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廈門慧嘉生物科技有限公司
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更新時(shí)間:2018-04-04 03:14:05瀏覽次數(shù):638次
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廈門慧嘉生物*經(jīng)營(yíng)人抗弓形體IgM抗體(anti-tox IgM)ELISA試劑盒。誠(chéng)信經(jīng)營(yíng),價(jià)格實(shí)惠,服務(wù)周到,質(zhì)量有保證。歡迎廣告老師來(lái)詢!: :
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產(chǎn)品名稱: 人抗弓形體IgM抗體(anti-tox IgM)ELISA Kit
產(chǎn)品英文: Human anti-toxoplasma IgM antibody,anti-tox IgM ELISA Kit
產(chǎn)品規(guī)格: 96T
產(chǎn)品類別: 人肝炎類ELISA試劑盒[Human hepatitis ELISA Kit]
人抗弓形體IgM抗體(anti-tox IgM)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說(shuō)明書
本試劑盒僅供研究使用
特異性:本試劑盒可檢測(cè)人anti-tox IgM,且與其他相關(guān)抗體無(wú)交叉反應(yīng)。
有效期:6個(gè)月
預(yù)期應(yīng)用:ELISA法定量測(cè)定人血清、血漿或其它相關(guān)生物液體中anti-tox IgM含量。
說(shuō)明
1.試劑盒保存:-20℃(較長(zhǎng)時(shí)間不用時(shí));2-8℃(頻繁使用時(shí))。
2.濃洗滌液低溫保存會(huì)有鹽析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶。
3.中、英文說(shuō)明書可能會(huì)有不*之處,請(qǐng)以英文說(shuō)明書為準(zhǔn)。
4.剛開啟的酶聯(lián)板孔中可能會(huì)含有少許水樣物質(zhì),此為正?,F(xiàn)象,不會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成任何影響。
試劑盒組成及試劑配制
1. 酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔)。
2. 酶結(jié)合物(Conjugate):2×6 ml/瓶。
3. 樣品稀釋液(Sample Diluent):2×6 ml/瓶。
4. 陽(yáng)性對(duì)照(Positive Control):1×0.5ml/瓶。
5. 陰性對(duì)照(Negative Control):1×0.5ml/瓶。
6. 底物溶液A(Substrate A):1×7 ml/瓶。
7. 底物溶液B(Substrate B):1×7 ml/瓶。
8. 濃洗滌液(Wash Buffer):1×15ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋20倍。
9. 終止液(Stop Solution):1×7ml/瓶。
需要而未提供的試劑和器材
1. 標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀
2. 高速離心機(jī)
3. 電熱恒溫培養(yǎng)箱
4. 干凈的試管和Eppendof管
5. 系列可調(diào)節(jié)移液器及吸頭,一次檢測(cè)樣品較多時(shí),用多通道移液器
6. 蒸餾水,容量瓶等
標(biāo)本的采集及保存
1. 血清:全血標(biāo)本請(qǐng)于室溫放置2小時(shí)或室溫過夜后于1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測(cè),或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2. 血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘,或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
操作步驟
實(shí)驗(yàn)開始前,請(qǐng)?zhí)崆芭渲煤盟性噭?,試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。如樣品濃度過高時(shí),用樣品稀釋液進(jìn)行稀釋,以使樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔,不加任何溶液;設(shè)陰性對(duì)照孔2孔,加陰性對(duì)照100μl;設(shè)陽(yáng)性對(duì)照孔2孔,加陽(yáng)性對(duì)照100μl;余孔加100μl*,然后直接加待測(cè)樣本5μl。注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃放置30分鐘。
2. 棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,200μl/每孔,甩干。
3. 每孔加酶結(jié)合物100μl(空白孔除外),充分混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃放置20分鐘。
4. 棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,200μl/每孔,甩干。
5. 依序每孔加底物溶液A和B各50μl,37℃避光顯色10分鐘。
6. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
7. 用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度(OD值)。 在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。
注:
1. 用戶在初次使用試劑盒時(shí),應(yīng)將各種試劑管離心數(shù)分鐘,以便試劑集中到管底。
2. 每次實(shí)驗(yàn)留一孔作為空白調(diào)零孔,該孔不加任何試劑,只是zui后加底物溶液及2N H2SO4。測(cè)量時(shí)先用此孔調(diào)OD值至零。
3. 為防止樣品蒸發(fā),試驗(yàn)時(shí)將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi),酶標(biāo)板加上蓋或覆膜。
4. 未使用完的酶標(biāo)板或者試劑,請(qǐng)于2-8℃保存。
5. 建議檢測(cè)樣品時(shí)均設(shè)雙孔測(cè)定,以保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。
洗板方法
手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體;在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上鋪墊幾層吸水紙,酶標(biāo)板朝下用力拍幾次;將*的洗滌緩沖液至少0.3ml注入孔內(nèi),浸泡1-2分鐘。根據(jù)需要,重復(fù)此過程數(shù)次。
自動(dòng)洗板:如果有自動(dòng)洗板機(jī),應(yīng)在熟練使用后再用到正式實(shí)驗(yàn)過程中。
計(jì)算
1. 目測(cè)法:比臨界對(duì)照顯色深的樣本為陽(yáng)性,比臨界對(duì)照顯色相同或顯色淺的為陰性。
2. 酶標(biāo)儀測(cè)定:判斷值(OD值)=陰性對(duì)照平均OD值×2.1,樣品OD值大于判斷值為陽(yáng)性,小于等于為陰性。陰性對(duì)照平均OD值小于0.05時(shí),按0.05計(jì)算。
注意事項(xiàng)
1. 當(dāng)混合蛋白溶液時(shí)應(yīng)盡量輕緩,避免起泡。
2. 洗滌過程非常重要,不充分的洗滌易造成假陽(yáng)性。
3. 一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,*使用排槍加樣。
4. 如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高,請(qǐng)先稀釋后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)zui后乘以稀釋倍數(shù)。
5. 在配制檢測(cè)溶液工作液時(shí),請(qǐng)以相應(yīng)的稀釋液配制,不能混淆。
6. 底物請(qǐng)避光保存。
7. 不要用其它生產(chǎn)廠家的試劑替換試劑盒中的試劑。
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