北京諾博萊德科技有限公司供應(yīng)RNA病毒基因組提取試劑盒 NobleRyder R0903;現(xiàn)貨供應(yīng) RNA病毒基因組提取試劑盒 NobleRyder R0903量大優(yōu)惠,咨詢 : 1215878164
RNA/DNA病毒基因組提取試劑盒
試劑盒組成 | 50T | 100T | 保存溫度 |
蛋白酶K(10mg/ml) | 1ml | 2ml | -20℃ |
結(jié)合液 | 25ml | 50ml | RT |
漂洗液(RNase free) | 15ml | 15ml×2 | 2-8℃ |
玻璃奶 | 1.25ml | 2.5ml | 2-8℃ |
洗脫緩沖液(RNase free) | 10ml | 10ml | 2-8℃ |
原理簡(jiǎn)介
本試劑盒適合于從血清、細(xì)胞上清、淋巴液中提取RNA病毒基因組,也可用于DNA病毒基因組的提取。本試劑盒利用蛋白酶K破開(kāi)病毒外殼,放出RNA/DNA,用玻璃奶吸附達(dá)到純化目的。
使用本試劑盒提取的RNA/DNA可用于各種常規(guī)操作,包括RT-PCR、文庫(kù)構(gòu)建、Southern雜交等實(shí)驗(yàn)。
注意事項(xiàng)
1.一般病毒含量過(guò)低,zui后提取的基因組RNA/DNA電泳無(wú)法檢測(cè)到,但RT-PCR/PCR等其他實(shí)驗(yàn)還會(huì)有結(jié)果。
2.同一樣本,如果想大量提取,可以增加樣本量,并且每一步試劑加量,但使用次數(shù)會(huì)成倍減少。
3. 所有離心步驟用低溫離心機(jī)在4℃條件下離心,如果實(shí)驗(yàn)室沒(méi)有低溫離心機(jī),也可以使用常溫離心機(jī),但所提得的RNA可能會(huì)降解嚴(yán)重些。
操作步驟
準(zhǔn)備工作:使用前請(qǐng)先開(kāi)啟一瓶新的無(wú)水乙醇,倒入漂洗液中,倒?jié)M至離瓶口約0.5-1ml,蓋上瓶口,搖勻。
1、 取病毒上清液0.5ml,12000rpm離心5min,盡量取上清使用,棄去沉淀。
2、 向病毒上清中加入20ul 10mg/ml的蛋白酶K,充分混勻,65℃消化10-20min,期間可顛倒離心管混勻數(shù)次。
3、 向管中加入500ul結(jié)合液,充分混勻。
4.玻璃奶搖勻。加入25ul搖勻的玻璃奶,混勻,室溫放置2分鐘,10000轉(zhuǎn)/分鐘離心1分鐘,去上清;沉淀加入800ul漂洗液,振蕩混勻,10000轉(zhuǎn)/分鐘離心1分鐘,去上清,再用600ul漂洗液洗一次。去上清,再次離心2分鐘,用小吸頭吸去上清。
7.室溫放置10分鐘,加入30-50ul洗脫緩沖液混勻溶解,靜置5分鐘。離心,取上清為所提RNA。
北京諾博萊德科技有限公司位于北京市海淀區(qū),是一家專業(yè)從事生化試劑、分子生物學(xué)試劑、實(shí)驗(yàn)耗材及實(shí)驗(yàn)儀器研發(fā)、銷售、服務(wù)為一體的生物科技公司,公司主要經(jīng)營(yíng)的進(jìn)口品牌包括Qiagen, Omega, Sigma, Invitrogen, Roche, Abcam, Santa cruz,Fermantas(MBI), NEB, BD, Peprotech, Abnova, R&D systerms, GE, Biovision, Millipore, Amresco, Merck, CST, Axygen, Corning, NUNC, Thermo fihser, Eppendorf等;產(chǎn)品涉及化工原料、生化試劑、分子克隆相關(guān)試劑、細(xì)胞培養(yǎng)及檢測(cè)常用試劑、實(shí)驗(yàn)室常用耗材及儀器。