小鼠雙氫睪酮(DHT)免疫組化試劑盒 ,(更多資訊說(shuō)明書價(jià)格等請(qǐng)?jiān)斍槲夜?/span>)實(shí)驗(yàn)步驟建議方案:
石蠟包埋組織切片3~4μm 厚度
1.烤片: 將待做切片置于切片架上,于60℃恒溫烤箱中至少烤1 hr;
2.脫蠟: 切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟3 次(即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ),每次
10 min;
3.水化: 切片經(jīng)下行酒精水化,無(wú)水乙醇5min,95%乙醇2 次(每次2min),85%
乙醇2 min;75%乙醇2min,自來(lái)水沖洗,ddH2O 洗2×2min;
4.抗原修復(fù): 根據(jù)抗體說(shuō)明書*方法進(jìn)行抗原修復(fù),常采用高壓、微波(溫
度達(dá)到98~100℃)或酶消化修復(fù)法,室溫自然冷卻,自來(lái)水沖洗,ddH2O 洗2×
2min,TBS 洗滌(2×2min)(具體修復(fù)方法見附1)* 注:有些抗原勿需修復(fù),
直接進(jìn)入第5 步封閉。
5.封閉: 滴加試劑B,37℃濕盒孵育30 min;
6.加一抗:滴加用試劑C(即用型一抗),37℃濕盒孵育2 hr 或4℃過(guò)夜;
7.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min);
8.封閉: 滴加試劑B,37℃濕盒孵育10 min;
9.加二抗: 滴加用抗體稀釋液稀釋的*化二抗(試劑D),37℃濕盒中孵育
30 min;
10.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min);
11.封閉: 滴加試劑Tween 20,37℃濕盒孵育封閉20 min;
12.加HRP-SA: 滴加用試劑C 稀釋的試劑E(1:50~200,終濃度5~20 nM),37
℃濕盒中孵育30 min;
13.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min),TBS 洗滌(2×5 min);
14.顯色:應(yīng)用DAB 溶液(試劑F)顯色;
15.復(fù)染:自來(lái)水充分沖洗,復(fù)染,脫水,透明;
16.封片: 待組織標(biāo)本干后,用試劑緩沖甘油封固劑封片;
17.觀察成像: 顯微鏡下觀察成像。
小鼠雙氫睪酮(DHT)免疫組化試劑盒 ,注意事項(xiàng):
1. 修復(fù)后緩沖液須自然冷卻,自來(lái)水沖洗后方能把切片取出,驟冷有可能導(dǎo)致
結(jié)晶或抗原封閉。
2. 緩沖液的量必須保證所有切片都能浸泡到,用過(guò)的檸檬酸緩沖液不能反復(fù)使
用。
3. 若試劑為微量濃縮液,用前應(yīng)低速離心,將內(nèi)蓋和管壁附著的溶液離到底部。
4. 封片前一定要換用TBS 充分洗滌,以便洗去組織上殘留的Tween 20,否則會(huì)
影響結(jié)果觀察。
,更多優(yōu)惠詳情:
KC00744B 人糖皮質(zhì)激素受體β(GR-β)免疫組化試劑盒 Human glucocorticoid receptor-β,GR-β 免疫組化試劑盒
KC00745B 人糖皮質(zhì)激素受體α(GR-α)免疫組化試劑盒 Human glucocorticoid receptor-α,GR-α 免疫組化試劑盒
KC00746B 人高敏三碘甲狀腺原氨酸(u-T3)免疫組化試劑盒 Human Ultrasensitivity Tri-iodothyronine,u-T3 免疫組化試劑盒
KC00747B 人阿立新A(Orexin A)免疫組化試劑盒 Human Orexin A 免疫組化試劑盒
KC00748B 人黃體生成素釋放激素(LHRH)免疫組化試劑盒 Human Luteinizing Hormone-Releasing Hormone,LHRH 免疫組化試劑盒
KC00749B 人8異前列腺素(8-iso-PG)免疫組化試劑盒 Human 8-iso prostaglandin,8-iso-PG 免疫組化試劑盒
KC00750B 人腎素(Renin)免疫組化試劑盒 Human Renin 免疫組化試劑盒
KC00751B 人腎上腺素(EPI)免疫組化試劑盒 Human Epinephrine/Adrenaline,EPI 免疫組化試劑盒
KC00752B 人雌二醇受體(ER)免疫組化試劑盒 Human Estradiol receptor,ER 免疫組化試劑盒
KC00753B 人甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白(PTHrP)免疫組化試劑盒 Human Parathyroid Hormone-Like Related Protein,PTHrP 免疫組化試劑盒
KC00754B 人血管緊張素原(aGT)免疫組化試劑盒 Human angiotensinogen,aGT 免疫組化試劑盒
KC00755B 人血管緊張素Ⅰ(Ang-Ⅰ)免疫組化試劑盒 Human angiotension Ⅰ,Ang-Ⅰ 免疫組化試劑盒
KC00756B 人卵泡抑素(FS)免疫組化試劑盒 Human Follistatin,FS 免疫組化試劑盒
KC00757B 人甲狀腺素抗體(TAb)免疫組化試劑盒 Human Thyroxine antibody,TAb 免疫組化試劑盒
KC00758B 人兒茶酚胺(CA)免疫組化試劑盒 Human catecholamine,CA 免疫組化試劑盒
KC00759B 人半*蛋白酶抑制劑/胱抑素C(Cys-C)免疫組化試劑盒 Human Cystatin C,Cys-C 免疫組化試劑盒