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更新時(shí)間:2021-08-13 15:47:09瀏覽次數(shù):1374評(píng)價(jià)
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免疫熒光技術(shù)的實(shí)驗(yàn)步驟:
一、準(zhǔn)備好試劑與儀器:
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標(biāo)記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實(shí)驗(yàn)步驟
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標(biāo)本片上,十分鐘后棄去,使標(biāo)本保持一定濕度。
2.滴加適當(dāng)稀釋的熒光標(biāo)記的抗體溶液,使其*覆蓋標(biāo)本,置于有蓋搪瓷盒內(nèi),保溫一定時(shí)間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分鐘,并不停地?fù)u晃振蕩。
4.取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標(biāo)本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標(biāo)本的特異性熒光強(qiáng)度。
公司抗體僅用于科研現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、*、實(shí)驗(yàn)效果好,同時(shí)我司為您提供新價(jià)格、說明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說明,歡迎前來選購!
英文名稱 Anti-CPA3/MC-CPA
中文名稱 CPA3/MC-CPA抗體
別 名 carboxypeptidase A; Carboxypeptidase A3; carboxypeptidase A3 mast cell; CBPA3_HUMAN; Cpa3; Mast cell carboxypeptidase A; mast cell carboxypeptidase A3; MC CPA; MC-CPA.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 發(fā)育生物學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 干細(xì)胞
蛋白分子量 predicted molecular weight: 36kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from Human CPA3/MC-CPA
亞 型 IgG
免疫熒光技術(shù)的實(shí)驗(yàn)步驟:
一、準(zhǔn)備好試劑與儀器:
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標(biāo)記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實(shí)驗(yàn)步驟
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標(biāo)本片上,十分鐘后棄去,使標(biāo)本保持一定濕度。
2.滴加適當(dāng)稀釋的熒光標(biāo)記的抗體溶液,使其*覆蓋標(biāo)本,置于有蓋搪瓷盒內(nèi),保溫一定時(shí)間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分鐘,并不停地?fù)u晃振蕩。
4.取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標(biāo)本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標(biāo)本的特異性熒光強(qiáng)度。
抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物
常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對(duì)分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存建議將抗體分裝后進(jìn)行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
實(shí)驗(yàn)步驟:
① 滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標(biāo)本片上,10min后棄去,使標(biāo)本保持一定濕度。
② 滴加適當(dāng)稀釋的熒光標(biāo)記的抗體溶液,使其*覆蓋標(biāo)本,置于有蓋搪瓷盒內(nèi),保溫一定時(shí)間(參考:30min)。
③ 取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸3-5 min,不時(shí)振蕩。
④ 取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標(biāo)本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
⑤ 立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標(biāo)本的特異性熒光強(qiáng)度,一般可用“+"表示:
(-)無熒光;(±)極弱的可疑熒光;(+)熒光較弱,但清楚可見;(++)熒光明亮;(+++ --++++)熒光閃亮。待檢標(biāo)本特異性熒光染色強(qiáng)度達(dá)“++"以上,而各種對(duì)照顯示為(±)或(-),即可判定為陽性。
雞相關(guān)血漿蛋白2(PAPPA2)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒2′-溴苯乙釀酒酵母拉丁屬名: Bacillus licheniformis
雞叉頭框蛋白C1(FOXC1)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒雙(亞乙二氨)化鉑(II)地衣芽孢桿菌拉丁屬名: Alcaligenes faecalis
雞熱休克蛋白90(HSP-90)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 雙(亞乙二氨)化鉑(II)糞產(chǎn)桿菌拉丁屬名: Escherichia coli
雞Pirin蛋白(PIR)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒(S, S)-環(huán)己二大腸埃希氏菌(大腸桿菌)*拉丁屬名: Bacillus sp.
雞糖化蛋白(GSP)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 (S, S)-環(huán)己二芽胞桿菌拉丁屬名: Saccharopolyspora gregorii
雞血管活性腸肽(VIP)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒(S, S)-環(huán)己二格氏糖多孢菌用途: 害蟲生物防治
聚體結(jié)合轉(zhuǎn)錄因子2(OBTF2)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒(S, S)-環(huán)己二白僵菌拉丁屬名: Bacillus subtilis
雞β淀粉樣蛋白1-42(Aβ1-42)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 2-苯頻哪酯枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
雞血漿五聚蛋白3 (PTX 3/TSG-14)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒2-苯頻哪酯釀酒酵母拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
雞粘蛋白5AC(MUC5AC)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒2-溴吡啶-5-頻哪酯釀酒酵母拉丁屬名: Aspergillus tubingensis
雞蛋白酶3抗體(PR3Ab)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒2-溴吡啶-5-頻哪酯塔賓曲霉拉丁屬名: Oceanobacillus luteolus
雞鳥氨脫羧酶(ODC)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒4-氨苯頻哪酯微黃大洋芽孢桿菌拉丁屬名: Gordonia sp.
雞胸腺激活調(diào)節(jié)趨化因子(TARC)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒4-氨苯頻哪酯戈登氏菌屬注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
雞自噬因(BECN1)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 2-氨-6-苯灰樹花2號(hào)拉丁屬名: Massilia eurypsychrophila
雞補(bǔ)體C5轉(zhuǎn)化酶(C5c)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 2-氨-6-苯馬賽菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
雞纖溶酶(Fbn)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 ,6-二氟-4-羥苯花楸盤多毛孢注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
CPA3/MC-CPA抗體雞乙酰膽堿受體抗體(AChRab)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 Anti-Phospho-CDC42 (Ser71) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化分化周期CDC42蛋白抗體IgG
雞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)核信號(hào)1(ERN1)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒Anti-Jagged1/CD339 /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠Jagged1/CD339抗體IgG
雞轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白(TTR)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 Anti-CDK1/FITC 熒光素標(biāo)記周期素依賴性激酶1抗體IgG
雞集落激因子(CSF)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 Anti-CDK2/FITC 熒光素標(biāo)記周期素依賴性激酶2抗體IgG
雞P62抗體(AP62A)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒Anti-CDK3 /FITC 熒光素標(biāo)記周期素依賴性激酶3抗體IgG
雞蕈堿型乙酰膽堿受體亞型M3(M-AChR M3)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒Anti-CDK4/FITC 熒光素標(biāo)記周期素依賴性激酶4抗體IgG
雞神經(jīng)激肽B(NKB)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 Anti-CDK5/FITC 熒光素標(biāo)記周期素依賴性激酶5抗體IgG
雞穿孔蛋白1/成孔蛋白(PRF1/PFP)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒Anti-CDK6/FITC 熒光素標(biāo)記周期素依賴性激酶6抗體IgG
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