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試劑盒檢測(cè)中血清采集及保存
血清采集及保存:全血標(biāo)本請(qǐng)于室溫放置2小時(shí)或 4℃過夜后于1000 x g 離心 20分鐘,取上清即可檢測(cè),或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
血漿采集及保存:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標(biāo)本采集后 30分鐘內(nèi)于2 - 8° C 1000 x g 離心 15分鐘,或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本采集及保存:請(qǐng) 1000 x g 離心20分鐘,取上清即可檢測(cè),或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
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注:標(biāo)本置4℃保存應(yīng)小于 1周, -20℃或-80℃均應(yīng)密封保存, -20℃不應(yīng)超過 1個(gè)月, -80℃不應(yīng)超過 2個(gè)月;標(biāo)本溶血會(huì)影響zui后檢測(cè)結(jié)果,因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項(xiàng)檢測(cè)。
實(shí)驗(yàn)開始注意事項(xiàng):各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在 37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過高時(shí),應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。 (參照說明書)
加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。空白孔加樣品稀釋液 100μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品 100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液 A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制) ,酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板 3次,每次浸泡 1-2分鐘,大約 400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干) 。 (參照說明書)
試劑準(zhǔn)備:所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫,使用后請(qǐng)立即按照說明書要求保存試劑.實(shí)驗(yàn)操作中請(qǐng)使用一次性的吸頭,避免交叉污染。
加樣:加樣或加試劑時(shí),請(qǐng)注意在吸取標(biāo)本/標(biāo)準(zhǔn)品,酶結(jié)合物或底物時(shí),*個(gè)孔與zui后一個(gè)孔加樣之間的時(shí)間間隔如果太大,將會(huì)導(dǎo)致不同的“預(yù)孵”時(shí)間,從而明顯地影響到測(cè)量值的準(zhǔn)確性及重復(fù)性。一次加樣時(shí)間(包括標(biāo)準(zhǔn)品及所有樣品)控制在 10分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用多道移液器加樣。 (參照說明書)
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