植物超氧化物歧化酶(SOD)ELISA試劑盒
可逆性
抗原與抗體結(jié)合形成抗原抗體復合物的過程是一種動態(tài)平衡,其反應式為:
Ag+Ab→Ag·Ab
抗體的親和力(affinity)是抗原抗體間的固有結(jié)合力,可以用平衡常數(shù)K表示:
K=[Ag·Ab]/[Ag][Ab]
Ag·Ab的解離程度與K值有關。高親和力抗體的抗原結(jié)合點與抗原的決定簇在空間構(gòu)型上非常適合,兩者結(jié)合牢固,不易解離。解離后的抗原或抗體均能保持原有的結(jié)構(gòu)和活性,因此可用親和層析法來提純抗原或抗體。在抗血清中,特異性的IgG抗體僅占總IgG中的極小部分。用親和層析法提取的特異性抗體,稱為親和層析純抗體,應用于免疫測定中可得到更好的效果。
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樣本處理要求:
1.細胞培養(yǎng)物上清:
細胞培養(yǎng)物于室溫1000g,離心10分鐘后收集上清,并將標本保存于-20℃,且應避免反復凍融。
2.血清:
標本請于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000g,4℃離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)吮痉庞?20℃保存,但應避免反復凍融。
3.血漿:
可用EDTA或肝素作為抗凝劑標本采集后30分鐘內(nèi)于2-8℃,1000g離心15分鐘,或?qū)吮痉庞?20℃保存,但應避免反復凍融。
4.尿液:
無菌收集取初尿,離心除去沉淀物,即可用于檢測,要*保存尿樣,可以加入0.05%的NaN3在4-8℃保存,或加入尿樣冰凍保護液放入-20℃冰箱*保存。
5.組織勻漿:
將組織標本先用PBS洗滌,除去多余血液,勻漿化后放在PBS于-20℃放置過夜,再經(jīng)過二次反復凍融破膜,5000g,4℃離心5分鐘,取上清即可檢測。
注:取樣和樣品處理過程中,防止有毒物質(zhì)對操作人員的危害,要采取相應的保護措施。
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