Annexin V-PE/7-AAD細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒細(xì)胞凋亡是細(xì)胞的基本特征之一,它在機(jī)體的胚胎發(fā)育、組織修復(fù)、內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定和一些疾病發(fā)生過程等方面起著十分重要的作用。
在正常細(xì)胞中,磷脂酰絲an酸(PS)只分布在細(xì)胞膜脂質(zhì)雙層的內(nèi)側(cè),而在細(xì)胞凋亡早期,細(xì)胞膜中的磷脂酰絲an酸(PS)由脂膜內(nèi)側(cè)翻向外側(cè)。在體內(nèi),巨噬細(xì)胞可以識(shí)別翻轉(zhuǎn)到細(xì)胞膜表面的PS 從而將這些程序性死亡的細(xì)胞清除,因此凋亡過程中并不伴隨局部的炎癥反應(yīng),而在細(xì)胞壞死的過程中則常常伴隨著炎癥反應(yīng)。
AnnexinⅤ是一種分子量為35-36kD的Ca2+依賴性磷脂結(jié)合蛋白,能與細(xì)胞凋亡過程中翻轉(zhuǎn)到膜外的PS 高親和力特異性結(jié)合。PS 外翻發(fā)生在細(xì)胞核破裂,DNA 片段化以及凋亡相關(guān)蛋白出現(xiàn)之前,這使得Annexin V 與PS的結(jié)合成為凋亡早期的一種重要檢測(cè)標(biāo)志事件。
檢測(cè)原理:
在正常的活細(xì)胞中,磷脂酰絲an酸(phosphotidylserine,PS)位于細(xì)胞膜的內(nèi)側(cè),但在早期凋亡的細(xì)胞中,PS 從細(xì)胞膜的內(nèi)側(cè)翻轉(zhuǎn)到細(xì)胞膜的表面,暴露在細(xì)胞外環(huán)境中。
Annexin-Ⅴ能與PS 高親和力結(jié)合??赏ㄟ^細(xì)胞外側(cè)暴露的磷脂酰絲an酸與凋亡早期細(xì)胞的胞膜結(jié)合。用標(biāo)記了PE的AnnexinⅤ作為熒光探針,利用流式細(xì)胞儀或熒光顯微鏡可檢測(cè)細(xì)胞凋亡的發(fā)生。細(xì)胞壞死的過程中也會(huì)發(fā)生細(xì)胞膜損傷,壞死的細(xì)胞會(huì)結(jié)合Annexin V-PE。
Annexin V-PE 通常與細(xì)胞膜非滲透性核酸熒光染料聯(lián)合使用以檢測(cè)凋亡細(xì)胞。常用的染料是7-AAD。正常細(xì)胞和早期凋亡細(xì)胞的細(xì)胞膜是完整的,核酸染料7-AAD 不能透過完整的細(xì)胞膜,但在凋亡中晚期的細(xì)胞和壞死細(xì)胞,7-AAD 能夠透過細(xì)胞膜與細(xì)胞核結(jié)合呈現(xiàn)紅色。
7-AAD/Annexin V-PE試劑盒將AnnexinⅤ與7-AAD匹配使用,可以將凋亡早期的細(xì)胞和晚期的細(xì)胞以及死細(xì)胞區(qū)分開來。壞死細(xì)胞可以同時(shí)與Annexin V-PE和7-AAD 結(jié)合顯色,而7-AAD 則被排除在活細(xì)胞(PE陰性)和早期凋亡細(xì)胞(PE陽性)之外。在沒有巨噬細(xì)胞的情況下,凋亡的最后階段會(huì)像細(xì)胞壞死一樣發(fā)生整個(gè)細(xì)胞的解體,從而使凋亡晚期的細(xì)胞也同時(shí)被PE和7-AAD 結(jié)合染色呈現(xiàn)雙陽性。
儲(chǔ)存條件:染色液2-8℃避光保存;結(jié)合液2-8℃保存;長期不用-20℃保存。
Annexin V-PE染色液避免反復(fù)凍融,凍融2次以上可能會(huì)失效。長期保存分裝后-20℃保存。
有效期:一年。
產(chǎn)品名稱 | Annexin V-PE/7-AAD細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒 | 貨號(hào) | CS-C6126 |
英文名稱 | Annexin V-PE/7-AAD Apoptosis Detection Kit | 規(guī)格 | 50T|100T |
產(chǎn)品背景:
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
細(xì)胞生物學(xué)研究的常用技術(shù)有哪些:
1.顯微技術(shù):包括顯微觀察,顯微操作.
2細(xì)胞組分分析技術(shù):離心分離技術(shù),生物大分子定位技術(shù),定量細(xì)胞化學(xué)分析技術(shù).
3.細(xì)胞工程:細(xì)胞培養(yǎng)。
注意事項(xiàng):
1. 本試劑盒的檢測(cè)試劑中含有螢光素酶,反復(fù)凍融會(huì)導(dǎo)致其逐漸失活。盡管經(jīng)測(cè)試本試劑反復(fù)凍融5次對(duì)于其檢測(cè)效果無顯著影響,為取得良好的使用效果,*次解凍后可適當(dāng)分裝保存。反復(fù)凍融過程中,可能會(huì)導(dǎo)致檢測(cè)試劑中出現(xiàn)少量沉淀,此時(shí)宜平衡至室溫,并盡量溶解。如仍有殘留的不溶物,可以離心去除后使用,經(jīng)測(cè)試不會(huì)影響后續(xù)的檢測(cè)效果。
2. 檢測(cè)時(shí)需使用白色或黑色的96孔板或384孔板。如果使用普通透明的96孔板或384孔板,相鄰孔之間會(huì)產(chǎn)生相互干擾。
3. 使用說明中提供了檢測(cè)ATP標(biāo)準(zhǔn)品的方法,實(shí)際檢測(cè)細(xì)胞活力時(shí)通常并不需要檢測(cè)ATP標(biāo)準(zhǔn)品。
公司正在出售的產(chǎn)品:
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