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植物乙酰*羧化酶(ACC)ELISA Kit代測

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更新時間:2018-05-21 16:43:35瀏覽次數:579次

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北京方程生物公司中“方程"取自function 的音譯,寓意是把整個國家的生物產業(yè)比喻成了一部運轉的機器,方程生物公司作為其產業(yè)中的一分子的使命————為這個大機器提供原料、零件和服務,為科研領域的發(fā)展作出更多貢獻。

植物乙酰*羧化酶(ACC)ELISA Kit代測


用于檢測未知抗原的雙抗體夾心法: 
1. 包被:用0.05M PH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質含量為1~10μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反應孔中加0.1ml,4℃過夜。次日,棄去孔內溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡稱洗滌,下同)。 
2. 加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時。然后洗滌。(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。 
3. 加酶標抗體:于各反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標抗體(經滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃孵育0.5~1小時,洗滌。 
4. 加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分鐘。 
5. 終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml。 
6. 結果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據所呈顏色的深淺,以“+"、“-"號表示。也可測O·D值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調零后測各孔O·D值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。

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Elisa相關小常識: 

酶與底物   酶結合物是酶與抗體或抗原, 半抗原在交聯(lián)劑作用下聯(lián)結的產物。是ELISA成敗的關鍵試劑,它不僅具有抗體抗原特異的免疫反應,還具有酶促反應,顯示出生物放大作用,但不同的酶選用不同的底物。

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