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原代細(xì)胞VS細(xì)胞系：

用酶或機(jī)械方法直接從人或動(dòng)物組織中分離出來(lái)的細(xì)胞。嚴(yán)格來(lái)說(shuō)，從機(jī)體分離出來(lái)到傳代之前的細(xì)胞稱為原代細(xì)胞，絕大部分的原代細(xì)胞在體外可以分裂10-15次(這與細(xì)胞的端粒長(zhǎng)短有關(guān))，再加上取材，成本等因素，通常會(huì)把培養(yǎng)的第一代到第十代以內(nèi)的細(xì)胞統(tǒng)稱為原代細(xì)胞。

?豬成骨細(xì)胞

商品屬性：

細(xì)胞簡(jiǎn)介：

豬成骨分離自顱骨組織；顱骨位于脊柱上方，由23塊形狀和大小不同的扁骨和不規(guī)則骨組成。除下頜骨及舌骨外，其余各骨彼此借縫或軟骨牢固連結(jié)，起著保護(hù)和支持腦、感覺(jué)器官以及消化器和呼吸器的起始部分的作用。顱分腦顱和面顱兩部分。腦顱位于顱的后上部，內(nèi)有顱腔，容納腦，共8塊。面顱為顱的前下部分，包含眶、鼻腔、口腔等結(jié)構(gòu)，構(gòu)成面部的支架，共15塊。成骨細(xì)胞是骨形成的主要功能細(xì)胞，負(fù)責(zé)骨基質(zhì)的合成、分泌和礦化。骨不斷地進(jìn)行著重建，骨重建過(guò)程包括破骨細(xì)胞貼附在舊骨區(qū)域，分泌酸性物質(zhì)溶解礦物質(zhì)，分泌蛋白酶消化骨基質(zhì)，形成骨吸收陷窩；其后，成骨細(xì)胞移行至被吸收部位，分泌骨基質(zhì)，骨基質(zhì)礦化而形成新骨；破骨與成骨過(guò)程的平衡是維持正常骨量的關(guān)鍵。成骨細(xì)胞培養(yǎng)不僅有助于了解骨形成機(jī)制、骨骼系統(tǒng)疾病的分子和細(xì)胞學(xué)基礎(chǔ)，也是藥物篩選、生物材料開發(fā)和生物工程研究的重要手段。

方法簡(jiǎn)介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的豬成骨經(jīng)ALP染色檢測(cè)，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

質(zhì)量檢測(cè)：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的豬成骨采用先用短時(shí)間消化、后用膠原酶反復(fù)消化制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶。

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 梭形、多角形

傳代特性 可傳3代左右

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

原代細(xì)胞一般傳至10代左右，大部分細(xì)胞衰老死亡，但是有極少數(shù)的細(xì)胞能夠度過(guò)“危機(jī)"而繼續(xù)傳下去，存活的細(xì)胞一般能夠傳到40-50代，叫細(xì)胞株。當(dāng)50代以后又會(huì)出現(xiàn)“危機(jī)"，這時(shí)有部分細(xì)胞的遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變且?guī)в邪┳兊奶攸c(diǎn)，從而可能無(wú)限制地傳代下去，稱為細(xì)胞系。

也有認(rèn)為細(xì)胞系指原代細(xì)胞培養(yǎng)物經(jīng)傳代成功后所繁殖的細(xì)胞群體。也指可長(zhǎng)期連續(xù)傳代的培養(yǎng)細(xì)胞。由此便引申出了后來(lái)的有限細(xì)胞系、無(wú)限細(xì)胞系，因此，細(xì)胞系狹義的是指可連續(xù)傳代的細(xì)胞，廣義是指可傳代的細(xì)胞。而細(xì)胞株是通過(guò)選擇法或克隆形成法，從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志物的單一細(xì)胞稱為細(xì)胞株。

細(xì)胞系具有容易培養(yǎng)、種類多、價(jià)格便宜、無(wú)限傳代等優(yōu)點(diǎn)，也非常容易在培養(yǎng)、凍存中發(fā)生錯(cuò)誤鑒定及交叉污染的問(wèn)題。

