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尾側(cè)型同源轉(zhuǎn)錄因子1抗體,Anti-CDX1抗體簡(jiǎn)單介紹:
【中文名稱】:尾側(cè)型同源轉(zhuǎn)錄因子1抗體
【英文名稱】:Anti-CDX1抗體
【別 名】:Caudal type homeo box transcription factor 1; Caudal type homeobox 1; Caudal type homeobox protein; Caudal type homeobox protein CDX1; Caudal type homeobox transcription factor 1; Caudal-type homeobox protein 1; CDX1; CDX1_HUMAN; Homeobox protein CDX 1; Homeobox protein CDX-1.
【規(guī) 格】:0.1ml/0.2ml
【相關(guān)標(biāo)記】:Alexa Fluor 350、Alexa Fluor 488、Alexa Fluor 555、Alexa Fluor 647、AP、APC、Biotin、Cy3、Cy5、Cy5.5、Cy7、FITC、Gold、HRP、PE、PE-Cy3、PE-CY5、PE-CY5.5、PE-CY7、RBITC.
【濃 度】:1mg/1ml
【抗體來(lái)源】:Rabbit or Mouse or Goat
【克隆類型】:polyclonal or monoclonal
【產(chǎn)品類型】:一抗
【產(chǎn)品應(yīng)用】:可以用于做石蠟切片免疫組化,冰凍切片免疫組化,Elisa,WB,免疫熒光、流式細(xì)胞術(shù)等實(shí)驗(yàn)。
尾側(cè)型同源轉(zhuǎn)錄因子1抗體背景介紹:
有關(guān)免疫組化實(shí)驗(yàn)的重要問(wèn)題:
(一)組織材料處理
1.取材要取新鮮組織,大小合適,用生li鹽水洗凈
2.固定固定就是把病理標(biāo)本組織浸泡在固定液中(常用的有4%多聚甲醛),使組織或細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)凝聚、沉淀或變性成為不溶性物質(zhì),并保持細(xì)胞原有的形態(tài)結(jié)構(gòu)
3.洗滌固定后一定要把滲透到組織里面的固定液洗去,以利于進(jìn)行脫水,若組織中留有較多的固定液,則將影響脫水劑,甚至可在組織中發(fā)生沉淀而影響后續(xù)染色及觀察,對(duì)于陳舊性標(biāo)本或固定時(shí)間過(guò)長(zhǎng)的標(biāo)本,更應(yīng)注意流水沖洗。
4.脫水脫水必須*,若脫水不盡,則切片后組織與空氣接觸即干燥收縮,蠟塊切面出現(xiàn)凹陷現(xiàn)象,雖可勉強(qiáng)切片,但染色效果差,染色時(shí)也容易脫落
5.透明乙醇等脫水劑不能溶解石蠟,所以浸蠟之前需要一個(gè)既能與乙醇混合又能溶解石蠟的媒劑,以便使石蠟浸入到組織中去,當(dāng)組織中全部被透明劑占有時(shí),光線可以透過(guò),組織可呈現(xiàn)不同程度的透明狀態(tài),此現(xiàn)象稱為透明。如果組織不能透明,表明脫水未盡必須重新返工,否則影響到浸蠟的進(jìn)行,但返工時(shí)往往效果不好
6.浸蠟浸蠟時(shí)間根據(jù)組織的類型可適當(dāng)調(diào)整,一般原則較小組織脫水時(shí)間和浸蠟時(shí)間較短;骨、肌肉等堅(jiān)硬組織脫水和浸蠟時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng);脂肪組織、疏松結(jié)締組織脫水和浸蠟時(shí)間需增加
7.包埋包埋時(shí)應(yīng)注意組織的包埋方向,否則將影響組織切片的形態(tài)。包埋用的石蠟要和浸蠟用的石蠟熔點(diǎn)*,包埋用的石蠟溫度要稍高于浸蠟的溫度。包埋好后可置于冷水中使石蠟迅速冷凝。包埋好的石蠟塊應(yīng)呈均勻的半透明狀,如出現(xiàn)白色渾濁則其中存在石蠟的結(jié)晶,這種蠟塊不能切除薄的切片??赡苁墙M織脫水不充分,組織內(nèi)或石蠟中混有透明劑,或包埋時(shí)動(dòng)作太慢或石蠟?zāi)烫拢岳鋮s時(shí)水溫不能過(guò)高,否則就不宜迅速凝固
8.切片可以將制作好的蠟塊置于低溫環(huán)境預(yù)冷,切出的切片連續(xù)性較好,有利于展片,一般切片厚度4-6um
尾側(cè)型同源轉(zhuǎn)錄因子1抗體,Anti-CDX1抗體抗原修復(fù),必須注意以下問(wèn)題:
1、修復(fù)液的選擇。
0.01M枸櫞酸(pH6.0):應(yīng)用zui多的抗原修復(fù)液,適用于大多數(shù)的抗原,用該液修復(fù)后的抗原表達(dá)增強(qiáng),抗原的定性和定位很理想,結(jié)果不錯(cuò);
0.05M EDTA(pH8.0):應(yīng)用較多的抗原修復(fù)液,修復(fù)能力較強(qiáng),對(duì)于保存時(shí)間較長(zhǎng)的切片或目的蛋白表達(dá)較弱的組織有很好的修復(fù)效果,需要控制好修復(fù)時(shí)間,否則容易出現(xiàn)較重的背景;
0.01M TBS(pH7.4):中性修復(fù)液,適用于大多數(shù)抗原,對(duì)于核定位蛋白有較好的修復(fù)效果;
*:應(yīng)用較多的抗原修復(fù)液,適用于大多數(shù)的抗原,使用溫度37℃,對(duì)于容易脫片的切片有很好的保護(hù)作用。
*:應(yīng)用較多的抗原修復(fù)液,適用于大多數(shù)的抗原
2.抗原熱修復(fù)時(shí)應(yīng)選擇的溫度。
據(jù)實(shí)驗(yàn)認(rèn)為溫度在92℃-98℃是合適的,尤其在95℃為,這是因?yàn)椋海?)這種溫度未達(dá)沸騰,切片不容易脫離載玻片;(2)能夠解離和破壞與蛋白交聯(lián)的甲醛醛鍵等,處理時(shí)可以隨意選擇和確定抗原修復(fù)的作用時(shí)間。如果選擇高壓修復(fù),因?yàn)闇囟容^高,時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)
3.抗原修復(fù)時(shí)有效溫度所需持續(xù)時(shí)間根據(jù)各單位的設(shè)備條件以及使用的儀器不同,抗原修復(fù)時(shí)在有效的溫度范圍內(nèi)所持續(xù)的時(shí)間也不一樣。
4.抗原修復(fù)液必須遵循自然降溫規(guī)律,否則效果不好或達(dá)不到抗原修復(fù)的目的。
5.盡量使用足量的抗原修復(fù)液,防止切片干涸。
6.切片必須附貼牢固,否則發(fā)生掉片。
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