一、試劑盒簡介
      本試劑盒為包含去除基因組DNA的高效DNase的新一代快速逆轉(zhuǎn)錄試劑盒，與上一代產(chǎn)品相比具有更高的逆轉(zhuǎn)錄效率。試劑盒中主要包含4管成分：gDNA Remover中主要包括濃縮的DNase及Buffer；4× EZscript RT Mix II中主要包含了逆轉(zhuǎn)錄所需的除引物以外的所有成分（逆轉(zhuǎn)錄酶、buffer、RNase Inhibitor、dNTPs等），Oligo dT18、Random Hexamer為獨(dú)立包裝，便于添加目標(biāo)片段特異性引物（如microRNA, lncRNA, circRNA等的特異性引物）。
      本試劑盒采用的DNase及Buffer反應(yīng)系統(tǒng)經(jīng)過特殊的優(yōu)化，僅需室溫（25°C）反應(yīng)5分鐘，就能降解95%以上的基因組DNA，*的降低了可能殘留的基因組對結(jié)果的干擾。
      本試劑盒采用的新型M-MLV突變體逆轉(zhuǎn)錄酶具有很強(qiáng)的抗*力及擴(kuò)增能力，擴(kuò)增效率尤佳，同時采用了目前新型優(yōu)化的反應(yīng)體系，進(jìn)一步提高了逆轉(zhuǎn)錄效率。使用本試劑盒逆轉(zhuǎn)錄15分鐘得到的擴(kuò)增產(chǎn)物量可以達(dá)到AMV逆轉(zhuǎn)錄酶大約1h的產(chǎn)物量（Ct值相同）。后續(xù)逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物建議用于PCR、qPCR、基因克隆等實(shí)驗。
 
二、產(chǎn)品組分

*1：包括逆轉(zhuǎn)錄酶、buffer、RNase Inhibitor、dNTP Mixture等組分。
 
三、保存條件
    本試劑盒建議置于-20℃保存。
 
四、試劑盒特點(diǎn)
    1、本試劑盒為預(yù)先混好的4× EZscript RT Mix II，只需加入模板RNA和水混勻后便可以開始反應(yīng)；使用了新一代逆轉(zhuǎn)錄酶，具有更強(qiáng)的酶活性和更高的靈敏度。
    2、含有去除基因組DNA的gDNA Remover，只需室溫5分鐘即可去除基因組DNA。
    3、只需42℃、15分鐘即可高效合成熒光定量PCR所需的高質(zhì)量cDNA模板，是進(jìn)行熒光定量PCR反應(yīng)的理想試劑。
    4、含有Oligo(dT)18和Random Hexamer兩種反轉(zhuǎn)錄引物，可根據(jù)實(shí)際情況區(qū)別使用。反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)可使用Oligo(dT)18引物或者Random Hexamer引物，也可以O(shè)ligo(dT)18和Random Hexamer兩種引物同時使用。只擴(kuò)增一種目的基因時，也可以使用Specific Primer作為反轉(zhuǎn)錄引物。
 
五、注意事項
    1、當(dāng)同時需要進(jìn)行數(shù)次反應(yīng)時，應(yīng)先配制各種試劑的混合液，然后再分裝到每個反應(yīng)管中。這樣可使所取的試劑體積更準(zhǔn)確，減少試劑損失，避免重復(fù)分取同一試劑。同時也可以減少實(shí)驗操作或?qū)嶒炛g產(chǎn)生的誤差。
    2、4× RT Master Mix在使用前需Vortex振蕩混勻，輕輕離心后使用。由于酶保存液中含有50%的甘油，粘度高，分取時應(yīng)慢慢吸取。同時，要使用精確、量程適合的移液槍，并且不要使Tip插入液面過深，否則會因Tip壁粘著造成損失，而使酶量不足。
    3、分裝試劑時務(wù)必使用新的槍頭 (Tip)，以防止樣品間污染。