公司正在銷售的產(chǎn)品：

小鼠黃體生成素釋放激素(LHRH)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human neural cell adhesion molecule ligand 1 (NCAM-L1/CD171) ELISA Kit 人神經(jīng)細(xì)胞粘附分子配體1(NCAM-L1/CD171)ELISA試劑盒

humanfollicle-stimulatinghormone,FSHELISAKit 人促卵泡素(FSH)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humanaimousaibody,HAMAELISA人抗鼠抗體(HAMA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物葡萄糖0酸變位酶(phosphoglucomase;PGM)電泳分析試劑盒5次

Humanurokinaseplasminogenactivator,uPAELISAKit人型纖溶酶原激活物(uPA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠白介素-17   英文名稱：    ierleukin-17   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   IL-17

小鼠白介素-18   英文名稱：    ierleukin-18   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   IL-18

小鼠白介素-23   英文名稱：    ierleukin-23   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   IL-23

小鼠白介素-27   英文名稱：   ierleukin-27   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   IL-27

大鼠D-乳酸脫氫酶(D-LDH)ELISA試劑盒 ，英文名： D-LDH ELISA Kit

Mouse ierferon induced protein 10 (IP-10/CXCL10) ELISA Kit 小鼠干擾素誘導(dǎo)蛋白10(IP-10/CXCL10)ELISA試劑盒

ELISA 小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子C(mouse VEGF-C) 48T/96T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforIAAELISAKit大鼠胰島素自身抗體規(guī)格：48T/96T

通用型微型RNA(miRNA)擴(kuò)增試劑盒20次

ELISAKitAQP-1大鼠水通道蛋白1規(guī)格：48T/96T

ICAM3重組人 CD50 / ICAM-3 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein

生長(zhǎng)激素受體(GHR)重組蛋白 Recombinant Growth Hormone Receptor (GHR)

CD177重組人 CD177 / PRV-1 / PRV1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

ERBB3 Protein Human 重組人 HER3 / ErbB3 蛋白 (His 標(biāo)簽)

HA Protein Influenza B 重組乙型流感 (B/Malaysia/2506/2004) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 標(biāo)簽)

豬成骨細(xì)胞生長(zhǎng)激素受體(GHR)重組蛋白 Recombinant Growth Hormone Receptor (GHR)

ERBB3 Protein Human 重組人 HER3 / ErbB3 蛋白 (His 標(biāo)簽)

ICAM3重組人 CD50 / ICAM-3 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein

HA Protein Influenza B 重組乙型流感 (B/Malaysia/2506/2004) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 標(biāo)簽)

CD177重組人 CD177 / PRV-1 / PRV1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

原代細(xì)胞培養(yǎng)的具體步驟：

1、準(zhǔn)備：取各種已消毒的培養(yǎng)用品置于凈化臺(tái)面，紫外線消毒20分鐘。開始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。

2、布局：點(diǎn)燃酒精燈，安裝吸管帽。

3、處理組織：把組織塊置于燒杯中，用Hanks液漂洗2-3次，去除血污；如懷疑組織可能污染，可先置于含有青的混合液中30-60分鐘。

5、消化：或用恒溫水浴，或置于37℃溫箱消化均可，消化中每隔20分鐘應(yīng)搖動(dòng)一次，如用電磁恒溫?cái)嚢杵飨?。消化時(shí)間依組織塊的大小和組織的硬度而定。

6、分離：在消化過(guò)程中見(jiàn)消化液發(fā)混濁時(shí)，可用吸管吸出少許消化液在鏡下觀察，如組織已分散成細(xì)胞團(tuán)或單個(gè)細(xì)胞，立即終止消化，隨即通過(guò)適宜不銹鋼篩，濾掉尚未充分消化開的組織塊。低速（500-1000轉(zhuǎn)/分）離心消化液5分鐘，吸出上清，加入適量含有血清的培養(yǎng)液。

7、計(jì)數(shù)：用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)，如細(xì)胞懸液細(xì)胞密度過(guò)大，再補(bǔ)加培養(yǎng)液調(diào)整后，分裝入培養(yǎng)瓶中。對(duì)大多數(shù)細(xì)胞來(lái)說(shuō)，pH要求在7.2-7.4范圍，培養(yǎng)液呈微紅色，如顏色偏黃，說(shuō)明液體變酸，可用NaHCO3調(diào)整。

8、培養(yǎng)：置于37℃溫箱培養(yǎng)，如用CO2溫箱培養(yǎng)，瓶口需用紗布棉塞或螺旋帽堵塞，紗布塞易生霉菌，每次換液時(shí)需要換新塞。