ELISA過程包括抗原(抗體)吸附在固相載體上稱為包被,加待測抗原(抗體),再加相應(yīng)酶標(biāo)記抗體(抗原),生成抗原(抗體)-待測抗體(抗原)-酶標(biāo)記抗體的復(fù)合物,再與該酶的底物反應(yīng)生成有色產(chǎn)物。借助分光光度計(jì)的光吸收計(jì)算抗體(抗原)的量。待測抗體(抗原)的定量與有色產(chǎn)生成正比。
在豬白介素1α(IL-1α)ELISA試劑盒的使用過程中常見問題有很多。如:加樣器不確,尤其10ul以下的加樣器,對結(jié)果影響極大、保溫設(shè)備不良、洗滌用水不規(guī)范。如何解決這些問題呢,下面為您介紹以下幾點(diǎn)使用方法:
1、在使用過程校正加樣器;10ul以下加樣器采用進(jìn)口產(chǎn)品;
2、仔細(xì)校正溫度到37℃,水浴箱為佳;
3、必須使用去離子水或蒸餾水,不得用自來水、礦泉水等。
4、認(rèn)真閱讀使用豬白介素1α(IL-1α)ELISA試劑盒說明書。
5、樣品加樣
?。?)加樣時(shí)一定要仔細(xì)。加樣后,再檢查,以防漏加、錯加。
(2)加樣后,反復(fù)抽吸3次混勻,防止血清聚集孔底,導(dǎo)致非特異性吸附。
6、洗滌
?。?)每次注水洗滌,應(yīng)靜止30秒鐘;
?。?)選用吸水紙作為襯墊,每次洗滌后扣干孔內(nèi)水分;
(3)可選用塑料洗滌瓶。
7、豬白介素1α(IL-1α)ELISA試劑盒加酶反應(yīng)
?。?)包括陰性對照孔在內(nèi),各孔顯色普遍偏深;
?。?)包括陽性對照在內(nèi),各孔均無顯色;
(3)陽性對照不顯色,而其它樣本顯色正常;
?。?)有些標(biāo)本顯色不深,判斷陽性困難。