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熒光素標記基質金屬蛋白酶-7抗體IgG抗體保存指南
抗體保存得當與否,直接決定了抗體的活性和使用效果!如果抗體保存得當,大部分抗體活性都可以維持數(shù)月甚至數(shù)年。本公司抗體保存,同樣也可以應用到其他絕大部分公司的抗體產(chǎn)品!
請謹記!無論何時請按照說明書的保存條件正確保存抗體!
o . 收到抗體后請務必在2000rpm 離心20-30s 后再打開管蓋進行分裝和保存!
質優(yōu)的抗體使用非常特殊的儲存管,只有在2000rpm 離心20-30s 才能將附著在管壁或蓋內的抗體全部離心下來。即使是在0000rpm 離心也會導致離心不*,導致出現(xiàn)抗體的量不足的現(xiàn)象!
熒光素標記基質金屬蛋白酶-7抗體IgG對于大部分抗體,比較合適的保存方式是分裝后保存在 -20 度 or -80 度對
絕大多數(shù)抗體來說,保存在-20 度是*足夠了。沒有任何證據(jù)顯示保存在-80
度 會有更多的好處!
o .分裝可以zui大程度的降低反復凍融對抗體活性的損害,同時也降低了由于多次
從同一管中吸取抗體造成的污染可能性。
o .分裝的量以一次實驗用完為好,zui少不能少于0ul 每份。因為分裝體積越小,
抗體的濃度越可能會受到蒸發(fā)以及管壁吸附的影響
o 復融后的分裝抗體如果一次用不完,將剩余母液保存在4 度,避免再凍起來!
o 抗體工作液應該當天配制當天用完,在4 度 盡量不要超過 天。
o 避免將抗體保存在自動除霜冰箱中。盡量將抗體保存在冰箱里層,而不是
門上
o . 大部分抗體收到后4 度短暫保存-2 周對抗體活性是沒有影響的。
如果抗體很快(-2 周)會使用,在4 度保存,這是為了避免反復凍融對抗體活性的損害。
如果要保存則是在-20 度 or -80 度。zui關鍵的一點是要根據(jù)說明書的方式來正確的保存抗體!
但是,腹水形式的產(chǎn)品請在收到后立即凍起來!因為該類產(chǎn)品含有大量的蛋白酶,在4 度保存會導致抗體的降解!
o .大部分抗體的運輸條件:一般的運輸過程需要-2 周的時間,所以是在4 度的條件下來完成的。 4 度運輸zui主要的目的是為了避免反復凍融對抗體活性的損害(如果使用干冰運輸,那么收到時抗體是凍起來的,為了分裝就需要解凍。這就多了一次凍融的過程)。所以運輸過程中避免干冰運輸!
上海谷研生物科技有限公司特殊抗體的保存條件:
. 酶聯(lián)抗體:永遠保存在4 度,避免凍起來。否則會導致酶活性的下降或者喪失
2. 偶聯(lián)抗體:所有偶聯(lián)抗體都是在棕色管中或使用錫箔紙避光保存。尤其是熒光抗體,對
光極為敏感,因此在所有的實驗階段也是要避光操作的!
3. IgG3 的同型對照:永遠保存在4 度,避免凍起來。因為如果出現(xiàn)凍融過程,該抗體非常
容易形成多聚體無論是保存還是運輸,避免反復凍融!
反復凍融會導致抗體變性,導致多聚體形成,從而降低抗體的結合能力!
關于加入甘油保存:有些人會加50%的甘油到抗體中來避免反復凍融,甘油在-20 度 會降低冰點。這對很多抗體可能是可行的。但是abcam 僅對非常小的一部分抗體檢測過其在這種條件下的穩(wěn)定性;而abcam 只對按照條件保存的抗體提供質量保證!加入甘油的溶液不建議在-80 度保存,因為這已經(jīng)超過了甘油的冰點。如果您要加入甘油來保存抗體的話,請謹慎注意無菌操作,避免污染!
關于蛋白保護劑:
蛋白在高濃度時更不容易降解( mg/ml 或者更高),這就是為什么在抗體中加入BSA 之類作為穩(wěn)定劑的原因了;另一方面,加入的蛋白也可以減少抗體由于管壁吸附所造成的損失。但是如果抗體要用來標記的話,則不能加入蛋白穩(wěn)定劑,因為這些穩(wěn)定劑會和抗體一起競爭結合標記物。
關于*(sodium azide)的使用:
為了防止微生物污染,*經(jīng)常被加入到抗體中(終濃度0.02% (w/v))。Abcam 的很多抗體已經(jīng)含有了0.02%-0.05%的*,在說明書的“Storage buffer”中有標明的。
在下述情況中不能使用*:
• 如果抗體用于染色或處理活細胞,用于體內研究:
*在抵抗微生物的同時,對其它大部分有機物也是有毒的,因為它阻斷了線粒體的
cytochrome electron transport system.
• 要偶聯(lián)帶有氨基基團的抗體:
*會干擾任何含有氨基基團的偶聯(lián),因此在進行偶聯(lián)之前,應將*去除。偶聯(lián)后的抗體可以加入*保存,但是濃度只能是0.0%。對于需要偶聯(lián)的抗體,thimerosal
(merthiolate)可以替代*作為保護劑!
注:*的去除方式:
可以通過凝膠電泳或過濾的方式去除!IgG 的分子量是50kDa (IgM 是~ 600kDa); *的分子量只有65Da。使用cut off 4kDa 的濾膜即可將*從抗體中去除
抗體說明書樣本
上海谷研生物科技有限公司放價產(chǎn)品信息:
QGY-770 肝癌
A673 橫紋肌癌
QGY-7703 肝癌
Tca-83 舌鱗癌
SMMC-772 肝癌
Acc-2 涎腺腺樣囊性癌
786-O 腎透明細胞腺癌
Acc-3 涎腺腺樣囊性癌
PC-3 前列腺癌
KB 口腔表皮樣癌
T-24 膀胱變移細胞癌
HEp-2 喉表皮樣癌
SCaBER 膀胱鱗癌
CNE 鼻咽癌
Ho-890 卵巢癌
TT 髓性甲狀腺癌
L 卵巢癌
Bcap-37 乳腺癌
HeLa 宮頸癌
ZR-75-30 乳腺癌
HeLa229 宮頸癌
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