哮喘大小鼠模型構(gòu)建
一、哮喘背景介紹
哮喘是由多種細胞(特別是肥大細胞、嗜酸性粒細胞和T淋巴細胞)參與的慢性氣道炎癥,這種炎癥會導致氣道狹窄,從而影響肺部通氣,使患者出現(xiàn)呼吸困難等癥狀。
二、哮喘大小鼠模型構(gòu)建介紹
哮喘是一種以氣道炎癥、氣道高反應性和氣道重塑為主要特征的慢性呼吸系統(tǒng)疾病。動物模型能夠模擬人類哮喘的多個方面,包括氣道炎癥、氣道高反應性、黏液分泌增多等,為深入研究哮喘提供了可能
三、模型構(gòu)建
3.1、實驗動物、耗材
大鼠
3.2、造模方法
1. 明礬致敏佐劑制備:10%明礬溶液2ml與500ug/ml OVA2ml等量混合后,用NAOH調(diào)PH值為6.5,室溫孵育60min,750r/min,離心5min,去掉上清液,重溶于2ml PBS。致敏時每只小鼠腹腔注射200ul,其中含2mg明礬和100ug OVA。
2. 致敏:小鼠分別于第0、14天時腹腔注射明礬致敏佐劑0.2ml,對照組注射相同劑量的PBS溶液,正常飲食飼養(yǎng)。
激發(fā):霧化吸入,第21天時小鼠放入有機玻璃箱,5% OVA霧化吸入,每天30min,共7d,最后一次致敏后24h內(nèi)檢測。
四、 模型驗證
?臨床表現(xiàn)觀察?:
觀察小鼠是否出現(xiàn)呼吸急促、喘息、咳嗽等哮喘樣癥狀。
評估小鼠對刺激物的反應性,如氣道阻力增加、氣道縮窄等。
生化指標檢測?:
血清IgE檢測:哮喘小鼠血清中的IgE水平通常會顯著升高,這是由Th2型免疫反應介導的。
肺泡灌洗液分析:檢測肺泡灌洗液中的嗜酸性粒細胞、淋巴細胞等炎癥細胞數(shù)量,評估氣道炎癥程度。
病理變化觀察?:
肺組織切片染色:通過H&E染色等方法觀察肺組織切片,評估氣道周圍炎癥細胞浸潤、黏液分泌增多等病理變化。
五、小結(jié)
哮喘動物模型在哮喘研究中具有廣泛的應用價值,包括了解疾病病理生理學、評估潛在藥物治療效果等。然而,動物模型與人類之間仍存在一定的差異,如解剖結(jié)構(gòu)、生理反應等方面的不同。因此,在將動物模型的研究結(jié)果應用于人類時,需要謹慎考慮這些差異。
綜上所述,哮喘動物模型是研究哮喘發(fā)病機制和治療方法的重要工具。通過選擇合適的動物種類和造模方法,可以建立穩(wěn)定可靠的哮喘模型,為深入研究哮喘提供有力支持。
六、參考文獻
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