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土壤高速冷凍離心機(jī)在土壤DNA提取中的應(yīng)用

閱讀：67發(fā)布時間：2023-5-9

　　使用土壤高速冷凍離心機(jī)的所有轉(zhuǎn)頭都具有轉(zhuǎn)頭自鎖功能，能夠輕松裝卸，同時所有轉(zhuǎn)頭都能夠高溫高壓滅菌，保障了使用者的安全性。

　　土壤高速冷凍離心機(jī)具體提取土壤DNA的步驟：

　　一、土壤樣本預(yù)處理：

　　1、取500mg土壤樣本至研磨管中。

　　2、加入980µL緩沖液，輕柔渦旋混勻。

　　3、加入120μL裂解液。

　　4、將研磨管置于研磨儀中，40Hz處理40sec。

　　5、12000rpm離心5min，沉淀碎片顆粒。

　　6、轉(zhuǎn)移上清液至2mL離心管中。加入250μL去蛋白液，手動搖晃混勻。4℃放置5min。

　　7、12000rpm離心3min，之后取不多于900μL上清液，轉(zhuǎn)移至2mL離心管中。

　　8、加入1/3體積的結(jié)合液，輕柔渦旋混勻。4℃放置5min。

　　9、12000rpm室溫離心1min。轉(zhuǎn)移上清液至5mL離心管中。

　　10、加入1.5倍體積的緩沖液，立即吹打混勻。

　　二、DNA提?。?/div>

　　1、將DNA吸附柱套入2mL收集管中，備用。

　　2、將預(yù)處理混合液加入到DNA吸附柱中，12,000rpm室溫離心1min，棄掉廢液。

　　3、將DNA吸附柱放回收集管，加入600µL漂洗液，12,000rpm室溫離心30sec，棄廢液。

　　4、重復(fù)一遍步驟3。

　　5、將DNA吸附柱放回收集管，空柱12,000rpm離心2min，以除去殘留的漂洗液。

　　6、將DNA吸附柱放入新的潔凈1.5mL離心管中，在濾膜加入30-100µL洗脫液，室溫放置3min。然后12,000rpm離心1min，收集濾液即為樣本DNA。

　　7、DNA樣品可置于-20℃短期保存，-80℃長期保存。

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