原代細(xì)胞VS細(xì)胞系：
用酶或機(jī)械方法直接從人或動(dòng)物組織中分離出來的細(xì)胞。嚴(yán)格來說，從機(jī)體分離出來到傳代之前的細(xì)胞稱為原代細(xì)胞，絕大部分的原代細(xì)胞在體外可以分裂10-15次(這與細(xì)胞的端粒長短有關(guān))，再加上取材，成本等因素，通常會(huì)把培養(yǎng)的第一代到第十代以內(nèi)的細(xì)胞統(tǒng)稱為原代細(xì)胞。
商品屬性：
組織來源 | 子宮組織 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
產(chǎn)品貨號(hào) | CS-X3300 | 生長特性 | 貼壁 |
細(xì)胞簡介：
小鼠子宮內(nèi)膜基質(zhì)分離自子宮組織；子宮是孕育胎兒的器官，位于盆腔中部，膀胱與直腸之間，其位置可隨膀胱與直腸的充盈程度或體位而有變化。子宮的正常位置主要依靠子宮諸韌帶、盆膈、尿生殖膈及會(huì)陰中心腱等結(jié)構(gòu)維持，這些結(jié)構(gòu)受損或松弛時(shí)，可以引起子宮脫垂。子宮內(nèi)膜即黏膜，由上皮（屬單層柱狀上皮，有分泌細(xì)胞和纖毛細(xì)胞二種）和固有膜（由結(jié)締組織構(gòu)成，其內(nèi)有大量的星形細(xì)胞，稱為基質(zhì)細(xì)胞）組成，子宮內(nèi)膜可分為淺表的功能膜和深部的基底層，功能層較厚，約占內(nèi)膜厚度的4/5；基底層較薄較致密，約占1/5，功能層可剝脫，而基底層不可剝脫。子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞主要功能：①子宮內(nèi)膜亦稱子宮黏膜，是指構(gòu)成哺乳類子宮內(nèi)壁的一層；②子宮內(nèi)膜對動(dòng)情素和孕激素都起反應(yīng)，因此可隨著性周期（發(fā)情周期、月經(jīng)周期）發(fā)生顯著的變化。子宮內(nèi)膜與胚胎附植密切相關(guān)，在生殖生理的研究中占重要地位。在胚胎與母體“對話”的過程中，子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞充當(dāng)了極其重要的角色。子宮內(nèi)膜構(gòu)成雌性哺乳動(dòng)物子宮壁的內(nèi)層，位于子宮腔面，在動(dòng)物生殖生理活動(dòng)中占有重要地位。子宮和子宮內(nèi)膜是維持雌性動(dòng)物生理功能和生育能力的重要器官，子宮內(nèi)膜的再生修復(fù)是子宮的重要生理功能。體外培養(yǎng)的子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。
方法簡介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠子宮內(nèi)膜基質(zhì)經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
質(zhì)量檢測：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠子宮內(nèi)膜基質(zhì)采用膠原酶消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳3代左右
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
原代細(xì)胞一般傳至10代左右，大部分細(xì)胞衰老死亡，但是有極少數(shù)的細(xì)胞能夠度過“危機(jī)”而繼續(xù)傳下去，存活的細(xì)胞一般能夠傳到40-50代，叫細(xì)胞株。當(dāng)50代以后又會(huì)出現(xiàn)“危機(jī)”，這時(shí)有部分細(xì)胞的遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變且?guī)в邪┳兊奶攸c(diǎn)，從而可能無限制地傳代下去，稱為細(xì)胞系。
也有認(rèn)為細(xì)胞系指原代細(xì)胞培養(yǎng)物經(jīng)傳代成功后所繁殖的細(xì)胞群體。也指可長期連續(xù)傳代的培養(yǎng)細(xì)胞。由此便引申出了后來的有限細(xì)胞系、無限細(xì)胞系，因此，細(xì)胞系狹義的是指可連續(xù)傳代的細(xì)胞，廣義是指可傳代的細(xì)胞。而細(xì)胞株是通過選擇法或克隆形成法，從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志物的單一細(xì)胞稱為細(xì)胞株。
細(xì)胞系具有容易培養(yǎng)、種類多、價(jià)格便宜、無限傳代等優(yōu)點(diǎn)，也非常容易在培養(yǎng)、凍存中發(fā)生錯(cuò)誤鑒定及交叉污染的問題。
公司正在銷售的產(chǎn)品：
小鼠肌球蛋白(Myosin)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat granulocyte colony stimulating factor (G-CSF) ELISA Kit 大鼠粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)ELISA試劑盒
