上海莼試生物技術(shù)有限公司
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更新時(shí)間:2017-06-01 09:28:25瀏覽次數(shù):679
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細(xì)胞名稱 新生牛睪支持細(xì)胞系;NBS
形態(tài)特性 上皮樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞屬保藏,其特征特性尚未公開。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 未定
新生牛睪支持細(xì)胞系;NBS實(shí)驗(yàn)方法和步驟
(一) 前處理 用臺(tái)稱稱量青蛙或蟾蜍的體重,然后按10微克/克動(dòng)物體重的劑量,腹腔注射秋水仙素。
(二) 取材 注射4小時(shí)后,將動(dòng)物處死,用剪刀剪開皮膚和肌肉,取出大腿骨和脛骨,剔凈股骨上的肌肉,然后用一小塊紗布來(lái)回搓干凈。剪開兩端股骨,用注射器(內(nèi)裝5ml 1% 檸檬酸鈉溶液)緩慢沖洗骨髓細(xì)胞到離心管中,經(jīng)平衡后離心8分鐘,速度為1000轉(zhuǎn)/分鐘。
(三) 低滲 吸去上清液,留沉淀物0.2ml,加0.046M KCL 溶液至8 ml 刻度,用吸管沖勻沉淀物,在恒溫水浴(28℃)處理20分鐘或更長(zhǎng)一點(diǎn)時(shí)間。
(四) 固定 低滲后,以每分鐘1000轉(zhuǎn)速度離心10分鐘。用吸管小心吸去上清液,留0.2ml沉淀物,沖散后沿管壁慢慢加入6ml固定液。 沖勻后靜止固定20分鐘。重復(fù)固定1~2次,離心的速度與時(shí)間以上述相同。
(五) 滴片 吸去上清液,留0.2ml沉淀物,加4滴新配的固定液,沖勻沉淀物。從冰箱取出預(yù)先冷凍的載片,每片滴3滴細(xì)胞懸液,立即用嘴向載片上吹氣,使細(xì)胞均勻分散,在酒精燈火焰上來(lái)回烤一下,以助染色體更好分散和展開。 (六) 染色 用10:1 Giemsa染液染色20分鐘(Giemsa原液用PH=6.8磷酸緩沖液稀釋),然后用水沖洗,片干后鏡檢。 (七) 鏡檢 在中倍鏡下找染色體分散好的中期分裂相,轉(zhuǎn)至高倍鏡詳細(xì)觀察兩棲類染色體的數(shù)目,屬于大、中、小染色體各有多少條。
注意事項(xiàng):
1.收到細(xì)胞后,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請(qǐng)立即與我們。
2.收到細(xì)胞先不開瓶蓋,瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置2-4小時(shí)(視細(xì)胞密度而定)穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。接著在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收細(xì)胞時(shí)就整體外觀拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,隨后在顯微鏡下拍下細(xì)胞狀態(tài),100*,200*各一張),觀察記錄細(xì)胞在運(yùn)輸過(guò)程中是否有污染情況。作為我方進(jìn)行銷售依據(jù)。
3.由于細(xì)胞狀態(tài)受環(huán)境、操作和運(yùn)輸?shù)榷喾矫嬉蛩赜绊?,故本公司只保證客戶收到細(xì)胞后一周內(nèi)的細(xì)胞狀態(tài),故客戶需要售后時(shí)需出示收到細(xì)胞的時(shí)間證明及客戶提供收貨時(shí)間和發(fā)現(xiàn)問(wèn)題后客服人員溝通的時(shí)間證明,期間間隔時(shí)間不能大于7天。
4.所有動(dòng)物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作,并請(qǐng)注意防護(hù),所有廢液及接觸過(guò)此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
ANPEP cDNA Mouse 小鼠 ANPEP 基因全長(zhǎng)ORF克隆
病毒基因
HA cDNA H5N1 甲型流感 H5N1 (bar-headed goose/Qinghai/1A/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (密碼子優(yōu)化)
HA cDNA H5N1 甲型流感 H5N1 (chicken/Yamaguchi/7/2004) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (密碼子優(yōu)化)
HA cDNA H5N1 甲型流感 H5N1 (Thailand/1(KAN-1)/2004) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (密碼子優(yōu)化)
NA cDNA H5N1 甲型流感 H5N1 (Thailand/1(KAN-1)/2004)神經(jīng)氨酸酶 (Neuraminidase / NA) 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (密碼子優(yōu)化)
HA cDNA H1N1 甲型流感 H1N1 (Beijing/22808/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (密碼子優(yōu)化)
