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更新時(shí)間:2021-12-28 17:07:42瀏覽次數(shù):466次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來(lái)自 環(huán)保在線NADPH氧化酶4抗體樣本的物種 應(yīng)選擇物種相同或有交叉反應(yīng)的抗體,抗體可能與不同物種的同種靶蛋白有交叉反應(yīng),因其氨基酸序列同源性較高,如果樣本的種類未列入抗體說(shuō)明書(shū)上的交叉反應(yīng)種屬表中,并不意味著該抗體不適用于檢測(cè)該物種的蛋白,而只是表示該物種尚未用此抗體檢測(cè)驗(yàn)證過(guò),應(yīng)通過(guò)序列比對(duì)的方法來(lái)預(yù)測(cè)交叉反應(yīng),可應(yīng)用Expasy 和 NCBI BLAST 來(lái)進(jìn)行不同物種蛋白同源性比對(duì)。
NADPH氧化酶4抗體一抗宿主物種的選擇一般說(shuō)來(lái),在使用偶聯(lián)二抗結(jié)合無(wú)偶聯(lián)物的一抗時(shí),一抗宿主動(dòng)物的物種選擇較為重要,對(duì)于免疫組化而言,盡可能選擇與樣本不同種系物種的一抗,從而避免二抗與樣本內(nèi)源性免疫球蛋白產(chǎn)生交叉反應(yīng),例如:檢測(cè)小鼠樣本蛋白,則不應(yīng)選擇小鼠或大鼠源的一抗,選兔源的一抗,則二抗則可選擇偶聯(lián)了檢測(cè)分子(酶、熒光素、等)的抗兔IgG。
如果選擇有偶聯(lián)物的一抗則不適用上述情況,除免疫組化外的其它對(duì)不含內(nèi)源性免疫球蛋白樣本的檢測(cè)方法,則抗體宿主物種的影響不大,如對(duì)不含IgG 的細(xì)胞裂解物樣本的western blotting檢測(cè),盡管如此,含有血清的組織裂解物和組織培養(yǎng)上清中含有免疫球蛋白,還原變性樣本中含IgG,在western blot 檢測(cè)中則結(jié)合出現(xiàn)IgG 分子50 and 25 kDa 的重鏈和輕鏈條帶。
二抗的選擇 二抗應(yīng)選用與使用的一抗相同的物種來(lái)源,例如:如果你的一抗是小鼠的單克隆抗體,二抗則選抗小鼠的二抗anti-mouse secondary。建議檢查二抗說(shuō)明書(shū)確保該抗體適用于你的檢測(cè)應(yīng)用, 二抗一般連接熒光素FITC 或發(fā)光團(tuán)。
上海谷研生物科技有限公司特殊抗體的保存條件:
. 酶聯(lián)抗體:永遠(yuǎn)保存在4 度,避免凍起來(lái)。否則會(huì)導(dǎo)致酶活性的下降或者喪失
2. 偶聯(lián)抗體:所有偶聯(lián)抗體都是在棕色管中或使用錫箔紙避光保存。尤其是熒光抗體,對(duì)
光極為敏感,因此在所有的實(shí)驗(yàn)階段也是要避光操作的!
3. IgG3 的同型對(duì)照:永遠(yuǎn)保存在4 度,避免凍起來(lái)。因?yàn)槿绻霈F(xiàn)凍融過(guò)程,該抗體非常
容易形成多聚體無(wú)論是保存還是運(yùn)輸,避免反復(fù)凍融!
反復(fù)凍融會(huì)導(dǎo)致抗體變性,導(dǎo)致多聚體形成,從而降低抗體的結(jié)合能力!
其它相關(guān)信息:
LAIR-/CD305(Leukocyte-associated immunoglobulin-like receptor ) 白細(xì)胞相關(guān)免疫球蛋白樣受體抗體
Layilin 透明質(zhì)酸受體抗體
goat anti-mouse IgG(beads) 兔抗小鼠IgG 免疫磁珠
LAIR-2/CD306(Leukocyte-associated immunoglobulin-like receptor 2) 白細(xì)胞相關(guān)免疫球蛋白樣受體2抗體
LCAT(lecithin cholesterol acyl transferase) 卵磷酰基轉(zhuǎn)移酶抗體
LDL-R (Low-density lipoprotein receptor precursor) 低密度脂蛋白受體抗體
ox-LDL(oxidized low density lipoprotein) 抗氧化低密度脂蛋白抗體
Goat anti-mouse IgM/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標(biāo)記羊抗小鼠IgM
Goat anti-rat IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標(biāo)記羊抗大鼠IgG
LEF-(lymphoid enhancing factor-) 淋巴增強(qiáng)因子-抗體
Leptin 瘦素抗體
Leptin receptor 瘦素受體抗體
Leptin receptor 瘦素受體抗體
Leptin receptor(long) 瘦素受體抗體(長(zhǎng))
Leptin receptor(L、M、S) 瘦素受體抗體(長(zhǎng)、中、短型)
L-enk 抗腦啡肽抗體
Lgr5/GPR49(G protein coupled receptor 49) Lgr5/GPR49抗體
關(guān)于加入甘油保存:有些人會(huì)加50%的甘油到抗體中來(lái)避免反復(fù)凍融,甘油在-20 度 會(huì)降低冰點(diǎn)。這對(duì)很多抗體可能是可行的。但是abcam 僅對(duì)非常小的一部分抗體檢測(cè)過(guò)其在這種條件下的穩(wěn)定性;而abcam 只對(duì)按照條件保存的抗體提供質(zhì)量保證!加入甘油的溶液不建議在-80 度保存,因?yàn)檫@已經(jīng)超過(guò)了甘油的冰點(diǎn)。如果您要加入甘油來(lái)保存抗體的話,請(qǐng)謹(jǐn)慎注意無(wú)菌操作,避免污染!
關(guān)于蛋白保護(hù)劑:
蛋白在高濃度時(shí)更不容易降解( mg/ml 或者更高),這就是為什么在抗體中加入BSA 之類作為穩(wěn)定劑的原因了;另一方面,加入的蛋白也可以減少抗體由于管壁吸附所造成的損失。但是如果抗體要用來(lái)標(biāo)記的話,則不能加入蛋白穩(wěn)定劑,因?yàn)檫@些穩(wěn)定劑會(huì)和抗體一起競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合標(biāo)記物。
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