人腦血管平滑肌細(xì)胞
細(xì)胞傳代的一般方法
開始人腦血管平滑肌細(xì)胞傳代前,仔細(xì)檢查細(xì)胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全:一般主要有:細(xì)胞(單層細(xì)胞,鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-0.2%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或199等適合細(xì)胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、*溶液(1萬(wàn)單位)、7.5%NaHC03溶液、0.25%*、PBS洗液。
用具:小方瓶(100m1)、克氏瓶、膠塞、吸管(10ml、1m1)、細(xì)胞吹打管(20 ml)(以上用具需經(jīng)121℃至少15分鐘高壓滅菌)
C02孵箱、超凈臺(tái)、倒置顯微鏡、4℃、—20℃冰箱
操作步驟:鏡檢,挑選生長(zhǎng)狀態(tài)良好,細(xì)胞界限清晰,具有立體感,形態(tài)好無(wú)污染、無(wú)異常及可疑病變細(xì)胞。配制細(xì)胞培養(yǎng)液:按以下配比配制MEM-0.2%LH培養(yǎng)液100ml內(nèi),加入滅活小牛血清10m1,*溶液0.3m1,7.5%*溶液3ml。(僅供一般參考)。消化細(xì)胞;先用PBS洗液沖洗細(xì)胞表面1-2次,每次10m1,棄去洗液,向細(xì)胞瓶?jī)?nèi)加入0.25%*溶液,每瓶1m1,細(xì)胞瓶平放,使消化液*覆蓋細(xì)胞表面。至細(xì)胞*脫落到*中。每瓶加入10m1細(xì)胞培養(yǎng)液吹打分散細(xì)胞,按所需的傳代比例分裝于小方瓶(100m1)中,再加入10m1細(xì)胞培養(yǎng)液重復(fù)吹打一次后分裝,然后補(bǔ)加至所需培養(yǎng)量。加塞,置于37±1℃孵箱培養(yǎng)。約2~4天成片。
其它供應(yīng)新產(chǎn)品:
xy-E11283 人A組鏈球菌菌壁多糖抗體(ASP)ELISA試劑盒
xy-E11284 人活化蛋白C抵抗素(APCR)ELISA試劑盒
xy-E11285 人N端外顯肽(Ext-N)ELISA試劑盒
xy-E11286 人分泌成分(SC)ELISA試劑盒
xy-E11287 人二磷酸腺苷(ADP)ELISA試劑盒
xy-E11288 人蛋白聚糖(PG)ELISA試劑盒
xy-E11289 人吡啶酚(PYD)ELISA試劑盒
xy-E11290 人5羥基吲哚乙酸(5-HIAA)ELISA試劑盒
xy-E11291 人12羥二十烷四烯酸(12-HETE)ELISA試劑盒
xy-E11292 人羥*(Hyp)ELISA試劑盒
xy-E11293 人一氧化氮(NO)ELISA試劑盒
xy-E11294 人上皮中性粒細(xì)胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)ELISA試劑盒
xy-E11295 人*(VC)ELISA試劑盒
xy-E11296 人*6(VB6)ELISA試劑盒
xy-E11297 人可溶性P選擇素(sP-selectin)ELISA試劑盒
xy-E11298 人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISA試劑盒
xy-E11299 人*(VD)ELISA試劑盒
xy-E11300 人*1(VK1)ELISA試劑盒
xy-E11301 人*12(VB12)ELISA試劑盒
xy-E11302 人*3(VD3)ELISA試劑盒