CellSorter單細(xì)胞分選系統(tǒng)
背景：
通常情況下，分子生物學(xué)研究都是針對(duì)組織樣本或者一個(gè)細(xì)胞群來(lái)進(jìn)行。然而，組織樣本中一般包含多種類型的細(xì)胞，即使來(lái)自于同一個(gè)細(xì)胞群的各個(gè)細(xì)胞間的基因水平、表達(dá)水平會(huì)存在不同程度的差異，互為異質(zhì)細(xì)胞。以組織或細(xì)胞群為起始樣本的研究，可能會(huì)因?yàn)榧?xì)胞異質(zhì)性而獲得錯(cuò)誤的結(jié)果。以腫瘤發(fā)生為例，腫瘤的發(fā)生是單細(xì)胞中多種突變積累演化的結(jié)果，一個(gè)腫瘤組織中往往會(huì)包含處于不同階段的腫瘤細(xì)胞甚至前腫瘤細(xì)胞。采取組織樣本進(jìn)行研究，稀有卻重要的基因突變很可能淹沒在背景數(shù)據(jù)中，而采用單細(xì)胞進(jìn)行實(shí)驗(yàn)則可避免上述的情況出現(xiàn)，獲得更可靠更有意義的結(jié)果。
單細(xì)胞實(shí)驗(yàn)在腫瘤、干細(xì)胞、神經(jīng)、生殖、微生物學(xué)等多個(gè)領(lǐng)域以及法醫(yī)學(xué)中應(yīng)用廣泛，主要是基于以下特點(diǎn)：
單細(xì)胞亦包含一個(gè)物種全部的遺傳信息；
單細(xì)胞實(shí)驗(yàn)避免了細(xì)胞異質(zhì)性的干擾，準(zhǔn)確性更高。
單細(xì)胞實(shí)驗(yàn)有利于還原生物事件本身，諸多生物事件如胚胎發(fā)育、腫瘤形成及轉(zhuǎn)移等均以單細(xì)胞為起點(diǎn)。
概述
匈牙利Cellsorter公司推出的單細(xì)胞獲取平臺(tái)為獲取單細(xì)胞提供了完整的解決方案—全自動(dòng) Cellsorter單細(xì)胞分選系統(tǒng)。
Cellsorter可從血液、骨髓、制備的組織細(xì)胞懸浮等液態(tài)體系中挑選出感興趣的單細(xì)胞
CellSorter單細(xì)胞分選系統(tǒng)以顯微鏡為基礎(chǔ)，采用毛細(xì)管技術(shù)從少量樣本中分離單細(xì)胞和稀有細(xì)胞的自動(dòng)細(xì)胞分選系統(tǒng)，操作步驟是由軟件控制。
整個(gè)過程分為三個(gè)步驟：
1．細(xì)胞識(shí)別
2．細(xì)胞獲取
3．細(xì)胞沉積
該系統(tǒng)是一種安裝在正常倒置顯微鏡上的計(jì)算機(jī)控制的微量吸管系統(tǒng)，精準(zhǔn)量化細(xì)胞形變、細(xì)胞間粘附作用和細(xì)胞與基質(zhì)之間的粘附作用，可同步實(shí)現(xiàn)熒光觀測(cè)、單細(xì)胞捕獲、分選和分離和圖像視頻處理
一個(gè)可在已有顯微鏡上搭建的，可同步實(shí)驗(yàn)吸吮加載、圖像視頻處理與熒光觀測(cè)的細(xì)胞力學(xué)裝置?？山⑽⒐芪绷W(xué)加載-熒光觀測(cè)耦合的分子-細(xì)胞動(dòng)力學(xué)實(shí)時(shí)原位觀測(cè)系統(tǒng)。
單個(gè)細(xì)胞粘附力測(cè)定模式圖：
細(xì)胞與細(xì)胞之間粘附力測(cè)定模式圖：
通過施加負(fù)壓將細(xì)胞的一部分（或整體）吸入微管中,測(cè)量一定負(fù)壓吸吮作用下細(xì)胞的變形及其時(shí)間歷程或細(xì)胞粘附分離的臨界負(fù)壓來(lái)評(píng)價(jià)細(xì)胞的變形特性，同時(shí)記錄細(xì)胞的吸入量。
*圖像處理技術(shù)和力學(xué)模型，精準(zhǔn)量化測(cè)量細(xì)胞形變、細(xì)胞對(duì)之間的相互作用以及黏附特性、基質(zhì)附著細(xì)胞測(cè)定細(xì)胞硬度等力學(xué)特性。
壓電微管吸吮模塊：對(duì)樣品池內(nèi)細(xì)胞的捕獲、分選、吸吮和微操控；
集成倒置熒光相差顯微鏡：用于對(duì)所述細(xì)胞進(jìn)行熒光激發(fā)；
信號(hào)采集模塊：用于對(duì)微弱熒光信號(hào)的采集；
控制模塊：用于對(duì)微管吸吮和熒光采集同步觸發(fā)，并進(jìn)行數(shù)據(jù)分析處理
應(yīng)用范圍：
1）計(jì)算機(jī)控制的自動(dòng)化微吸管系統(tǒng)測(cè)定單細(xì)胞黏附力
2）計(jì)算機(jī)控制的自動(dòng)化微吸管系統(tǒng)測(cè)定細(xì)胞與細(xì)胞之間的黏附力
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