隨著育種技術(shù)的發(fā)展, 越來(lái)越多的優(yōu)良品種為農(nóng)業(yè)高產(chǎn)、穩(wěn)產(chǎn)做出了重大貢獻(xiàn), 這些優(yōu)良品種深受廣大農(nóng)民的歡迎。近年來(lái), 一些不法分子單純追求經(jīng)濟(jì)利益大量銷(xiāo)售假冒偽劣種子, 致使農(nóng)業(yè)減產(chǎn)甚至絕收, 給國(guó)家和農(nóng)民造成了重大經(jīng)濟(jì)損失。因此, 研究一系列快速高效的種子檢驗(yàn)技術(shù)成為近年的一大研究熱點(diǎn)。近幾年來(lái), 隨著生化分析和分子生物學(xué)技術(shù)的迅速發(fā)展, 作物種子純度檢驗(yàn)方法已由外觀形態(tài)鑒定發(fā)展到生理生化水平和分子水平上的鑒定。
根據(jù)種子形狀、大小、色澤、質(zhì)地、表面的光與毛以及種子外表各部位的特征來(lái)加以鑒別, 以區(qū)分本品種與異品種。該法簡(jiǎn)單、經(jīng)濟(jì)、快速, 但準(zhǔn)確性較差, 且隨著現(xiàn)代育種科學(xué)的發(fā)展, 不同品種間種子外觀形態(tài)的差異越來(lái)越小, 因此靠區(qū)別種子形態(tài)上的差異來(lái)鑒定種子純度也變得越來(lái)越困難。該法是指利用電泳技術(shù)對(duì)備檢樣品的種子或幼苗的蛋白質(zhì)進(jìn)行分離、染色, 形成蛋白質(zhì)電泳譜帶的差異, 并與標(biāo)準(zhǔn)品種相比較, 從而鑒定品種的真實(shí)性和純度的一種方法。不同作物品種, 基因不同, 基因的直接表達(dá)產(chǎn)物———蛋白質(zhì)在種類(lèi)、數(shù)量、結(jié)構(gòu)等方面亦不同。
不同組織、不同發(fā)育時(shí)期, 同工酶的數(shù)量和組成不同。利用同工酶鑒定種子純度所用材料多為幼苗, 而將種子萌發(fā)為幼苗不光費(fèi)時(shí), 還往往因?yàn)榉N子在萌發(fā)進(jìn)程上的不*而導(dǎo)致檢驗(yàn)結(jié)果偏差較大。所用電泳技術(shù)包括聚丙烯酰胺凝膠電泳、淀粉膠電泳及等電聚焦電泳等。值得注意的是, 對(duì)于某些遺傳組成非常接近的品種, 如保持系和不育系, 不易找到特異蛋白, 采用蛋白質(zhì)電泳難以發(fā)現(xiàn)特征帶。另外, 蛋白質(zhì)電泳圖譜易受種子( 或幼苗) 發(fā)育階段及表達(dá)器官的影響, 有時(shí)不夠穩(wěn)定, 影響了圖譜分析, 從而影響了鑒定結(jié)果的準(zhǔn)確性。
并且在有些親緣關(guān)系較近的作物品種間如水稻中能檢測(cè)出的多態(tài)性位點(diǎn)較少, 這些缺點(diǎn)限制了該技術(shù)在作物種子純度檢驗(yàn)中的應(yīng)用。目前國(guó)內(nèi)外將該技術(shù)應(yīng)用于種子純度檢驗(yàn)方面的報(bào)道較少。種子純度檢驗(yàn)技術(shù)已由傳統(tǒng)的形態(tài)學(xué)方法發(fā)展到分子水平, 其方法是由簡(jiǎn)單到復(fù)雜, 結(jié)果也更加精確。每一種方法都有其自身的優(yōu)缺點(diǎn), 至今還沒(méi)有哪一種方法能夠比較全面、準(zhǔn)確、快速、經(jīng)濟(jì)地進(jìn)行種子純度檢驗(yàn)。與其他方法相比, DNA 分子標(biāo)記技術(shù)具有豐富的多態(tài)性, 準(zhǔn)確性高, 重復(fù)性好, 無(wú)器官發(fā)育時(shí)期的特異性, 不受環(huán)境影響, 但所需儀器精密,藥品昂貴, 程序復(fù)雜, 離普及和應(yīng)用尚有距離。因此,在進(jìn)行具體的種子純度檢測(cè)時(shí), 應(yīng)視具體情況靈活掌握, 將傳統(tǒng)的形態(tài)鑒定方法、現(xiàn)代生化方法和分子標(biāo)記技術(shù)結(jié)合起來(lái), 充分發(fā)揮綜合技術(shù)優(yōu)勢(shì), 方能達(dá)到準(zhǔn)確、經(jīng)濟(jì)、快速的目的。
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