目錄:上海帛科生物技術(shù)有限公司>>生化檢測試劑盒>>氮代謝系列>> 亞硝酸還原酶(NiR)測試盒微量法
| 貨號 | BK-01S6480 |
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特別提醒：本產(chǎn)品僅供科研研究使用，不得用于人體臨床直接檢測。
產(chǎn)品名稱：亞硝酸還原酶(NiR)測試盒微量法
產(chǎn)品規(guī)格：100管/48樣
檢測方法：微量法
產(chǎn)品貨號：BK-01S6480
產(chǎn)品分類：氮代謝系列
商品介紹：
測定意義: 硝酸還原酶（NiR）是一類能催化亞硝酸鹽還原的酶，廣泛存在于微生物及植物體內(nèi)，是自然界氮循環(huán)過程中的關(guān)鍵酶，可以將亞硝酸鹽降解為NO或NH3，從而減少環(huán)境中亞硝態(tài)氮的積累，降低因亞硝酸鹽累積而造成的對生物體的毒害作用。 測定原理 亞硝酸還原酶可將NO2—還原為NO，使樣品中參與重氮化反應(yīng)生成紫紅色化合物的NO2—減少，即540nm處吸光值的變化可反應(yīng)亞硝酸還原酶的活性。 需自備的儀器和用品 天平、研缽、可見分光光度計、水浴鍋、低溫離心機、1mL玻璃比色皿。 |
所需的儀器和用品：
可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿（光徑 1cm）、低溫離心機、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶（SOD）的測定：
建議正式實驗前選取 2 個樣本做預(yù)測定，了解本批樣品情況，熟悉實驗流程，避免實驗
樣本和試劑浪費！
1、樣本制備
① 組織樣本： 取約 0.1g 組織（水分充足的樣本可取 0.25g），加入 1mL 提取液，在 4oC 或冰浴進(jìn)行 勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min，取上清作為待測液。 【注】：若增加樣本量，可按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例進(jìn)行提取
| ② 細(xì)菌/細(xì)胞樣本： 先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；取約 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL 提取液，超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（冰浴，功率 200W，超聲 3s，間隔 10s，重復(fù) 30 次）； 12000rpm 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測。 【注】：若增加樣本量，可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量（10 4）：提取液（mL）為 500~1000：1 的比例進(jìn)行提取。 ③ 液體樣本：直接檢測；若渾濁，離心后取上清檢測。 |
實驗方法學(xué)：
一、肝素的配制：
市售肝素凍干粉140單位/mg，1克瓶裝，每瓶140，000單位，稱取0.1克肝素凍干粉，加生理鹽水5ml，配成2800單位/ml。取50～100μl濕潤管壁，可抗凝人血3～5ml，血液不會凝固。老鼠血易凝固，所以最好更濃一些?？梢匀?.1克肝素凍干粉，加3ml生理鹽水溶解后，取50～100μl,可抗凝鼠血2～4ml。
肝素抗凝管的制備：取0.1克肝素凍干粉，加2.5ml生理鹽水。取100μl～150μl滴入塑料或玻璃管中，濕潤管壁，低于80℃小烤箱中（可以用烤面包的小烤箱），橫向轉(zhuǎn)動，每隔5～10分鐘轉(zhuǎn)動一次，直至干燥后放入4℃保存，可使2～5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集：
全血根據(jù)收集的條件，分成不抗凝和抗凝兩種。同時，不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清；抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1～2小時，直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血，輕輕顛倒充分抗凝后，可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征，選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。
選擇抗凝的注意點：
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后
用于測定。
50T 副豬嗜血桿菌定量PCR檢測試劑盒 低溫運輸，-20℃保存
V-P試劑盒 5ml*4
1瓶 Lec1細(xì)胞株 Lec1 低溫運輸和保存
改良麥康凱肉湯添加劑 Modified MacConkey Broth Additives 1ml*5支
100mg 膠原Ⅰ型 Collagenase TypeⅠ 4℃保存
250mL Stripping Buffer,4X Stripping Buffer,4X 常溫保存
100次 一步式胞漿蛋白微量制備試劑盒 One-Step Cytoplasmic Protein Miniprep Kit 4℃保存
2 ug pSIREN-RetroQ-ZsGreen pSIREN-RetroQ-ZsGreen 低溫運輸，-20℃保存
100mL Oligo（dT）再生溶液 Oligo (dT) Recharger 常溫避光保存
2 ug pCMV-SPORT6 FLJ21908 pCMV-SPORT6 FLJ21908 低溫運輸，-20℃保存
CHO培養(yǎng)基基礎(chǔ) CHO Medium Base 250g
亞硝酸還原酶(NiR)測試盒微量法Phospho-Ret (Tyr905) 磷酸化指狀蛋白RET抗體 規(guī)格: 0.1ml
FAM161B FAM161B蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
Phospho-BRCA1(Ser1524) 磷酸化易基因1抗體 規(guī)格: 0.1ml
HAUSP/USP7 皰疹毒相關(guān)泛素特異性蛋白7抗體 規(guī)格: 0.2mlTRAILR2/DR5/CD262 瘤細(xì)胞調(diào)亡素/死亡受體5抗體 規(guī)格: 0.1ml
GDN/SERPINE2 膠質(zhì)源性連接蛋白抗體 規(guī)格: 0.2mlGPBB/PYGB 腦糖原磷酸化抗體 規(guī)格: 0.2ml
FBXL5 FBXL5蛋白抗體 規(guī)格: 0.2mlARSA 芳香基硫酸酯1抗體 規(guī)格: 0.2ml
RNASE4/Angiogenin 管生成素核糖核酸4抗體(肌萎性側(cè)索硬化癥蛋白) 規(guī)格: 0.1mlBcl2A1 BCL2相關(guān)蛋白A1抗體 規(guī)格: 0.1ml
DR3/APO3/TWEAK 死亡受體3抗體 規(guī)格: 0.1mlArfaptin 2 ADP核糖基化因子結(jié)合蛋白2抗體 規(guī)格: 0.2ml
ADAM11 去整合素樣金屬蛋白11抗體 0.2mlPAK1 p21激活激1抗體 規(guī)格: 0.1ml
Phospho-DARPP32(Thr34) 磷酸化多巴胺/cAMP調(diào)節(jié)神經(jīng)磷蛋白抗體 規(guī)格: 0.1mlIKAROS 鋅指蛋白IKAROS抗體 規(guī)格: 0.2ml
Aurora A/ARK-1/AURKA 有絲分裂激A抗體 規(guī)格: 0.1mlKAT2B/ GCN5/PCAF 組蛋白乙酰轉(zhuǎn)移PCAF抗體 規(guī)格: 0.1ml
CK8 細(xì)胞角蛋白8抗體 規(guī)格: 0.1mlMAGEF1 黑色素瘤抗原F蛋白家族1抗體 規(guī)格: 0.2ml
注意事項：
1、試劑二為酶，不可冷凍，使用時在冰上放置。
2、對照管只需要做一管。
3、若對照管吸光值大于2，建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用（10μl試劑二原液+60μl蒸餾水）。
4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管，對照管數(shù)值在什么范圍？
對照管的范圍是0.8-2。對照管吸光值過低可能是（1）試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用；（2)沒有按順序加試劑；（3）反應(yīng)時間不夠，可以延長反應(yīng)時間（反應(yīng)時間30min可以延長到40min）。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。
若出現(xiàn)測定管大于對照管，可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大，為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測，通?？梢允箿y定正常。計算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。
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環(huán)保在線