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技術(shù)文章

細胞培養(yǎng)性能

閱讀:845發(fā)布時間:2018-7-25

作為上游細胞培養(yǎng)工藝的一部分,TAP Biosystems(Sartorius Stedim Biotech Group的一部分)的ambr250自動生物反應器系統(tǒng)被用于評估葉率輸入對細胞培養(yǎng)性能的影響。

在系統(tǒng)平臺上的24個生物反應器中,有10個于實驗,評估不同的功率輸入。與標準工藝相比,這個范圍從減少五倍到增加兩倍。

然后將ambr250的結(jié)果與在3L玻璃生物反應器中運行的標準工藝進行比較。這樣的生物反應器在工藝開發(fā)中很常見。

投資高通量細胞培養(yǎng)技術(shù)的一個關(guān)鍵考慮因素是建立數(shù)據(jù)以確保生物反應器間的可比性。重要的是,通過臺盼藍檢測的活細胞密度在運行標準工藝的五個ambr250生物反應器重復之間高度一致(圖2A)?;诖耍罴毎芏确植荚跇藴使に嚭吞岣叩墓β瘦斎牍に囍g沒有明顯的差異。

與3L玻璃生物反應器中的標準工藝相比,這兩個工藝優(yōu)勢明顯。有意思的是,低功率輸入工藝早期與標準工藝具有較好的可比性,但不能支持第11天后的細胞密度(圖2B)。

補料消耗曲線是細胞培養(yǎng)工藝開發(fā)過程中監(jiān)測和控制的一個重要變量。在此過程中,使用離線分析儀監(jiān)測葡萄糖濃度,ambr250自動機械臂采集生物反應器樣品。通過ambr250內(nèi)置泵及液面下的補料管線將營養(yǎng)物添加到培養(yǎng)物中。

每個不同工藝的葡萄糖水平在第11天之前是相似的(圖2C)。此時,由于細胞活率下降,低功率輸入條件下的葡萄糖消耗減少。

使用ambr250時,發(fā)現(xiàn)在比標準工藝低的功率輸入下運行對細胞培養(yǎng)性能具有負面影響。這可能是由于混合、營養(yǎng)輸送受損或由于較低的氧傳遞而導致氣泡剪切增加。無論是單獨還是關(guān)聯(lián)的,這些因素可能是ambr250平臺未來試驗的主題。

另外,發(fā)現(xiàn)在較高功率輸入下運行對細胞培養(yǎng)沒有負面影響,表明細胞對額外的基于攪拌的剪切不敏感。后,ambr250產(chǎn)生的培養(yǎng)環(huán)境與3L玻璃生物反應器產(chǎn)生的培養(yǎng)環(huán)境相當。


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