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上海聯(lián)邁生物工程有限公司
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更新時間：2018-06-12 15:47:10瀏覽次數(shù)：363次
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超級雜交液A（本系列產(chǎn)品是即用型核酸雜交液，可以用于各種條件下的合適、基于膜的雜交（包括Southern Blot和Northern Blot）。其特點是：核酸雜交一般是指用一種標(biāo)記的核酸探針與印跡膜上的核酸進行雜交，由此檢測印跡膜上是否存在與探針同源的核酸分子（靶分子）。核酸雜交是分子生物學(xué)的基本技術(shù)之一，應(yīng)用非常廣泛。由于核酸雜交效率受印跡膜種類、雜交溫度、探針濃度、雜交液離子強度不含甲酰胺）
超級雜交液A（不含甲酰胺）
名稱 | 規(guī)格 | 價格 | 手冊 |
超級雜交液A（不含甲酰胺） | 100mL | 詢價 |
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本系列產(chǎn)品是即用型核酸雜交液，可以用于各種條件下的合適、基于膜的雜交（包括Southern Blot和Northern Blot）。其特點是：核酸雜交一般是指用一種標(biāo)記的核酸探針與印跡膜上的核酸進行雜交，由此檢測印跡膜上是否存在與探針同源的核酸分子（靶分子）。核酸雜交是分子生物學(xué)的基本技術(shù)之一，應(yīng)用非常廣泛。由于核酸雜交效率受印跡膜種類、雜交溫度、探針濃度、雜交液離子強度、雜交液pH及雜交液粘度等因素影響，用戶自己摸索和優(yōu)化相關(guān)條件非常繁瑣，因此本公司開發(fā)了本產(chǎn)品，它具有下列特點：
1. 既可用于Southern雜交（靶分子為DNA），也可用于和Northern雜交（靶分子為RNA），還可以用于菌落雜交，基因芯片等雜交。
2. 既可以用于同位素探針的雜交，也可以用于非同位素探針的雜交。
3. 既可以使用DNA（包括DNA Oligo）探針，也可以使用RNA探針（包括RNA Oligo）
4. 含多種能夠促進雜交的聚合物，使雜交反應(yīng)能在6~12小時完成，而常規(guī)雜交反應(yīng)一般需要12~24 小時。
5. 含多種封堵劑，能阻印跡膜對探針分子的非特異性吸附，能有效降低背景信號，延長曝光時間以便檢測到低拷貝的RNA（Northern）和單拷貝的基因（Southern）。
6. A型不含甲酰胺，B型含50%的甲酰胺。后者使雜交在較低溫度就可以完成，適合Tm較高的分子雜交（如RNA-RNA和RNA-DNA雜交）。
7. 跟各種常用的印跡膜兼容，包括硝酸纖維素膜和尼龍膜。
RNA提取法：試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚，其中異硫氰酸胍可裂解細胞，促使核蛋白體的解離，使RNA與蛋白質(zhì)分離，并將RNA釋放到溶液中。當(dāng)加入氯時，它可抽提酸性的苯酚，而酸性苯酚可促使RNA進入水相，離心后可形成水相層和有機層，這樣RNA與仍留在有機相中的蛋白質(zhì)和DNA分離開。水相層(無色)主要為RNA，有機層(黃色)主要為DNA和蛋白質(zhì)。
實驗步驟：
1、RNA的提取;
2、反轉(zhuǎn)錄合成cDNA;
3、PCR擴增;
4、產(chǎn)物的電泳和結(jié)果的測定。
RT-PCR是將RNA的反轉(zhuǎn)錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈?zhǔn)綌U增(PCR)相結(jié)合的技術(shù)。首先經(jīng)反轉(zhuǎn)錄酶的作用從RNA合成 cDNA，再以cDNA為模板，擴增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進行。在兩步法RT-PCR中，每一步都在zui條件下進行。
堿變性提取質(zhì)粒DNA是基于染色體DNA與質(zhì)粒DNA的變性與復(fù)性的差異而達到分離目的。在pH高達12.6的堿性條件下，染色體DNA的氫鍵斷裂，雙螺旋結(jié)構(gòu)解開而變性。質(zhì)粒DNA的大部分氫鍵也斷裂，但超螺旋共價閉合環(huán)狀的兩條互補鏈不會*分離，當(dāng)以pH4.8的NaAc高鹽緩沖液去調(diào)節(jié)其pH至中性時，變性的質(zhì)粒DNA又恢復(fù)原來的構(gòu)型，保存在溶液中，而染色體DNA不能復(fù)性而形成纏連的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，通過離心，染色體DNA與不穩(wěn)定的大分子RNA、蛋白質(zhì)-SDS復(fù)合物等一起沉淀下來而被除去。
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