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目錄:上海聯(lián)祖生物科技有限公司>>科研細(xì)胞>>細(xì)胞系>> SNU-182細(xì)胞

SNU-182細(xì)胞
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注意事項(xiàng):
     盡管經(jīng)測(cè)試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對(duì)于其檢測(cè)效果無顯著影響,但為取得良好的使用效果,3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存,并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融。
     如果有細(xì)菌或真菌污染,會(huì)嚴(yán)重影響檢測(cè)效果。
     染色后宜盡快檢測(cè),時(shí)間過長(zhǎng)可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加。
     如果細(xì)胞收集過程中使用了胰酶,需注意設(shè)法去除殘留的胰酶。殘留的胰酶會(huì)消化并降解Annexin V-FITC,導(dǎo)致染色失敗。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅,在進(jìn)行熒光觀察時(shí),盡量縮短觀察時(shí)間,同時(shí)在操作和存放過程中也盡量注意避光保存。
     用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí),如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過多的PI假陽性細(xì)胞,并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善,可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測(cè),這樣通??梢杂行p少假陽性的壞死細(xì)胞。
     需自備PBS。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
     為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
產(chǎn)品名稱:肝癌細(xì)胞;SNU-182
英文簡(jiǎn)稱:SNU-182細(xì)胞

貨號(hào):LZ-X968379
規(guī)格:T25
生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)

圖片2.jpg 

我司常期代理ATCC Acris  abcam  cst  Biorbyt  santa  Novus  sigma  lifespan  NEB  roche  ABI  R&D millipore   BD  Qiagen Cayman  Jackson Life  GeneTex   Bio-Rad DSHB  tocris   peprotech 等品牌;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨,公司產(chǎn)品僅用于科研超低比價(jià),產(chǎn)品貨期短,價(jià)格優(yōu),售后齊全。

凍存培養(yǎng)基:
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基。
1)細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化,可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO,適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案:
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案,必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。 
1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲(chǔ)存,直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí),利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度,計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀。
注:離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀,將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí),應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞,使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞,使溫度每分鐘大約降低  1°C。或者,將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。

圖片2.jpg 

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
   1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照。
實(shí)驗(yàn)材料: 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè);
3、50ml離心筒2個(gè) 
4、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè),細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 
5、1ml ,200μl移液器各1支;槍頭盒2個(gè);無菌玻璃攪拌棒1個(gè) 
6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊; 
7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把; 
8、酒精燈1臺(tái);

綿羊色素上皮衍生因子(PEDF)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒2-溴-6-氟三氟苯地衣芽孢桿菌用途: 植物病原物;用于該菌種群演化與流行學(xué)監(jiān)測(cè)

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綿羊質(zhì)金屬蛋白酶7(MMP-7)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒-6-溴吡啶-2-羧酯香菇拉丁屬名: Agaricus bisporus (Lange) Singer

綿羊補(bǔ)體1抑制因子(C1INH)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒  -6-溴吡啶-2-羧酯雙孢蘑菇(白蘑菇、洋蘑菇)用途: 可食或有、菌根菌

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綿羊粒特異性抗核抗體(GSANA)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒  三環(huán)己膦后藤假絲酵母用途: 潮霉素(hphr)抗性盒

綿羊抗心磷脂抗體IgG(ACA-IgG)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 三環(huán)己膦大腸桿菌拉丁屬名: Propionibacterium jensenii

綿羊亮氨酰氨肽酶(LAP)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 2-(4-溴苯)苯并咪唑詹氏桿菌拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae

綿羊角蛋白18(CK-18/KRT18)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒  2-(4-溴苯)苯并咪唑釀酒酵母用途: 教學(xué)科研

綿羊組織轉(zhuǎn)谷氨酰酶(TGM2)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒1-丁-3-咪唑硫氫鹽鏈格孢用途: 用作生物防治研究

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綿羊胸腺質(zhì)淋巴生成素(TSLP)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒4-溴丁露濕漆斑菌拉丁屬名: Pediococcus  acidilactici

綿羊血清/糖皮質(zhì)激素調(diào)節(jié)激酶2(SGK2)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒4-溴丁乳片球菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用

綿羊狀旁腺激素(PTH)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒(S)-N-Boc-2-哌啶不吸水鏈霉菌拉丁屬名: Bacillus sp.

綿羊異常凝血酶原(APT)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒  (S)-N-Boc-2-哌啶芽孢桿菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
SNU-182細(xì)胞雞蛋白C抑制劑(PCI)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒Anti-Phospho-FRA1 (Ser265) /FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化FRA-1蛋白抗體IgG

雞神經(jīng)肽Y(NPY)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒Anti-FSCN1/FITC  熒光素標(biāo)記纖維束蛋白同源物1/肌動(dòng)蛋白集束蛋白/圓線蟲紫癜 抗體IgG

雞磷脂酰肌蛋白聚糖4(GPC4)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 Anti-FSH/FITC  熒光素標(biāo)記促卵泡激素抗體IgG

雞泛素蛋白D(UBD)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒Anti-FSH-R/FITC  熒光素標(biāo)記促卵泡激素受體抗體IgG

雞質(zhì)金屬蛋白酶-13(MMP-13)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒Anti-FSP/Spastin/FITC  熒光素標(biāo)記抗纖維母表面抗原抗體IgG

雞半乳凝集素4(GAL4)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒Anti-FST/FITC  熒光素標(biāo)記抗卵泡抑素抗體IgG

雞磷脂酶A2受體1(PLA2R1)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒Anti-F1 operon positive regulatory protein(NT)/FITC  熒光素標(biāo)記鼠疫耶爾森氏菌F1莢膜蛋白抗體(N端)IgG

雞生長(zhǎng)調(diào)節(jié)致癌因β(GROβ)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒  Anti-F1 operon positive regulatory protein(CT)/FITC  熒光素標(biāo)記鼠疫耶爾森氏菌F1莢膜蛋白抗體(C端)IgG


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