上海邦景實(shí)業(yè)有限公司
主營(yíng)產(chǎn)品: 進(jìn)口elisa試劑盒,細(xì)胞株,細(xì)胞系,菌種 |
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- www.bhsy-e.com/
參考價(jià) | 面議 |
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- 品牌 其他品牌
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更新時(shí)間:2022-08-05 09:25:56瀏覽次數(shù):220
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詳細(xì)描述:
產(chǎn)品名稱:肉芽腫鞘桿菌探針?lè)?/span>PCR熒光定量檢測(cè)試劑盒
英文名稱:Calymmatobacterium granulomatis
貨號(hào):BJ-P9354
規(guī)格:50T
分類:熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門(mén)。
實(shí)驗(yàn)外包:
1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測(cè)、DNA甲基化檢測(cè)、生物信息學(xué)分析
2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測(cè):DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測(cè):Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測(cè):HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選
7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR
8.細(xì)胞及動(dòng)物模型:原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動(dòng)物模型構(gòu)建
實(shí)驗(yàn)過(guò)程:產(chǎn)品僅用于科研
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無(wú)到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允?/span>DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
小鼠組織纖溶酶原激活劑(mouse t-PA) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 Neutral berberine sulfate 中文名:硫酸黃連素 分子式:C20H20NO8S 度:98.0%
小鼠組織多肽抗原(TPA)ELISA試劑盒 Nevirapine 中文名:奈偉拉平 分子式:C15H14N4O
小鼠組織多肽抗原(mouse TPA) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 Neritaloside 中文名: 分子式:C32H48O10 度:97.5%
小鼠組織多肽抗原 英文名稱: Tissue Polypeptide Aigen 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫(xiě): TPA Ethyl 2-(3-cyano-4-isobutoxyphenyl)-4-methyl-5-thiazolecarboxylate 中文名: 分子式:C18H20N2O3S
小鼠組織蛋白去乙?;?/span>(HD)ELISA試劑盒 Nevirapine 129618-40-2 中文名:奈偉拉平 分子式:C15H14N4O 度:98.0%
五水合硫酸司巴丁 HPLC≥98% 20mg 人降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)試劑盒 Human calcitonin gene related peptide,CGRP ELISA Kit
五味子丙素 HPLC≥98% 20mg RatAi-ypsin,ATELISAKit大鼠抗(AT)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
五味子醇甲 HPLC≥98% 20mg 組蛋白H3-K64乙?;瘷z測(cè)試劑盒10/20等
五味子醇乙 HPLC≥98% 20mg Mouseai-IgEreceptoraibodyELISA試劑盒小鼠抗IgE受體抗體ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
五味子酚 HPLC≥98% 20mg 小鼠乙酰(ACH)ELISA試劑盒 ,英文名: ACH ELISA Kit
五味子酚乙 HPLC≥98% 5mg 小鼠腦紅蛋白(NGB)ELISA檢測(cè)試劑盒MouseNeuroglobin,NGBELISAKit 96T/48T
五味子甲素 HPLC≥98% 20mg 人降鈣素(CT)試劑盒 Human Calcitonin,CT ELISA Kit
五味子乙素 HPLC≥98% 20mg Ratapelin12,AP12ELISAKit大鼠apelin12(AP12)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
五味子酯甲 HPLC≥98% 20mg 組蛋白H3-K79(mono/di/i)甲基化檢測(cè)試劑盒10/20等
五味子酯戊 HPLC≥97% 20mg Mouseai-IVIgGaibodyELISA試劑盒小鼠抗IVIgG抗體ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
?10毫升玻璃勻漿器
石英96孔板
黑色96孔板
通用96孔
100微升1厘米光徑石英比色皿
肉芽腫鞘桿菌探針?lè)?/span>PCR熒光定量檢測(cè)試劑盒細(xì)胞鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶(CALCINEURIN;PP2B)活性酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測(cè)試劑盒
組織鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶(CALCINEURIN;PP2B)活性酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測(cè)試劑盒
細(xì)胞蛋白磷酸酶2A( PP2A)活性酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測(cè)試劑盒
組織蛋白磷酸酶2A (PP2A)活性酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測(cè)試劑盒
細(xì)胞鈣調(diào)蛋白(CaM)活性酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測(cè)試劑盒
使用方法:
一、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例)。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液,*用帶芯槍頭,下同)。
3. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 陽(yáng)性對(duì)照(濃度為 1×10E8 拷貝/μL,試劑盒提供),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 DNA 的制備
7. 用自選方法純化樣品的 DNA,本產(chǎn)品跟市場(chǎng)上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。
8. 如果有 N 個(gè)樣品,則需要進(jìn)行 N+2 個(gè)樣品提取,多出的一個(gè)用作樣品制備陽(yáng)性對(duì)照管、另一個(gè)用作樣品制備陰性對(duì)照管。
三、設(shè)置 qPCR 反應(yīng)(20μL 體系,在樣品制備室進(jìn)行)
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復(fù),則標(biāo)記 N+9 個(gè) PCR 管,其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品,1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照(用水做模板),6 個(gè)用于標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果做定性分析,并且只做 1 次重復(fù),則標(biāo)記 N+4 個(gè) PCR 管,其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品,1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照(用水做模板),1 個(gè)用于PCR 陽(yáng)性對(duì)照。