人腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞
細(xì)胞傳代的一般方法
開始人腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞傳代前,仔細(xì)檢查細(xì)胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全:一般主要有:細(xì)胞(單層細(xì)胞,鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-0.2%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或199等適合細(xì)胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、*溶液(1萬(wàn)單位)、7.5%NaHC03溶液、0.25%*、PBS洗液。
用具:小方瓶(100m1)、克氏瓶、膠塞、吸管(10ml、1m1)、細(xì)胞吹打管(20 ml)(以上用具需經(jīng)121℃至少15分鐘高壓滅菌)
C02孵箱、超凈臺(tái)、倒置顯微鏡、4℃、—20℃冰箱
操作步驟:鏡檢,挑選生長(zhǎng)狀態(tài)良好,細(xì)胞界限清晰,具有立體感,形態(tài)好無(wú)污染、無(wú)異常及可疑病變細(xì)胞。配制細(xì)胞培養(yǎng)液:按以下配比配制MEM-0.2%LH培養(yǎng)液100ml內(nèi),加入滅活小牛血清10m1,*溶液0.3m1,7.5%*溶液3ml。(僅供一般參考)。消化細(xì)胞;先用PBS洗液沖洗細(xì)胞表面1-2次,每次10m1,棄去洗液,向細(xì)胞瓶?jī)?nèi)加入0.25%*溶液,每瓶1m1,細(xì)胞瓶平放,使消化液*覆蓋細(xì)胞表面。至細(xì)胞*脫落到*中。每瓶加入10m1細(xì)胞培養(yǎng)液吹打分散細(xì)胞,按所需的傳代比例分裝于小方瓶(100m1)中,再加入10m1細(xì)胞培養(yǎng)液重復(fù)吹打一次后分裝,然后補(bǔ)加至所需培養(yǎng)量。加塞,置于37±1℃孵箱培養(yǎng)。約2~4天成片。
其它供應(yīng)新產(chǎn)品:
xy-E11261 人特異性巨噬細(xì)胞武裝因子(SMAF)ELISA試劑盒
xy-E11262 人促有絲分裂因子(MF/MPF)ELISA試劑盒
xy-E11263 人轉(zhuǎn)錄因子抗體-1(ATF-1)ELISA試劑盒
xy-E11264 人抗鼠抗體(HAMA)ELISA試劑盒
xy-E11265 人鈣離子通道抗體(VGCC)ELISA試劑盒
xy-E11266 人溴脫氧核苷*(BrdU)ELISA試劑盒
xy-E11267 人纖維母細(xì)胞表面抗原(FSP)ELISA試劑盒
xy-E11268 人分泌性白細(xì)胞蛋白酶抑制因子(SLPI)ELISA試劑盒
xy-E11269 人阿黑皮素原(POMC)ELISA試劑盒
xy-E11270 人不對(duì)稱二甲基*(ADMA)ELISA試劑盒
xy-E11271 人血清素/血清胺(ST)ELISA試劑盒
xy-E11272 人細(xì)胞毒素(CTX)ELISA試劑盒
xy-E11273 人α突觸核蛋白(α-SYN)ELISA試劑盒
xy-E11274 人糖鏈抗原19-9(CA19-9)ELISA試劑盒
xy-E11275 人水蛭素(HRD)ELISA試劑盒
xy-E11276 人*(FK506)ELISA試劑盒
xy-E11277 人上皮特異性抗原(ESA)ELISA試劑盒
xy-E11278 人上皮膜抗原(EMA)ELISA試劑盒
xy-E11279 人凝聚素(CLU)ELISA試劑盒
xy-E11280 人OJ抗體/抗異亮氨酰tRNA合成酶抗體(OJ/IleRS)ELISA試劑盒