細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
細(xì)胞生物學(xué)研究的常用技術(shù)有哪些:
1.顯微技術(shù):包括顯微觀察,顯微操作.
2細(xì)胞組分分析技術(shù):離心分離技術(shù),生物大分子定位技術(shù),定量細(xì)胞化學(xué)分析技術(shù).
3.細(xì)胞工程:細(xì)胞培養(yǎng)。
Annexin V-FITC細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒試劑盒組份:
Annexin V-FITC——————100μl
Annexin V-FITC結(jié)合液———12ml
碘化丙啶染色液——————220μl
Annexin是一類廣泛分布于真核細(xì)胞細(xì)胞漿內(nèi)鈣離子依賴的磷脂結(jié)合蛋白,參與細(xì)胞內(nèi)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)。但僅Annexin V被報(bào)道可以調(diào)控一些PKC的活性。
Annexin V選擇性結(jié)合磷脂酰絲an酸(phosphatidylserine,簡(jiǎn)稱PS)。磷脂酰絲an酸主要分布在細(xì)胞膜內(nèi)側(cè),即與細(xì)胞漿相鄰的一側(cè)。在細(xì)胞發(fā)生凋亡的早期,不同類型的細(xì)胞都會(huì)把磷脂酰絲an酸外翻到細(xì)胞表面,即細(xì)胞膜外側(cè)。磷脂酰絲an酸暴露到細(xì)胞表面后會(huì)促進(jìn)凝血和炎癥反應(yīng)。而Annexin V和外翻到細(xì)胞表面的磷脂酰絲an酸結(jié)合后可以阻斷磷脂酰絲an酸的促凝血和促炎癥反應(yīng)活性。
用帶有綠色熒光的熒光探針FITC標(biāo)記的Annexin V,即Annexin V-FITC,就可以用流式細(xì)胞儀或熒光顯微鏡非常簡(jiǎn)單而直接地檢測(cè)到磷脂酰絲an酸的外翻這一細(xì)胞凋亡的重要特征。
本試劑盒還提供了碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)染色液,碘化丙啶可以染色壞死細(xì)胞或凋亡晚期喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,呈現(xiàn)紅色熒光。對(duì)于壞死細(xì)胞,由于細(xì)胞膜的完整性已經(jīng)喪失,Annexin V-FITC可以進(jìn)入到細(xì)胞漿內(nèi),與位于細(xì)胞膜內(nèi)側(cè)的磷脂酰絲an酸結(jié)合,從而也使壞死細(xì)胞呈現(xiàn)綠色熒光。
本試劑盒的流式檢測(cè)效果參考圖1和圖2,熒光顯微鏡檢測(cè)效果參考圖3。
1.細(xì)胞用本試劑盒染色后流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡的效果圖。Jurkat細(xì)胞未經(jīng)處理(A)或用10μM(Camptothecin)作用4小時(shí)(B)后,用本試劑盒染色,然后用流式細(xì)胞儀進(jìn)行細(xì)胞的散射和熒光檢測(cè)。從圖中可以看出,經(jīng)過(guò)凋亡誘導(dǎo)劑處理后的細(xì)胞,其Annexin V-FITC染色陽(yáng)性并且PI染色陰性的細(xì)胞,即凋亡細(xì)胞,明顯增加(B圖的右下象限),Annexin V-FITC和PI染色雙陽(yáng)性的細(xì)胞,即壞死細(xì)胞,也有所增加(B圖的右上象限)。圖中Annexin V-FITC染色陰性PI染色陽(yáng)性(Annexin V-/PI+)所在象限(A和B圖的左上象限)出現(xiàn)的細(xì)胞點(diǎn)是許可范圍內(nèi)的檢測(cè)誤差。實(shí)測(cè)數(shù)據(jù)可能會(huì)因細(xì)胞類型、細(xì)胞凋亡情況、檢測(cè)儀器等的不同而存在差異,圖中數(shù)據(jù)僅供參考。
2.細(xì)胞用本試劑盒染色后流式細(xì)胞儀檢測(cè)效果驗(yàn)證圖。Jurkat細(xì)胞用10μM(Camptothecin)作用4小時(shí)后,未經(jīng)染色(A)、僅用本試劑盒中的PI進(jìn)行染色(B)、僅用本試劑盒中的Annexin V-FITC進(jìn)行染色(C)、用本試劑盒中的Annexin V-FITC和PI進(jìn)行雙染(D)。從圖中可以看出,未經(jīng)染色的是雙陰性細(xì)胞(A),僅PI染色后出現(xiàn)了預(yù)期的PI染色陽(yáng)性的細(xì)胞,僅Annexin V-FITC染色出現(xiàn)了預(yù)期的Annexin V-FITC染色陽(yáng)性的細(xì)胞,Annexin V-FITC和PI雙染出現(xiàn)了預(yù)期的僅Annexin V-FITC染色陽(yáng)性的凋亡細(xì)胞和雙陽(yáng)性的壞死細(xì)胞。出現(xiàn)的非預(yù)期的細(xì)胞點(diǎn)在許可的誤差范圍內(nèi)。實(shí)測(cè)數(shù)據(jù)可能會(huì)因細(xì)胞類型、細(xì)胞凋亡情況、檢測(cè)儀器等的不同而存在差異,圖中數(shù)據(jù)僅供參考。
