產(chǎn)品名稱:HCT8/VCR人結(jié)腸癌長春新堿耐藥株
規(guī)格:70%密度的25cm2培養(yǎng)瓶的細胞一瓶
特點:細胞代數(shù)為4代以內(nèi),細胞耐藥倍數(shù)8倍以上;
包裝:內(nèi)層無菌自封袋;防壓泡沫盒;外層防壓保溫氣泡袋;說明書
細胞來源:ATCC、sciencell、ICLC
貨期:1-2周
運輸方式:快遞運輸
售后:收到細胞后12天,如發(fā)現(xiàn)細胞有質(zhì)量問題(如污染,死亡,快遞運輸?shù)仍颍r,應(yīng)出具書面質(zhì)量問題報告并及時通知銷售人員,我們將盡快為您解決!
注:耐藥細胞培養(yǎng)操作流程和普通細胞培養(yǎng)方法基本*,只是在培養(yǎng)中會加藥維持篩選壓力
收到細胞后應(yīng)如何去正確的處理:
您需要準(zhǔn)備好細胞所要用到的培養(yǎng)基和相關(guān)試劑,雖然所有的貼壁,半貼壁或者懸浮細胞處理方式差不多,但是不同的實驗室培養(yǎng)條件和處理力度還有試劑的批間差這些問題存在,也會導(dǎo)致對細胞處理不當(dāng),或者環(huán)境的不適應(yīng)而造成細胞的死亡。
1.收到細胞,*時間要鏡檢:觀察細胞形態(tài)是否正常,對于貼壁細胞則要注意看貼壁情況是否很好,觀察細胞密度,有疑議及時咨提供細胞的技術(shù)人員。由于運輸?shù)臅r間或者溫度的變化,很多貼壁細胞在盛滿培養(yǎng)基的瓶子里生長的狀態(tài)和平時會有點不一樣,主要是貼壁牢固問題。比如293T,平時貼壁就不是很牢,在裝滿的培養(yǎng)基瓶子里面,會發(fā)生大片的脫落,細胞聚集在一起,但是細胞生長還是正常的,通過離心收集,加以*的消化,重新打散,又可以正常的貼壁生長。
2.當(dāng)通過上一步的觀察,細胞初步?jīng)]有任何問題時,進行下一步操作。當(dāng)收到的細胞密達到80%左右時,則處理如下:棄除瓶中大部分培養(yǎng)基,僅保留5到10mL培養(yǎng)所需的常規(guī)培養(yǎng)基;或更換新鮮的培養(yǎng)基,置于培養(yǎng)箱中,隨后每天觀察。細胞在低于正常生長溫度情況下,會調(diào)整為靜止期,或者慢速生*,必須恢復(fù)37度的環(huán)境至少3個小時左右,才能重新調(diào)整到接近對數(shù)生*的狀態(tài),在對數(shù)生*進行細胞的傳代會大大增加傳代的成功率,和細胞的存活率。
3.如果經(jīng)*步觀察發(fā)現(xiàn)細胞密度超過90%,并且細胞狀態(tài)很好時,則復(fù)溫后2個小時需要立即傳代。傳代的比例應(yīng)依據(jù)不同的細胞而定。對于生長比較快,狀態(tài)穩(wěn)定,不易受外界影響的細胞可以一次多傳幾瓶;對于生長較慢,細胞比較薄,狀態(tài)容易波動的細胞類型,一次少傳些,保證每瓶細胞密度大些,便于穩(wěn)定生長。至于一些比較陌生的細胞,*次處理也可以依照第二種情況。
HCT8/VCR人結(jié)腸癌長春新堿耐藥株