Humanprotocadherin1,PCDH1ELISAKit 人原鈣黏素1(PCDH1)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humanai-livercytosolaibodytype1,LC1ELISA試劑盒人抗肝細(xì)胞胞質(zhì)1型抗體(LC1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
植物內(nèi)質(zhì)網(wǎng)粗提分離試劑盒10次
Humanvanillylmandelicacid,VMAELISAKit人垂草扁桃酸(VMA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
小鼠白介素23(IL-23)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠白介素2(IL-2)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠白介素1受體拮抗劑(IL-1Ra)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠白介素1可溶性受體Ⅱ(IL-1sRⅡ)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠白三烯B4(LTB4)ELISA試劑盒 ，英文名： LTB4 ELISA Kit
Mouse ierleukin 12 (IL-12/P40) ELISA Kit 小鼠白介素12(IL-12/P40)ELISA試劑盒
ELISA 小鼠胰高血糖素(mouse Glucagon) 48T/96T 進(jìn)口分裝
CLIAKitfori-PTH(MouseiactParathormone)ELISAKit小鼠全段甲狀旁腺素規(guī)格：48T/96T
通用型非蛋白/游離巰基含量比色法定量檢測試劑盒20次
ELISAKitADP大鼠脂聯(lián)素規(guī)格：48T/96T
CA8重組小鼠 Carbonic Anhydrase VIII / Car8 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
CD200受體1(CD200R1)重組蛋白 Recombinant CD200 Receptor 1 (CD200R1)
IP6K1重組人 IHPK1 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein
EPOR Protein Human 重組人 EPO Receptor / EPOR 蛋白 (His 標(biāo)簽)
FCAR Protein Rat 重組大鼠 CD89 / FCAR 蛋白 (His 標(biāo)簽)
小鼠子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞脯氨酰羧肽酶(PRCP)重組蛋白 Recombinant Prolylcarboxypeptidase (PRCP)
EPOR Protein Human 重組人 EPO Receptor / EPOR 蛋白 (His 標(biāo)簽)
CCL3重組小鼠 CCL3 / Mip1a 蛋白 Protein
SERPINC1 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 SerpinC1 / AntithrombinIII / ATIII 蛋白 (His 標(biāo)簽)
CD3D & CD3E重組人 CD3D & CD3E Heterodimer 蛋白 Protein
原代細(xì)胞培養(yǎng)的具體步驟：
1、準(zhǔn)備：取各種已消毒的培養(yǎng)用品置于凈化臺(tái)面，紫外線消毒20分鐘。開始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。
2、布局：點(diǎn)燃酒精燈，安裝吸管帽。
3、處理組織：把組織塊置于燒杯中，用Hanks液漂洗2-3次，去除血污；如懷疑組織可能污染，可先置于含有青的混合液中30-60分鐘。
5、消化：或用恒溫水浴，或置于37℃溫箱消化均可，消化中每隔20分鐘應(yīng)搖動(dòng)一次，如用電磁恒溫?cái)嚢杵飨谩Ｏ瘯r(shí)間依組織塊的大小和組織的硬度而定。
6、分離：在消化過程中見消化液發(fā)混濁時(shí)，可用吸管吸出少許消化液在鏡下觀察，如組織已分散成細(xì)胞團(tuán)或單個(gè)細(xì)胞，立即終止消化，隨即通過適宜不銹鋼篩，濾掉尚未充分消化開的組織塊。低速（500-1000轉(zhuǎn)/分）離心消化液5分鐘，吸出上清，加入適量含有血清的培養(yǎng)液。
7、計(jì)數(shù)：用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)，如細(xì)胞懸液細(xì)胞密度過大，再補(bǔ)加培養(yǎng)液調(diào)整后，分裝入培養(yǎng)瓶中。對大多數(shù)細(xì)胞來說，pH要求在7.2-7.4范圍，培養(yǎng)液呈微紅色，如顏色偏黃，說明液體變酸，可用NaHCO3調(diào)整。
8、培養(yǎng)：置于37℃溫箱培養(yǎng)，如用CO2溫箱培養(yǎng)，瓶口需用紗布棉塞或螺旋帽堵塞，紗布塞易生霉菌，每次換液時(shí)需要換新塞。