儲(chǔ)存條件:4℃避光,有效期6個(gè)月。
產(chǎn)品名稱 | Annexin V-FITC細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒 | 貨號(hào) | CS-C6016 |
英文名稱 | Annexin V-FITC Apoptosis Detection Kit | 規(guī)格 | 20次|50次 |
本試劑盒是用FITC標(biāo)記的重組人Annexin V來(lái)檢測(cè)細(xì)胞凋亡時(shí)出現(xiàn)在細(xì)胞膜表面的磷脂酰絲an酸的一種細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒??梢允褂昧魇郊?xì)胞儀、熒光顯微鏡或其它熒光檢測(cè)設(shè)備進(jìn)行檢測(cè)。一個(gè)包裝的本試劑盒共可以檢測(cè)20個(gè)細(xì)胞樣品。
注意事項(xiàng):
1. 本試劑盒的檢測(cè)試劑中含有螢光素酶,反復(fù)凍融會(huì)導(dǎo)致其逐漸失活。盡管經(jīng)測(cè)試本試劑反復(fù)凍融5次對(duì)于其檢測(cè)效果無(wú)顯著影響,為取得良好的使用效果,*次解凍后可適當(dāng)分裝保存。反復(fù)凍融過(guò)程中,可能會(huì)導(dǎo)致檢測(cè)試劑中出現(xiàn)少量沉淀,此時(shí)宜平衡至室溫,并盡量溶解。如仍有殘留的不溶物,可以離心去除后使用,經(jīng)測(cè)試不會(huì)影響后續(xù)的檢測(cè)效果。
2. 檢測(cè)時(shí)需使用白色或黑色的96孔板或384孔板。如果使用普通透明的96孔板或384孔板,相鄰孔之間會(huì)產(chǎn)生相互干擾。
3. 使用說(shuō)明中提供了檢測(cè)ATP標(biāo)準(zhǔn)品的方法,實(shí)際檢測(cè)細(xì)胞活力時(shí)通常并不需要檢測(cè)ATP標(biāo)準(zhǔn)品。
公司正在出售的產(chǎn)品:
Caspase 6分光光度法檢測(cè)試劑盒 | C4a 小鼠過(guò)敏毒/補(bǔ)體片斷4aELISA檢測(cè)試劑盒 |
線粒體膜電位檢測(cè)試劑盒(JC-10法) | DPPⅣ 小鼠二肽基肽ⅣELISA檢測(cè)試劑盒 |
人淋巴細(xì)胞分離液 | HBeAg 小鼠乙型肝炎e抗原ELISA檢測(cè)試劑盒 |
淋巴細(xì)胞分離液1.077 | Cyt-C 小鼠細(xì)胞色CELISA檢測(cè)試劑盒 |
Caspase-8活性測(cè)定試劑盒 | Amylin 小鼠胰淀ELISA檢測(cè)試劑盒 |
Caspase-6活性測(cè)定試劑盒 | HIF-1α 小鼠低氧誘導(dǎo)因子1αELISA檢測(cè)試劑盒 |
Caspase-5活性測(cè)定試劑盒 | IL-11 小鼠白介11ELISA檢測(cè)試劑盒 |
Caspase-4活性測(cè)定試劑盒 | HSP gp96 小鼠熱休克蛋白糖蛋白96ELISA檢測(cè)試劑盒 |
Caspase-3活性測(cè)定試劑盒 | IFN-β/IFNB 小鼠β干擾ELISA檢測(cè)試劑盒 |
Caspase-2活性測(cè)定試劑盒 | CETP 小鼠酯轉(zhuǎn)移蛋白ELISA檢測(cè)試劑盒 |
Caspase-1活性測(cè)定試劑盒 | MMP-8 小鼠基質(zhì)金屬蛋白8/中性粒細(xì)胞膠原ELISA檢測(cè)試劑盒 |
AO-EB雙染色試劑盒 | Hpt/HP 小鼠結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白ELISA檢測(cè)試劑盒 |
JC-10熒光探針 | Tn-Ⅰ 小鼠肌鈣蛋白ⅠELISA檢測(cè)試劑盒 |
線粒體膜電位檢測(cè)試劑盒(JC-1) | FASL 小鼠凋亡相關(guān)因子配體ELISA檢測(cè)試劑盒 |
MTT細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒 | BK 大鼠血管舒緩激肽ELISA檢測(cè)試劑盒 |