基轉移酶5抗體Human LOXL2(Lysyl oxidase homolog 2) ELISA Kit人蛋白激酶B(PKB)免疫試劑盒

意大利果殼葉點霉碳水化合物磺基轉移酶6抗體Human FMOD(Fibromodulin) ELISA Kit人蛋白基因產物9.5(PGP 9.5)免疫試劑盒

卵形絲孢酵母染色質修飾蛋白CHMP7抗體Human FAM132B(Protein FAM132B) ELISA Kit人蛋白二硫化物異構酶A3(PDIA3)免疫試劑盒

純白環(huán)菇軟骨凝集蛋白CHODL抗體Human DTNBP1(Dysbindin) ELISA Kit人蛋白S(Protein S)免疫試劑盒

栗酒裂殖酵母膽囊收縮素39抗體Human ZEB1(Zinc finger E-box-binding homeobox 1) ELISA Kit人蛋白C(PC)免疫試劑盒

擬卵蓋鵝膏菌乙激酶α抗體Human EBLN1(Endogenous Bornavirus-like nucleoprotein 1) ELISA Kit人蛋白ATP1B4(ATP1B4)免疫試劑盒

庫爾勒海洋桿菌陽離子通道相關蛋白4抗體Human SORD(Sorbitol dehydrogenase) ELISA Kit人蛋白(肽酰脯氨酰順/反異構酶)NIMA結合1(PIN1)免疫試劑盒

黑曲霉胞漿動力蛋白中間鏈1抗體Human MTOR(Serine/threonine-protein kinase mTOR) ELISA Kit人蛋白 DJ-1(PARK7)免疫試劑盒
PMI基因PCR檢測試劑盒地中海馬特爾氏菌Martelella│mediterranea 質量規(guī)格：>98%,BRPC4,SFRS1互動蛋白1試劑盒鄰甲氧基肉桂酸

側柄褐孔菌Fuscoporia│discipes 質量規(guī)格：BRP53抗體elisa試劑盒雷帕霉素

新城疫病毒Rubulavirus│Newcastle disease virus 質量規(guī)格：鉍含量：>56%,BRP2蛋白抗體試劑盒克班寧

鴨瘟立默氏菌Riemerella│anatipestifer 質量規(guī)格：>99%,BRP2蛋白抗體試劑盒苦龍膽酯苷

芽孢桿菌屬菌種Bacillus│T. 質量規(guī)格：>98%，植物激素級P27蛋白試劑盒康普瑞汀磷酸二鈉

釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質量規(guī)格：BRP0蛋白抗體試劑盒康普瑞汀

黑曲霉Aspergillus│niger 質量規(guī)格：Ind GradeP0蛋白抗體試劑盒卡枯

短桿菌Brevibacterium│sp. 質量規(guī)格：BS GradeOJ抗體/抗異亮氨酰tRNA合成酶抗體試劑盒柯伊利素-7-O-葡萄糖苷

豬丹毒絲菌Erysipelothrix│rhuriopathiae 質量規(guī)格：>80%,Ind GradeN-乙?；?絲氨酰-天門冬酰-賴氨酰-試劑盒柯諾辛B