生物醫(yī)學(xué)實驗中，常常需要從液體樣品(如血漿，培養(yǎng)基)中純化病毒，但由于病毒顆粒十分細小，傳統(tǒng)的分離方法是使用長時間超速離心才能將其從液體樣品中分離出來，此操作非常繁瑣，并且病毒在此過程中容易變性。為了克服傳統(tǒng)方法的缺點，本公司開發(fā)了本產(chǎn)品。
中文名稱：T4連接酶
英文名稱：T4 DNA ligase
產(chǎn)品規(guī)格：100U
發(fā)貨周期：1～3天
產(chǎn)品貨號：BJ-F0164560
產(chǎn)品介紹：
本T4 DNA Ligase是從表達T4 DNA Ligase 基因的大腸桿菌經(jīng)誘導(dǎo)表達后分離純化而來的，催化相鄰DNA鏈的5’磷酸基團和3’羥基基團以磷酸二酯鍵結(jié)合反應(yīng)。該酶可催化平末端或粘性末端DNA之間的連接，還可修復(fù)雙鏈DNA、RNA、DNA/RNA雜交雙鏈中的單鏈切口。本品可應(yīng)用于DNA插入片段和載體DNA的粘性末端和平末端的連接，以及線性DNA的自身環(huán)化。 產(chǎn)品組分： T4 DNA ligase (5U/μl)————————100 U (20μl) 10×T4 DNA Ligation Buffer——————0.2 ml 50%PEG Solution————————————0.15 ml 活性定義：此酶的活力單位為Weiss Unit。1個Weiss Unit相當于約200個粘性末端連接單位(cohesive-end ligation unit, CEU)。1個CEU單位定義為在20μl的連接反應(yīng)體系中，在16℃30分鐘內(nèi)，能使50%的經(jīng)HindIII消化的λDNA片段連接所需的酶量。 注意事項： 1、T4 DNA Ligase的終用量不要過推薦的用量，否則影響連接效率。 2、PEG可以極大提高平末端的連接效率，我們推薦加入終濃度為5% PEG Solution以提高平末端的連接效率。 3、為了提高轉(zhuǎn)化效率，轉(zhuǎn)化時建議所加入連接產(chǎn)物的量不要過感受態(tài)細胞體積的10%。 4、由于T4 DNA Ligase中含有甘油，比較粘稠容易掛壁，建議使用前短暫離心將液體收集到管底，取樣時槍頭盡量不要深入液面太深以免粘在槍頭上造成損失。 儲存條件：-20℃。 |
使用方法：本產(chǎn)品僅用于科研
注意：標本采集人員需按有關(guān)規(guī)定做好個人防護。咽、鼻拭子最好在發(fā)病的3天采集。
在安全柜內(nèi)將本產(chǎn)品分裝到自備的、螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的5mL旋蓋塑料管里(一級容器)。
鼻拭子的采集：將棉簽輕輕插入鼻道內(nèi)鼻腭處，停留片刻后緩慢轉(zhuǎn)動退出。以同一拭子拭兩側(cè)鼻孔。將棉簽浸入上步得到的、裝有3mL本產(chǎn)品的旋蓋離心管中，棄去拭子尾部，擰緊螺旋蓋。
咽拭子的采集：用棉簽擦拭雙側(cè)咽扁桃體及咽后壁，將棉簽浸入第一步得到的、裝有3mL本產(chǎn)品的旋蓋離心管中，棄去拭子尾部，擰緊螺旋蓋。
直接在一級容器上用油性記號筆寫明樣本的種類、采樣時間、編號、患者姓名。
將密閉后的標本放入大小適合的塑料袋內(nèi)密封；每袋裝一份標本。同時也將標本有關(guān)信息填在標本送檢表上，連同一級容器封于塑料袋內(nèi)。
將裝標本的密封袋放入自備的帶螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的塑料容器(二級容器)內(nèi)，擰緊蓋，在容器上標明有關(guān)信息。同一患者2份以上的密封標本，可以放在同一個二級容器內(nèi)。二級容器要承受不少于95 KPa的壓力，內(nèi)襯具吸水和緩沖能力的物質(zhì)。所有容器必須印有生物危險標注。
將二級容器擺放在專用運輸箱內(nèi)(或疫苗運輸箱)，放入冰排，然后以柔軟物質(zhì)填充，并密封，由專人(2人)運送，不得郵寄，最好使用專車。
采集的標本若不能在24小時內(nèi)送達，則應(yīng)盡快在-70℃以下保存。無-70℃條件的，需在4℃冰箱短時間暫存，并盡快聯(lián)系遞送標本。流感病毒在-20℃～-40℃時不穩(wěn)定，故長期保存最好在-70℃溫度以下進行。
注意事項：
①加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。
⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標簽說明書儲存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
PROTEASE酶解法石蠟切片抗原修復(fù)處理試劑盒
物理法石蠟切片抗原修復(fù)處理試劑盒
簡易化學(xué)法石蠟切片抗原修復(fù)處理試劑盒
鹽酸化學(xué)法石蠟切片抗原修復(fù)處理試劑盒
甲酸化學(xué)法石蠟切片抗原修復(fù)處理試劑盒
小鼠夏科雷登氏結(jié)晶蛋白(CLC)elisa ，英文名： CLC ELISA Kit
兔熱休克蛋白70(HSP-70)ELISA檢測試劑盒RabbitHeatShockProtein70,HSP-70ELISAKit 96T/48T
牛胰島素樣生長因子1(IGF-1)免疫試劑盒 Bovine Insulin-like growth factor 1,IGF-1 ELISA Kit
英文名稱HumanPhosphoinositide-3kinaseELISAKit人0脂酰肌醇三羥基(PI3K)規(guī)格：96T/48T
蛋類羥比色法定量檢測試劑盒20次
Ratneuophilgelatinase-associatedlipocalin,NGALelisa大鼠中性粒細胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運載蛋白(NGAL)elisa規(guī)格：96T/48T
T4連接酶小鼠可溶性CD40配體（sCD40 L）elisa檢測試劑盒
小鼠可溶性CD30配體(sCD30L)elisa檢測試劑盒
小鼠可溶性CD30配體(sCD30L)elisa分析檢測試劑盒
小鼠可溶性CD30(sCD30)elisa檢測試劑盒
小鼠顆粒體蛋白(GRN)elisa檢測試劑盒
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數(shù)目，需根據(jù)細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)。
