產(chǎn)品說明

亞鐵血紅素是卟啉家族中的重要成員，既可用來合成線粒體和細(xì)胞質(zhì), 也是血紅蛋白、細(xì)胞色素、過氧化氫酶和過氧化物酶等蛋白質(zhì)的關(guān)鍵輔基。亞鐵血紅素被廣泛的應(yīng)用于各種血液疾病的檢測(cè)中。

在科研和藥物研發(fā)中，方便、直接、自動(dòng)化的亞鐵血紅素濃度檢測(cè)手段是zui為理想的。本公司研制的亞鐵血紅素檢測(cè)試劑盒是基于改良的曲通堿性溶液法。通過這種方法，亞鐵血紅素可被轉(zhuǎn)化為有色物質(zhì)，在波長(zhǎng)為400 nm下檢測(cè)，其顏色深淺程度與亞鐵血紅素的含量成正比。通過配方的改良，充分減小了未處理的樣品中其他雜質(zhì)的干擾，同時(shí)也提高了靈敏度。

產(chǎn)品用途

1．直接檢測(cè)血清、血漿、尿液和亞鐵血紅素酶中的亞鐵血紅素含量。

2．適用于藥理學(xué)研究，檢測(cè)藥物對(duì)亞鐵血紅素代謝的影響。

3．適用于新藥開發(fā)，高通量篩選影響亞鐵血紅素含量的藥物。

產(chǎn)品特點(diǎn)

靈敏、準(zhǔn)確：在96孔板中測(cè)試，亞鐵血紅素的線性測(cè)試范圍在0.6 μM 到125 μM之間。

簡(jiǎn)單、高通量：整個(gè)測(cè)試過程只需加入一種工作試劑并讀取吸光度。利用96孔板的高通量檢測(cè)手段，每天可以測(cè)試上千份樣本。

安全：試劑無毒性。

多功能性：檢測(cè)可以在96孔板或比色皿中進(jìn)行。

試劑盒規(guī)格(采用96孔板可測(cè)試250份樣本)

   試劑：50 mL

   校準(zhǔn)液：10 mL（相當(dāng)于62.5 μM 亞鐵血紅素）

儲(chǔ)藏條件：可在室溫下運(yùn)輸。試劑在4°C環(huán)境下保存。

預(yù)防措施：本產(chǎn)品僅供研究用。使用過程中應(yīng)嚴(yán)格遵循實(shí)驗(yàn)安全措施。

96孔板測(cè)試步驟

1. 空白對(duì)照和校準(zhǔn)品：取透明平底96孔板，將50 μL的水（空白對(duì)照）和50 μL的校準(zhǔn)品放入不同孔中，并在其中各加200 μL水，稀釋的校準(zhǔn)品相當(dāng)于62.5 μM亞鐵血紅素。

2. 樣品：血清和血漿樣品可以直接用于檢測(cè)（n = 1），全血液樣品應(yīng)先用蒸餾水稀釋100倍（n = 100）， 攪蕩， 在1,4000 rpm 下離心5 分鐘，取上清夜測(cè)定。

將50 μL樣品放入孔中 (注意：在吸取時(shí)避免氣泡產(chǎn)生)。在樣品孔中加入200 μL試劑，輕敲使其混合。

3．室溫下反應(yīng)5分鐘，在400nm處（波長(zhǎng)范圍 380-420nm）讀取吸光度。

比色皿測(cè)試步驟

1．將100 μL樣本和1000μL的試劑放入比色皿中，輕敲使其混合，在400nm的波長(zhǎng)下讀取吸光度。

2．在比色皿中加入100μL校準(zhǔn)品和1000μL水。在400nm的波長(zhǎng)下讀取吸光度。

濃度計(jì)算

樣本中亞鐵血紅素的濃度計(jì)算如下：

OD樣本, OD校準(zhǔn)品和 OD空白分別是樣本、校準(zhǔn)品和空白對(duì)照的吸光度。n 是稀釋因數(shù)（血液樣本的稀釋因數(shù)是100）。

單位換算:  1 mg/dL 的亞鐵血紅素相當(dāng)于15.3 μM， 0.001% 或 10 ppm。

實(shí)驗(yàn)必需品（未提供）

吸液用儀器及其附件。采用96孔板測(cè)試：透明平底96孔板、微孔板分析儀；采用比色皿測(cè)試：比色皿、分光光度儀。

       96孔板測(cè)試標(biāo)準(zhǔn)曲線

論文發(fā)表

[1]. Mingone, C.J. et al (2006).  Protoporphyrin IX generation from delta-aminolevulinic acid elicits pulmonary artery relaxation and soluble guanylate cyclase activation. Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol 291: L337–L344.

[2]. Pamplona, A. et al (2007). Heme oxygenase-1 and carbon monoxide suppress the pathogenesis of experimental cerebral malaria. Nature Med. 13(6): 703-710.

[3]. Raghuram, S. et al (2007). Identification of heme as the ligand for the orphan nuclear receptors REV-ERBb and REV-ERBb. Nat Struct Mol Biol. 14(12):1207-13.