HA cDNA H5N1 甲型流感 H5N1 (Cambodia/S1211394/2008) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (密碼子優(yōu)化)
HA cDNA H4N8 甲型流感 H4N8 (chicken/Alabama/1/1975) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (密碼子優(yōu)化)
NA cDNA H3N2 甲型流感 H3N2 (Babol/36/2005)神經(jīng)氨酸酶 (Neuraminidase / NA) 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (密碼子優(yōu)化)
HA cDNA Influenza B 乙型流感 (Brisbane/60/2008) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (密碼子優(yōu)化)
HA cDNA H1N1 甲型流感 H1N1 (New York/18/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (密碼子優(yōu)化)
HA cDNA H4N4 甲型流感 H4N4 (mallard duck/Alberta/299/1977) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (密碼子優(yōu)化)
HA cDNA H1N1 甲型流感 H1N1 (Ohio/07/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (密碼子優(yōu)化)
HA cDNA H1N1 甲型流感 H1N1 (Texas/05/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (密碼子優(yōu)化)
HA cDNA H1N1 甲型流感 H1N1 (England/195/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (密碼子優(yōu)化)
HA cDNA H17N10 甲型流感 H17N10 (little yellow-shouldered bat/Guatemala/164/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (密碼子優(yōu)化)
HA cDNA H12N3 甲型流感 H12N3 (bar headed goose/Mongolia/143/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (密碼子優(yōu)化)
HA cDNA H9N2 甲型流感 H9N2 (Hong Kong/3239/2008) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (密碼子優(yōu)化)
HA cDNA H5N1 甲型流感 H5N1 (Hubei/1/2010) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (密碼子優(yōu)化)
HA cDNA H5N1 甲型流感 H5N1 (Egypt/3300-NAMRU3/2008) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (密碼子優(yōu)化)
NA cDNA H5N1 甲型流感 H5N1 (Egypt/2321-NAMRU3/2007)神經(jīng)氨酸酶 (Neuraminidase / NA) 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (密碼子優(yōu)化)
NA cDNA H9N2 甲型流感 H9N2 (HongKong/1073/99)神經(jīng)氨酸酶 (Neuraminidase / NA) 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (密碼子優(yōu)化)
NA cDNA H12N5 甲型流感 H12N5 (green-winged teal/ALB/199/1991) 神經(jīng)氨酸酶 (Neuraminidase / NA) 基因全長(zhǎng)ORF克隆
NA cDNA H5N3 甲型流感 H5N3 (duck/Hokkaido/167/2007) 神經(jīng)氨酸酶 (Neuraminidase / NA) 基因全長(zhǎng)ORF克隆
NA cDNA H4N6 甲型流感 H4N6 (mallard/Ohio/657/2002) 神經(jīng)氨酸酶 (Neuraminidase / NA) 基因全長(zhǎng)ORF克隆
NA cDNA H4N4 甲型流感 H4N4 (mallard duck/Alberta/299/1977) 神經(jīng)氨酸酶 (Neuraminidase / NA) 基因全長(zhǎng)ORF克隆
NA cDNA H3N8 甲型流感 H3N8 (canine/New York/145353/2008) 神經(jīng)氨酸酶 (Neuraminidase / NA) 基因全長(zhǎng)ORF克隆
NA cDNA H9N2 甲型流感 H9N2 (Chicken/Hong Kong/G9/1997) 神經(jīng)氨酸酶 (Neuraminidase / NA) 基因全長(zhǎng)ORF克隆