tmb顯色液-單組分tmb顯色液-TMB顯色劑
tmb顯色液-單組分tmb顯色液-TMB顯色劑
Soluble Substrate
貨號 規(guī)格
BF06007-1 500ml
BF06007-2 100ml
一、產(chǎn)品描述
即用型,用于標(biāo)記物為辣根過氧化物酶的ELISA,單一組分,穩(wěn)定性好,使用方便。 TMB底物液的主要成分是3,3’,5,5’ –四甲基聯(lián)苯胺(3,3’,5,5’ - tetramethylbenzidine, TMB),是辣根過氧化物酶(HRP)的底物,在辣根過氧化物酶的作用下,與氧化劑反應(yīng)生 成藍(lán)色產(chǎn)物。顏色的強(qiáng)弱與HRP 的活性呈正比,從而可以用于檢測基于HRP 標(biāo)記物的檢測。
二、使用方法
1. 在每孔中加入100 μl TMB溶液;
2. 室溫孵育5~30分鐘,根據(jù)反應(yīng)體系的需要調(diào)整反應(yīng)時間;
3. 加100μl終止液(0.1% NaF, 0.3M H2SO4 或0.25M HCl)終止后5分鐘之內(nèi)檢測, 在酶標(biāo) 儀上檢測,用0.1% NaF終止時,檢測波長為650nm;用0.3M H2SO4 或0.25M HCl終止, 檢測波長450nm。
三、儲存及運輸 常溫運輸(勿超過30℃),2-8℃儲存,有效期2年。
四、tmb顯色液-單組分tmb顯色液-TMB 顯色劑使用時的注意事項:
1. 選擇:根據(jù)ELISA實驗的要求不同選擇合適的TMB底物,保證實驗在的反應(yīng)條件下, TMB底物都具有高穩(wěn)定性,選擇時可從標(biāo)準(zhǔn)型開始優(yōu)化條件。
2. 本品適合于標(biāo)記物為HRP的ELISA實驗,本品中含有的TMB和過氧化氫,HRP的 作用下,TMB被氧化形成水溶性藍(lán)色產(chǎn)物,在370nm和650nm有吸收峰。進(jìn)行動力學(xué)實 驗時,可直接檢測650 nm的吸光度。加入終止液,可進(jìn)行終點法檢測。終止液可以選擇 0.1%NaF,終止后TMB的顏色不變,在650nm 檢測,也可肉眼觀察定性判斷。加入酸 性終止液后變成黃色,檢測波長為450 nm,吸光度值可較不酸化增加數(shù)倍。
3. 本產(chǎn)品對各種氧化劑敏感,應(yīng)在使用過程中避免污染,切忌將槍頭直接插入瓶中取液, 應(yīng)倒出所需要液量,剩余溶液不要倒回原包裝瓶中以免污染。
4. 操作過程中避免陽光的直射,分裝的容器建議用塑料容器,不建議使用玻璃容器,避免使用金屬容器以及細(xì)菌和氧化還原劑污染的容器。
5. 分裝時使用稱重的方法或蠕動泵。
6. 過高濃度的HRP會導(dǎo)致TMB呈現(xiàn)綠色或紅色,或終止后出現(xiàn)沉淀,應(yīng)該減少抗體和標(biāo) 記物的用量或縮短孵育時間。
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