血清儲存和解凍:建議血清保存在-20℃。若存放于4℃時,請勿超過一個月。若一次無法用完一瓶,建議無菌分裝血清至恰當?shù)臏缇萜鲀?再放回冷凍,避免反復凍融。血清解凍,將血清從冷凍箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室溫下使之全融(建議:融解過程中不時規(guī)則地搖晃均勻)
Gibco胎牛血清
化學檢測
A 生化檢測:膽固醇、甘油三酯、膽紅素 、尿素、尿酸、葡萄糖、谷丙轉氨酶、高筒、、雌二醇等檢測
B 微量元素檢測:鉀、鈉,鐵、氯化物、鈣、鎂、總鐵結合力、血清唾液酸等檢測
C 蛋白檢測:白蛋白和球蛋白檢測
?、啤⑽⑸餀z查
?、?、細菌和真菌:直接培養(yǎng)法
②、支原體檢測:培養(yǎng)法,DNA熒光染色
?、?、病毒檢測:直接熒光抗體檢測
牛蘭舌病毒 Bovin blue tongue;
牛腺病毒 Bovine Adenovirus;
牛細小病毒 Bovine Parvovirus;
牛病毒性腹泄病毒 Bovine Viral Diarhea Virus;
狂犬病病毒 Rabies;
呼腸弧病毒 Reovirus;
牛呼吸道合胞病毒 BRSV;
副流感病毒Ⅲ型 Parainfluenza。
Gibco胎牛血清使用中的注意事項:
1、血清儲存和解凍:建議血清保存在-20℃。若存放于4℃時,請勿超過一個月。若一次無法用完一瓶,建議無菌分裝血清至恰當?shù)臏缇萜鲀?再放回冷凍,避免反復凍融。血清解凍,將血清從冷凍箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室溫下使之全融(建議:融解過程中不時規(guī)則地搖晃均勻)、
2、如何選擇血清:血清產品因牛個體、環(huán)境變化批次間存在較大差異,選擇血清產品要看重批次,國外*有品牌優(yōu)勢,但也不是每批產品都值得信賴。李記血清,每一批次都要進行多項指標測試,并由專業(yè)實驗室進行十余種養(yǎng)細胞培養(yǎng)檢測后才推向市場,我們zui大程度的確保產品批次間穩(wěn)定,提高實驗重現(xiàn)性。
3、哪些原因容易導致血清產生沉淀:1)溫度改變太大,血清由-20℃直接放入37℃解凍,因溫度改變劇烈容易導致沉淀;2)血清放置37℃時間太久,血清中的不穩(wěn)定成分會被破壞,導致血清品質變差,也會產生沉淀;3)血清分裝凍存時,注意在不產生氣泡的情況下?lián)u晃均勻,避免因成分不均勻導致部分血清成分濃度改變產生沉淀;4)血清滅活非常容易產生沉淀,如必須滅活請按56℃,30分鐘,輕微搖晃原則操作,滅活溫度高、時間長、搖晃不均都容易產生沉淀。
4、血清是否滅活:加熱可滅活血清中補體系統(tǒng),在極少數(shù)情況下(培養(yǎng)ES細胞,平滑肌細胞時)建議滅活,在培養(yǎng)其余細胞時不建議滅活血清。
5、無血清培養(yǎng)基:無血清培養(yǎng)基在結果重復性、細胞體外分化方面有優(yōu)勢,但是,血清仍然是培養(yǎng)液中zui基本的添加物,尤其是在原代培養(yǎng)或細胞生長狀態(tài)不良時,常常會先使用有血清的培養(yǎng)液進行培養(yǎng),待細胞生長旺盛后再換成無血清培養(yǎng)液。