上海博湖生物科技有限公司
主營產(chǎn)品: 高密度脂蛋白ELISA檢測試劑盒,同型半胱氨酸ELISA檢測試劑盒,游離脂肪酸ELISA檢測試劑盒 |
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實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程,通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括定量和相對(duì)定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR
產(chǎn)品名稱 | |
英文名稱 | Ophiocordyceps |
貨號(hào) | BH-P99514 |
產(chǎn)品及特點(diǎn):
本產(chǎn)品包含Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反應(yīng)緩沖液,濃度為2×。具有快速簡便、靈敏度高、特異性強(qiáng)、穩(wěn)定性好等優(yōu)點(diǎn),可大限度的減少人為誤差。使用時(shí)只需加入DNA模板和引物既可。使用方便快捷,能避免PCR操作過程中的污染,使用時(shí)只需取適量2×TaqPCR MasterMix溶液,加入模板和引物,并加入去離子水補(bǔ)足體積,使MasterMix溶液濃度為1×即可進(jìn)行反應(yīng)。使用前請保證充分溶解并混勻,操作需在冰上進(jìn)行。本產(chǎn)品就是為此目的根據(jù) PCR 原理開發(fā)的試劑盒。
具有高靈敏度、高特異性、高穩(wěn)定性
可在同一個(gè)管子中高特異性的執(zhí)行cDNA合成與基于探針的qPCR反應(yīng)。更多優(yōu)點(diǎn)如1.的特異性;2.多重反應(yīng)(高通量);3.反應(yīng)體系配置,無需冰塊;4.無懼高GC含量PCR;5.預(yù)防交叉污染;6.廣泛的設(shè)備兼容性。
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位);在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板??芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
RL95-2, 人內(nèi)膜腺癌細(xì)胞系氫化大豆卵1脂;氫化卵1脂HSPC;Lecithins Hydrogenated質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
人急性單核細(xì)胞白血病細(xì)胞;THP-1 大鼠管內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL(標(biāo)準(zhǔn)品)Streptomycin質(zhì)量規(guī)格:效價(jià)測定
神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)Tevin-1TEVIN-1質(zhì)量規(guī)格:>98%
NA Others H1N1 甲型流感 H1N1 (A/USSR/90/1977) 神經(jīng)氨酸酶 (Neuraminidase / NA) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (標(biāo)準(zhǔn)品)neomycin質(zhì)量規(guī)格:效價(jià)測定
KM小鼠未分化神經(jīng)膠質(zhì)瘤瘤株;B22(標(biāo)準(zhǔn)品)Bacitracin質(zhì)量規(guī)格:效價(jià)測定
水牛皮膚成纖維樣細(xì)胞;WB-S53-羥基黃酮3-Hydroxyflavone;Flavol質(zhì)量規(guī)格:≥98%,BR
IL1RL1 Others Human 人 IL1RL1 / DER4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 銀杏酸C17:1Ginkgolic Acid C17:1質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥80%,美國進(jìn)口
恒河猴肺細(xì)胞;RM-L12-溴代萘2-Bromonaphthalene質(zhì)量規(guī)格:>98%
8. 骨骼肌細(xì)胞系統(tǒng)2-氯乙酰胺(>98.5%,BR)2-Chloroacetamide質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR
CL-0252A2(人腺樣囊性癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×22-氯乙基磺酸鈉(>98%,BR)2-Chloroethanesulfonic acid salt質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
NCI-H716(人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 3T3-L1(小鼠脂肪細(xì)胞)N'-Fmoc-L-賴氨酸質(zhì)量規(guī)格:>98%Fmoc-Lys-OH
CL-0318B16-F1(小鼠色素瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2Fmoc-天-β-芐酯質(zhì)量規(guī)格:>98%Fmoc-L-aspartic acid β-benzyl ester
REG1B Others Cymolgus 食蟹猴 REG1B / PSPS2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 芴甲氧羰基-L-天冬氨酸-1-叔丁酯質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BRFmoc-Asp(OH)-OtBu
人微血管內(nèi)皮細(xì)胞總RNAHDMEC NAFmoc-L-賴氨酸鹽酸鹽質(zhì)量規(guī)格:0.98Fmoc-Lys-OH·HCl
MDA-MB-435S細(xì)胞,人癌細(xì)胞 鼠成纖維細(xì)胞系,GR細(xì)胞 原代神經(jīng)元細(xì)胞特制基礎(chǔ)無血清培養(yǎng)基Many types of cells包裝:500/100ml氧化白藜蘆醇(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Oxyresveratrol
冬蟲夏草PCR鑒定試劑盒*人纖維環(huán)細(xì)胞HAFC1-溴-4-壬基苯(>95.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC)1-Bromo-4-nylbenzene
FSTL1 Others Mouse 小鼠 FSTL1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 1-溴-4-戊苯(>90.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>90.0%(GC)1-Bromo-4-pentylbenzene
大額牛與婆羅門牛雜交F1代皮膚成纖維樣細(xì)胞;BOS-61-溴-4-己苯(>90.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>90.0%(GC)1-Bromo-4-hexylbenzene
大鼠