中文名稱:BL21 (DE3)化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞
英文名稱:BL21 (DE3) Chemically Competent Cell
產(chǎn)品規(guī)格:100μl×10管
發(fā)貨周期:1~3天
產(chǎn)品貨號(hào):BJ-F0164557
產(chǎn)品介紹:
本品是在大腸桿菌BL21(DE3)菌株基礎(chǔ)上制備的化學(xué)轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞,是以T7 RNA聚合酶為表達(dá)系統(tǒng)的基因的高效表達(dá)宿主,其基因型為F-ompT hsdS (rB- mB-) gal dcm (DE3)。經(jīng)檢測,本品無外源質(zhì)粒DNA殘留,轉(zhuǎn)化效率≥107 cfu/μg pUC19 DNA。適合非毒性蛋白重組表達(dá)。 組份: BL21 (DE3)化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞 100μl×10 pUC19(0.1 ng/μl) 5μl 注意事項(xiàng) 1)感受態(tài)細(xì)胞冰水浴中解凍后應(yīng)立即使用。 2)待轉(zhuǎn)化DNA加入體積不要過感受態(tài)細(xì)胞體積的1/10。 3)待轉(zhuǎn)化DNA加入感受態(tài)細(xì)胞后,請(qǐng)勿用移液槍吹打,輕輕彈勻即可。 4)為確保高效率轉(zhuǎn)化,整個(gè)操作過程應(yīng)盡量輕柔,并保持低溫。 5)本品應(yīng)于-80℃保存,請(qǐng)勿將感受態(tài)細(xì)胞儲(chǔ)存于-20℃或液氮中保存。 6)為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。 儲(chǔ)存條件:-80℃ |
使用方法:本產(chǎn)品僅用于科研
注意:標(biāo)本采集人員需按有關(guān)規(guī)定做好個(gè)人防護(hù)。咽、鼻拭子最好在發(fā)病的3天采集。
在安全柜內(nèi)將本產(chǎn)品分裝到自備的、螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的5mL旋蓋塑料管里(一級(jí)容器)。
鼻拭子的采集:將棉簽輕輕插入鼻道內(nèi)鼻腭處,停留片刻后緩慢轉(zhuǎn)動(dòng)退出。以同一拭子拭兩側(cè)鼻孔。將棉簽浸入上步得到的、裝有3mL本產(chǎn)品的旋蓋離心管中,棄去拭子尾部,擰緊螺旋蓋。
咽拭子的采集:用棉簽擦拭雙側(cè)咽扁桃體及咽后壁,將棉簽浸入第一步得到的、裝有3mL本產(chǎn)品的旋蓋離心管中,棄去拭子尾部,擰緊螺旋蓋。
直接在一級(jí)容器上用油性記號(hào)筆寫明樣本的種類、采樣時(shí)間、編號(hào)、患者姓名。
將密閉后的標(biāo)本放入大小適合的塑料袋內(nèi)密封;每袋裝一份標(biāo)本。同時(shí)也將標(biāo)本有關(guān)信息填在標(biāo)本送檢表上,連同一級(jí)容器封于塑料袋內(nèi)。
將裝標(biāo)本的密封袋放入自備的帶螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的塑料容器(二級(jí)容器)內(nèi),擰緊蓋,在容器上標(biāo)明有關(guān)信息。同一患者2份以上的密封標(biāo)本,可以放在同一個(gè)二級(jí)容器內(nèi)。二級(jí)容器要承受不少于95 KPa的壓力,內(nèi)襯具吸水和緩沖能力的物質(zhì)。所有容器必須印有生物危險(xiǎn)標(biāo)注。
將二級(jí)容器擺放在專用運(yùn)輸箱內(nèi)(或疫苗運(yùn)輸箱),放入冰排,然后以柔軟物質(zhì)填充,并密封,由專人(2人)運(yùn)送,不得郵寄,最好使用專車。
采集的標(biāo)本若不能在24小時(shí)內(nèi)送達(dá),則應(yīng)盡快在-70℃以下保存。無-70℃條件的,需在4℃冰箱短時(shí)間暫存,并盡快聯(lián)系遞送標(biāo)本。流感病毒在-20℃~-40℃時(shí)不穩(wěn)定,故長期保存最好在-70℃溫度以下進(jìn)行。
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)。
PI-3 KINASE P110BETA蛋白表達(dá)西方雜交分析試劑盒
PI-3 KINASE P110BETA蛋白免疫共沉淀分析試劑盒
PI-3 KINASE P110BETA蛋白表達(dá)ELISA定量檢測試劑盒
細(xì)胞PP2A蛋白表達(dá)流式細(xì)胞儀檢測試劑盒
載玻片細(xì)胞PP2A蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試劑盒
小鼠血紅素氧合酶1(HO1)elisa ,英文名: HO1 ELISA Kit
兔子免疫球蛋白G(IgG)ELISA檢測試劑盒rabbitImmunoglobulinG,IgGELISAKit 96T/48T
犬γ氨基(GABA)免疫試劑盒 Canine Gamma-aminobyric acid,GABA ELISA Kit
英文名稱HumanSomatostatinELISAKit人(SS)規(guī)格:96T/48T
大巖筒(gloxinia)增殖培養(yǎng)基500毫升溶液/片劑
Ratlymphocytefactorelisa大鼠淋巴細(xì)胞因子elisa規(guī)格:96T/48T
BL21 (DE3)化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞小鼠嗜酸性粒細(xì)胞過氧化物酶(EPX)elisa檢測試劑盒
小鼠嗜酸性粒細(xì)胞過氧化物酶(EPO)elisa檢測試劑盒
小鼠嗜酸性粒細(xì)胞過氧化物酶(EPO)elisa分析檢測試劑盒
小鼠嗜酸粒細(xì)胞趨化因子(ECF)elisa檢測試劑盒
小鼠嗜酸粒細(xì)胞趨化因子(ECF)elisa分析檢測試劑盒
生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)中,常常需要從液體樣品(如血漿,培養(yǎng)基)中純化病毒,但由于病毒顆粒十分細(xì)小,傳統(tǒng)的分離方法是使用長時(shí)間超速離心才能將其從液體樣品中分離出來,此操作非常繁瑣,并且病毒在此過程中容易變性。為了克服傳統(tǒng)方法的缺點(diǎn),本公司開發(fā)了本產(chǎn)品。