會(huì)員.png)
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| 分子量 | 激發(fā)（nm） | 發(fā)射（nm） | |
| 292633-16-0 | 711.72 | 341 | 441 |
Caspase 9是半guangansuan蛋白酶caspase家族CED-3亞家族的成員，在凋亡的執(zhí)行階段起著至關(guān)重要的作用。這些酶對(duì)于天冬氨酸殘基后的切割鍵具有主要的一級(jí)特異性。“啟動(dòng)子"胱天蛋白酶（例如胱天蛋白酶8）激活“效應(yīng)子"胱天蛋白酶，例如胱天蛋白酶3和7。效應(yīng)子胱天蛋白酶然后裂解細(xì)胞底物，zui終導(dǎo)致凋亡的形態(tài)學(xué)改變。Ac-LEHD-AMC是caspase 9的選擇性熒光底物。caspase9誘導(dǎo)的Ac-LEHD-AMC水解導(dǎo)致AMC熒光團(tuán)的釋放，可通過(guò)?365 nm的激發(fā)波長(zhǎng)和??的發(fā)射波長(zhǎng)檢測(cè)到450 nm?？梢栽谟?0 mM MES，pH 6.5、10％PEG 8000、0.1％CHAPS，5 mM DTT，
重要的是要存放在<-15°C的環(huán)境中，并應(yīng)存放在陰涼處。
自收到之日起12個(gè)月內(nèi)可以使用。
程序
以下協(xié)議僅提供指導(dǎo)，應(yīng)根據(jù)您的特定需求進(jìn)行修改。
使用AMC，AFC，pNA，R110和ProRed底物的常規(guī)解決方案胱天蛋白酶測(cè)定
在DMSO中準(zhǔn)備10 mM的儲(chǔ)備溶液。
如下準(zhǔn)備2X半胱天冬酶底物（50 µM）分析溶液：50 µL底物原液，100 µL DTT（1M），400 µL EDTA（100 mM），10 mL Tris Buffer（20 mM），pH = 7.4。
將等體積的半胱天冬酶標(biāo)準(zhǔn)品或樣品與2X半胱天冬酶底物測(cè)定溶液混合，并在室溫下孵育至少1小時(shí)。
使用熒光酶標(biāo)儀讀取熒光，或使用酶標(biāo)儀讀取吸光度。
使用細(xì)胞滲透性FMK Caspase探針的細(xì)胞Caspase測(cè)定
在DMSO中準(zhǔn)備2-5 mM的儲(chǔ)備溶液。
根據(jù)需要處理細(xì)胞。
通過(guò)用20 mM Hepes緩沖液（HHBS）在Hanks中稀釋DMSO儲(chǔ)備溶液（來(lái)自步驟2.1），制備2X滲透性半胱天冬酶底物（20 µM）分析溶液。
將等體積的處理過(guò)的細(xì)胞與2X半胱天冬酶底物測(cè)定溶液混合（來(lái)自步驟2.3），并在37°C，5％CO 2的 培養(yǎng)箱中孵育細(xì)胞至少1小時(shí)。
用HHBS清洗細(xì)胞至少一次。
通過(guò)流式細(xì)胞儀，熒光顯微鏡或熒光酶標(biāo)儀監(jiān)測(cè)熒光強(qiáng)度。
使用細(xì)胞滲透性FMK Caspase探針進(jìn)行細(xì)胞半胱天冬酶測(cè)定 （僅適用于＃13470-13476）
通過(guò)向小瓶中加入50 µL DMSO制備250X儲(chǔ)備液。
根據(jù)需要處理細(xì)胞。
以1：250的比例將250 X DMSO儲(chǔ)備溶液添加到細(xì)胞溶液中（例如2 µL至500 µL細(xì)胞），并將細(xì)胞在37°C，5％CO2的培養(yǎng)箱中孵育1小時(shí)。
用HHBS清洗細(xì)胞至少一次。
通過(guò)流式細(xì)胞儀，熒光顯微鏡或熒光酶標(biāo)儀監(jiān)測(cè)熒光強(qiáng)度。
13427 Caspase 9熒光底物(Ac-LEHD)2-R110 綠 (Ac-LEHD)2-R110 1 mg 13430 Caspase 3/7熒光底物(Z-DEVD)2-R110 綠 (Z-DEVD)2-R110 1 mg
