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更新時(shí)間:2024-03-27 21:02:42瀏覽次數(shù):3042次

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藥物MTT法實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):

(1) 選擇適當(dāng)?shù)眉?xì)胞接種濃度。

(2) 避免血清干擾:一般選小于10%的胎牛血清的培養(yǎng)液進(jìn)行試驗(yàn)。在呈色后盡量吸盡孔內(nèi)殘余培養(yǎng)液。

(3) 設(shè)空白對(duì)照:與試驗(yàn)平行不加細(xì)胞只加培養(yǎng)液的空白對(duì)照。其他試驗(yàn)步驟保持*,zui后比色以空白調(diào)零。

(4) MTT實(shí)驗(yàn)吸光度zui后要在0-0.7之間,超出這個(gè)范圍就不是直線關(guān)系。

(5) 用96孔板培養(yǎng)細(xì)胞做MTT測(cè)細(xì)胞活力,應(yīng)該加多少1640培養(yǎng)基,多少M(fèi)TT和DMSO合適根據(jù)書上說(shuō)的加200ul1640,20ulMTT,150ulDMSO 加DMSO之前要盡量去掉培養(yǎng)液,便于DMSO溶解甲臜顆粒進(jìn)行比色測(cè)定

(6) 一般每孔4000個(gè)細(xì)胞為宜,既細(xì)胞濃度在20000個(gè)/ml,MTT加20ul,作用四小時(shí)后洗掉上清液,注意不要將甲瓉洗掉,然后每孔加150ul DMSO,在脫色搖床上振蕩10分鐘,然后測(cè)吸光值。

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人成巨核細(xì)胞白血病細(xì)胞,MEG-01

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