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北京冬歌博業(yè)生物科技有限公司

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Peprotech品牌貨號(hào):210-33進(jìn)口原裝Murine IL-33細(xì)胞因子北京現(xiàn)貨

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  • 2018-04-29 14:27:28
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【簡(jiǎn)單介紹】

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細(xì)胞因子(cytokine)是免疫原、絲裂原或其他刺激劑誘導(dǎo)多種細(xì)胞產(chǎn)生的低分子量可溶性蛋白質(zhì),具有調(diào)節(jié)固有免疫[1]和適應(yīng)性免疫[2]、血細(xì)胞生成、細(xì)胞生長(zhǎng)以及損傷組織修復(fù)等多種功能。

【詳細(xì)說(shuō)明】

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重組細(xì)胞因子要求:

1. 真實(shí)性:重組蛋白產(chǎn)品*經(jīng)過(guò)N末端氨基酸序列分析;必要時(shí)應(yīng)用SDS-PAGE, RP-HPLC和質(zhì)譜(MS)檢測(cè)其真實(shí)性。

2. 純度:應(yīng)用SDS-PAGE和RP-HPLC方法分析產(chǎn)品純度。

3. 生物活性:進(jìn)行相應(yīng)的體外(in vitro)或體內(nèi)(in vivo)活性檢測(cè)。

4. 蛋白含量:通過(guò)紫外光譜分析,SDS-PAGE電泳檢測(cè);必要時(shí)應(yīng)用HPLC定量標(biāo)準(zhǔn)蛋白溶液。

5. 內(nèi)毒素:kinetic LAL法檢測(cè)內(nèi)毒素。

6. 微生物:重組蛋白在裝瓶之前都經(jīng)過(guò)濾除菌處理。

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有不少用戶沒(méi)注意說(shuō)明書上的描述,而是根據(jù)習(xí)慣,直接用PBS或培養(yǎng)液(1640或DMEM等)等溶解細(xì)胞因子或蛋白的凍干粉。這樣做可以嗎?
答:有時(shí)可以,要看具體情況。PeproTech的大多數(shù)細(xì)胞因子或蛋白凍干粉的溶解液不是PBS,此時(shí)千萬(wàn)不能用PBS或培養(yǎng)液直接來(lái)溶解,具體原因在上面已經(jīng)敘述過(guò)。而有部分細(xì)胞因子,如重組人KGF(產(chǎn)品編號(hào):100-19)和重組人FGF-23(產(chǎn)品編號(hào):100-52)等,說(shuō)明書上的溶解液即為1x PBS,此時(shí)用PBS溶解*沒(méi)問(wèn)題,那么用培養(yǎng)液溶解也是可以的,不過(guò)還是用先用PBS溶解,然后再用培養(yǎng)液稀釋。

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一定要溶解到的濃度。
蛋白在一定的濃度范圍內(nèi)可以保持良好的穩(wěn)定性,這個(gè)范圍就是說(shuō)明書上所標(biāo)明的濃度范圍,該例為0.1-1.0 mg/ml。這個(gè)濃度范圍對(duì)于不同的細(xì)胞因子或重組蛋白是不同的。如重組人FGF-6(產(chǎn)品編號(hào):100-30)為0.5-1.0mg/ml,而重組人Activin B(產(chǎn)品編號(hào):120-15)則一定要是0.5mg/ml。

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高于或低于該濃度范圍會(huì)有什么問(wèn)題呢?
答:首先,細(xì)胞因子或蛋白會(huì)不穩(wěn)定,即很容易出現(xiàn)活性下降的現(xiàn)象。其次,高于這個(gè)濃度范圍,可能會(huì)超過(guò)該蛋白的zui大溶解濃度,即蛋白無(wú)法*溶解。再者,高于或低于該濃度范圍,蛋白可能會(huì)出現(xiàn)聚集(aggregation),zui終結(jié)果還是部分蛋白未溶解,導(dǎo)致蛋白活性的減弱。一定不能振蕩(vortex)。這里所說(shuō)的振蕩是指用渦旋儀進(jìn)行快速振蕩。

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有用戶會(huì)問(wèn),若想保證溶解液與凍干粉充分混勻,以實(shí)現(xiàn)細(xì)胞因子或重組蛋白的*溶解,該怎么辦呢?
答:多數(shù)細(xì)胞因子或重組蛋白的凍干粉是非常容易溶解的,一般我們用移液槍的槍頭輕吹幾下,即可

100-19Human KGF
100-20Human VEGF
100-20AHuman VEGF 121
100-21Human TGF-beta1-Mammalian
100-21CHuman TGF-beta1-Produced in CHO
100-23Human FGF-9
100-25Human FGF-8
100-26Human FGF-10
100-27Human FGF-17
100-28Human FGF-18
100-29Human FGF-16
100-30Human FGF-6
100-31Human FGF-4
100-35Human TGF-beta2
100-39Human HGF
120-02Human BMP-2
120-03Human BMP-7/OP-1

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