中文乱码人妻一区二区三区在线-国产亚洲美女精品一区-欧美性情大片一区二区-中文有码在线观看免费

上海仁捷生物科技有限公司

總*(TC)ELISA試劑盒操作技巧(大鼠)

時間:2018-3-6閱讀:288
分享:

大鼠總*(TC)ELISA試劑盒僅供研究使用

 

大鼠總*(TC)ELISA試劑盒實驗目的

本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織、細胞上清及相關液體樣本中大鼠總*(TC)的含量。

有效期:6個月

保存條件:2-8℃

 

 

 

實驗原理

試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被大鼠總*(TC)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的大鼠總*(TC)呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。

 

 

 

大鼠總*(TC)ELISA試劑盒組成

試劑盒組成96孔配置48孔配置備注
微孔酶標板8孔×12條8孔×6條 無
標準品0.3mL×6管0.3mL×6管
*6mL3mL
檢測抗體-HRP10mL5mL
20×洗滌緩沖液25mL15mL按說明書進行稀釋
底物A6mL3mL
底物B6mL3mL
終止液6mL3mL
封板膜2張2張
說明書1份1份
自封袋1個1個

備注:

1. 標準品濃度依次為:8、4、2、1、0.5、0 mmol/L

2. 經過大量正常標本檢驗,標本的正常濃度值均在試劑盒提供的檢測范圍內,實驗過程中直接取50μL樣本上樣即可。當有部分樣本值超過zui大標準品濃度時,可用*將標本進行適當稀釋后再進行實驗。

 

 

 

樣本處理及要求

1. 血清:全血標本請于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000g離心20分鐘,取上清即可檢測,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。

2. 血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標本采集后30分鐘內于2 - 8°C 1000g離心20分鐘,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。

3. 細胞培養(yǎng)物上清或其它生物標本:1000g離心20分鐘,取上清即可檢測,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。

注:標本溶血會影響zui后檢測結果,因此溶血標本不宜進行此項檢測。

 

 

 

需要而未提供的試劑和器材

1. 酶標儀(450nm)

2. 高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

3. 37℃恒溫箱

4. 蒸餾水或去離子水

 

 

 

試劑準備

試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡后方可使用。

20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1:20稀釋,即1份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水。

 

 

 

操作步驟

1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。

2. 設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;

3. 樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。

4. 除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。

6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

7. 每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值。

 

 

 

注意事項

1. 嚴格按照規(guī)定的時間和溫度進行溫育以保證準確結果。所有試劑都必須在使用前達到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。

2. 洗板不正確可以導致不準確的結果。在加入底物前確保盡量吸干孔內液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉。

3. 消除板底殘留的液體和手指印,否則影響OD值。

4. 底物顯色液應呈無色或很淺的顏色,已經變藍的底物液不能使用。

5. 避免試劑和標本的交叉污染以免造成錯誤結果。

6. 在儲存和溫育時避免強光直接照射。

7. 平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。

8. 任何反應試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強烈氣體。任何漂白成分都會破壞試劑盒中反應試劑的生物活性。

9. 不能使用過期產品。

10. 如果可能傳播疾病,所有的樣品都應管理好,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置。

 

 

 

洗板方法

手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標板內的液體;在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙,酶標板朝下用力拍幾次;將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。根據(jù)需要,重復此過程數(shù)次。

自動洗板:如果有自動洗板機,應在熟練使用后再用到正式實驗過程中。

 

 

 

實驗結果計算

以所測標準品的OD值為橫坐標,標準品的濃度值為縱坐標,在坐標紙上或用相關軟件繪制標準曲線,并得到直線回歸方程,將樣品的OD值代入方程,計算出樣品的濃度。

(此圖僅供參考)

 

 

 

大鼠總*(TC)ELISA試劑盒性能

1. 檢測范圍:0.25 mmol/L – 8 mmol/L。

2. 靈敏度:zui低檢測濃度小于0.1 mmol/L。

3. 特異性:不與其它可溶性結構類似物交叉反應。

4. 重復性:板內變異系數(shù)小于10% ,板間變異系數(shù)小于15% 。

會員登錄

×

請輸入賬號

請輸入密碼

=

請輸驗證碼

收藏該商鋪

X
該信息已收藏!
標簽:
保存成功

(空格分隔,最多3個,單個標簽最多10個字符)

常用:

提示

X
您的留言已提交成功!我們將在第一時間回復您~

以上信息由企業(yè)自行提供,信息內容的真實性、準確性和合法性由相關企業(yè)負責,環(huán)保在線對此不承擔任何保證責任。

溫馨提示:為規(guī)避購買風險,建議您在購買產品前務必確認供應商資質及產品質量。

在線留言
欧美日韩国产欧美日韩| 国产又粗又长又大高潮视频| 亚洲黑人精品一区二区欧美| 中文字幕人妻日本一区二区 | 国产二级一级内射视频播放| 国产视频在线一区二区| 女生更色还是男生更色| 国产专区亚洲专区久久| 亚洲精品有码中文字幕在线观看 | 国产丝袜极品黑色高跟鞋| 日本加勒比在线观看不卡| 精品人妻久久一品二品三品| 日本加勒比不卡二三四区| 欧美日韩一区二区综合| 大香蕉久草网一区二区三区 | 91在线播放在线播放观看| 99久久国产精品免费| 国产av一二三区在线观看| 国产乱人伦精品一区二区三区四区| 日韩精品免费一区三区| 国产欧美日韩不卡在线视频| 久久免费精品拍拍一区二区| 午夜福利精品视频视频| 中文字幕av诱惑一区二区| 欧美韩国日本精品在线| 久久人妻人人澡人人妻| 激情中文字幕在线观看| 国产精品日韩欧美第一页| 五月婷日韩中文字幕四虎| 日韩欧美在线看一卡一卡| 男人和女人干逼的视频| 玩弄人妻少妇一区二区桃花| 国产老熟女乱子人伦视频| 亚洲熟女诱惑一区二区| 欧美成人精品一区二区久久| 97精品人妻一区二区三区麻豆 | 日本精品视频一二三区| 精产国品一二三区麻豆| 黄色av尤物白丝在线播放网址| 日本理论片午夜在线观看| 亚洲精品高清国产一线久久|