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更新時(shí)間:2018-01-18 07:26:34瀏覽次數(shù):562次

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1) 血清來源:可從世界各國(guó)收集胎牛血清,但是必須符合他的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)和美國(guó)*進(jìn)口要求。地方當(dāng)局還不清楚本地是否有牛海綿狀病毒流行的血清不收集,有說明血清質(zhì)量的證明資料:包括收集過程的全部資料、檢驗(yàn)結(jié)果和交付情況。
2)血清的收集:胎牛血清是心臟穿刺取血,新生牛(10~14天)和小牛(10個(gè)月內(nèi))血清靜脈取血。血清采集條件必須符合工業(yè)生產(chǎn)的標(biāo)準(zhǔn):低溫下采集、一次分離、分離后立即混合凍存。符合要求的血清56℃水浴30分鐘滅
活。
3)血清的制備:
a. 超低IgG胎牛血清:通過親和層析工藝去除胎牛血清中的γ球蛋白,使FBS γ球蛋白含量減到zui低,一般IgG≤5ug/ml,生物學(xué)活性不變。
b. 血清透析:用12000~14000分子量的透析膜在0.15M NaCl中透析直到使葡萄糖含量<0.5mg/ml(用葡萄糖氧
化酶/過氧化酶方法測(cè)定)。
c. γ-射線照射:已經(jīng)證明γ-射線照射可以有效滅活血清中可能污染的病毒、支原體。照射劑量為30~45KG。
而且這個(gè)劑量的γ-射線照射不會(huì)改變血清的理化性質(zhì)和對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)的影響。
4)除菌過濾:經(jīng)過上述處理的粗制血清再經(jīng)過一系列除菌濾膜過濾包括0.2微米(micron)和0.1微米濾膜。FBS要
通過三層0.1微米濾膜,其他血清可通過0.2微米濾膜。
 

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