目錄:上海帛科生物技術(shù)有限公司>>生化檢測試劑盒>>氮代謝系列>> 脲酶(UE)測試盒可見分光光度法
貨號 | BK-01S6509 |
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商品介紹:
測定意義: UE能夠水解尿素,產(chǎn)生氨和碳酸。UE活性與有機物質(zhì)含量、全氮和速效氮含量呈正相關(guān),反應(yīng)了氮素狀況。 測定原理: 利用靛酚藍比色法測定脲酶水解尿素產(chǎn)生的NH3-N。 需自備的儀器和用品: 可見分光光度計/酶標(biāo)儀、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1 mL玻璃比色皿/96孔板、研缽、冰、甲苯(不允許快遞)和蒸餾水。 |
提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。
試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費代測,7個工作日出結(jié)果,提供原始數(shù)據(jù)!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 檢測方法 | 貨號 |
脲酶(UE)測試盒可見分光光度法 | 50管/24樣 | 可見分光光度法 | BK-01S6509 |
實驗結(jié)果判斷我有妙招:
1、定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中待測物的含量。
2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。
4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類及要求:
① 易揮發(fā)、低燃點的試劑要密封,放于陰涼、通風(fēng)、遠離火源處保存。
② 與水蒸氣,水發(fā)生反應(yīng)的物質(zhì)要密封,并遠離水源保存。
③ 易與氧氣作用的試劑,應(yīng)將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。
④ 與二氧化碳反應(yīng)的物質(zhì)要密封保存,其相應(yīng)的溶液較固體更易反應(yīng),所以更要注意密封保存。
⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風(fēng)處保存。
操作步驟:
1. 樣品的準(zhǔn)備:
a. 細胞樣品的準(zhǔn)備:收集細胞,用4 ℃或冰浴預(yù)冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預(yù)冷組織細胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測樣品。
b. 組織樣品的準(zhǔn)備:動物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測樣品。
d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒(P1511)測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細胞和組織的差異會比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準(zhǔn)備20-100 ug蛋白量通常已經(jīng)足夠用于后續(xù)檢測。
e. 根據(jù)蛋白濃度和預(yù)計的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當(dāng)稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準(zhǔn)備好的樣品如果當(dāng)天測定,可以冰浴保存;如果當(dāng)天不能完成測定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當(dāng)天完成測定。
2. 試劑盒的準(zhǔn)備工作:
a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據(jù)待檢測樣品(包括標(biāo)準(zhǔn)品) 數(shù)量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當(dāng)混勻后再使用。
b. 反應(yīng)啟動工作液配制:將試劑盒提供的反應(yīng)啟動液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應(yīng)啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進行稀釋,即為反應(yīng)啟動工作液。4℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
c. (可選做) SOD 標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)備:需自備SOD標(biāo)準(zhǔn)品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標(biāo)準(zhǔn)品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升,參考樣品進行檢測。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標(biāo)準(zhǔn)品宜現(xiàn)稀釋現(xiàn)使用;本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標(biāo)準(zhǔn)品,但可以使用SOD標(biāo)準(zhǔn)品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。
2 ug pMETα C pMETα C 低溫運輸,-20℃保存
牛肉浸粉 Beef Extract Powder 250g
1瓶 SK-BR-3細胞株 SK-BR-3 低溫運輸和保存
普通肉湯培養(yǎng)基 Broth Medium 250g
1g 2,6- 二氯靛鈉 2,6-Dichloroindophenol Sodium Salt Hydrate 室溫干燥避光保存
雙抗巧克力瓊脂 Double anti-chocolate agar 250g
1套 可逆性銅染試劑盒
2 ug pYr-1.3-hH1-EGFP pYr-1.3-hH1-EGFP 低溫運輸,-20℃保存
5次 大提柱式質(zhì)粒 DNAout Maxi Column Plasmid DNAOUT 常溫保存(RNase A溶液4℃保存)
2 ug pET-28a-Sumo pET-28a-Sumo 低溫運輸,-20℃保存
硝酸鹽肉湯(還原)(軍團菌) 20支/盒
脲酶(UE)測試盒可見分光光度法C2ORF25 2號染色體開放閱讀框25抗體 規(guī)格: 0.2mlC1orf183 1號染色體開放閱讀框183抗體 規(guī)格: 0.2ml
BRD1 BRD1蛋白抗體 規(guī)格: 0.2mlTRPV4/TRP12 瞬時受體電位蛋白12抗體 規(guī)格: 0.2ml
PROK2/Prokineticin 2 前動力蛋白2抗體 規(guī)格: 0.2mlRabbit Anti-mouse IgM/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標(biāo)記的兔抗小鼠IgM 規(guī)格: 0.1ml
Rabbit Anti-human IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標(biāo)記的兔抗人IgG 規(guī)格: 0.1mlTrk B/NTRK2 酪激B抗體 規(guī)格: 0.1ml
phospho-ATG7(Ser95) 磷酸化自噬相關(guān)蛋白7抗體 規(guī)格: 0.1mlINPPL1 肌醇聚磷酸鹽磷酸樣蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2ml
Mouse Anti-human IgM/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標(biāo)記的小鼠抗人IgM 規(guī)格: 0.1mlEndomucin 內(nèi)皮粘蛋白EMCN抗體 規(guī)格: 0.2ml
SCP3 聯(lián)會復(fù)合體蛋白3抗體 規(guī)格: 0.1mlRabbit Anti-Mink IgG/APC APC標(biāo)記的兔抗水貂IgG 規(guī)格: 0.1ml
Proteasome 19S 10B 蛋白體PRS10B抗體 規(guī)格: 0.2mlPHD1/prolyl hydroxylase 脯氨酰羥化抗體 規(guī)格: 0.2ml
Phospho-p70 S6 Kinase Beta (Thr228) 磷酸化核糖體S6蛋白激β2抗體 規(guī)格: 0.1mlPhospho-Wee1(Ser642) 磷酸化WEE1蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml
Plzf 早幼粒細胞白鋅指蛋白抗體 規(guī)格: 0.2mlRabbit Anti-Bovine IgM/HRP 辣根過氧化物標(biāo)記的兔抗牛IgM 規(guī)格: 0.1ml
phospho-PP2A alpha(Tyr307) 磷酸化蛋酸2A(PP2Aα)抗體 規(guī)格: 0.1mlHistone H2A.Z/ H2AFZ 組蛋白H2AZ抗體 規(guī)格: 0.2ml
Phospho-FoxO1 (Ser319) 磷酸化叉蛋白家族1抗體 規(guī)格: 0.1mlGoat Anti-Bovine IgG/PE-CY5 PE-CY5標(biāo)記的羊抗牛IgG 規(guī)格: 0.1ml
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