搜索一下“細(xì)胞離心”,關(guān)注度比較高的幾個就是細(xì)胞離心的轉(zhuǎn)速和時間或者和轉(zhuǎn)速時間相關(guān)的問題,那我們就重點介紹一下細(xì)胞離心機轉(zhuǎn)速和時間相關(guān)的問題。
細(xì)胞離心的轉(zhuǎn)速和時間為什么這么重要?
細(xì)胞本身非常脆弱,離心過程中就需要小心翼翼,速度快了,細(xì)胞會變形或者破裂,含辛茹苦培養(yǎng)的細(xì)胞就不能用了,哭唧唧~~
細(xì)胞離心的速度和時間推薦:
不同類型細(xì)胞離心,它們適合的條件也不同。
傳代細(xì)胞離心收集:
離心條件:80g-300 x g,常溫或者 37°C,時間 3-5 min
檢測用細(xì)胞離心:
離心條件:100g-300 x g,常溫或者 4°C,時間 3-10 min
特殊細(xì)胞離心收集:
PBMC 分離條件,400 x g,4°C,20 min
推薦有了,但是不同類型細(xì)胞,離心的參數(shù)也大不相同。比如今天小師弟說,做植物的花粉小孢子細(xì)胞離心時,paper 上推薦使用450g,4min. 但是經(jīng)過多試實驗中他只用了160g,4min就可以把細(xì)胞離心下來了,就算如此,對細(xì)胞還是有很大的損傷。
所以在自己不熟悉的儀器前面還是要小心謹(jǐn)慎些的,建議多做幾次預(yù)實驗,做梯度離心,注意每次都要鏡檢上清,以確認(rèn)沒有細(xì)胞損失。
選擇什么樣的離心機合適?
離心轉(zhuǎn)速不能高;---低速離心機
不同的細(xì)胞對溫度的敏感性不同;---需要選擇是否要帶溫度調(diào)節(jié)功能
轉(zhuǎn)子啟動運行后,升降速過程可能造成細(xì)胞的機械損傷;---需要升降速可調(diào)
活細(xì)胞的離心速度一定要低,優(yōu)選水平離心,收集更充分。---需要能配水平轉(zhuǎn)子
離心的試管一般是15ml和50ml;---需要能同時離心15和50ml轉(zhuǎn)子
總結(jié)一下就是一臺低速(低溫)離心機+一個水平轉(zhuǎn)子(15ml、50ml配套的管架),下面幾款可以參考下:
如果你還有更多細(xì)胞離心的問題,可以聯(lián)系我們的客服,提出你的問題,我們一起探討。