擬南芥his6標(biāo)記ALEU蛋白,UniProt: Q8H166, TAIR: At5g60360
主機(jī)的兔子
單克隆多克隆
總IgG,在A蛋白上純化
格式液體2mg /ml PBS, 50%甘油,過(guò)濾滅菌,不添加防腐劑或載體,
數(shù)量100µg
存儲(chǔ)環(huán)境:-20°C;為了避免反復(fù)的凍融循環(huán),在打開(kāi)之前,請(qǐng)記住旋轉(zhuǎn)管,以避免任何損失,可能發(fā)生的材料粘附在瓶蓋或管的兩側(cè)
Western blot (WB)
推薦稀釋倍數(shù):1000 - 1:40 00 (WB)
預(yù)期|表觀MW 38,9 | 24 kDa
擬南芥原油從7天幼苗中提取制備(1)19天幼苗(2)是鮮榨的粗提取液2 x SDS-sample緩沖區(qū)(+ 2我)為SDS - page和變性4 x SDS緩沖區(qū)在95°C 5分鐘15 - 20 % SDS - page和涂抹PVDF膜分離在濕系統(tǒng)。用3%脫脂牛奶/TBS-T封閉印跡,攪拌1h/RT。用一抗在TBS-T中1:20 00稀釋1h/RT孵育。倒出抗體溶液,RT - TBS-T中攪拌洗滌4次,共10分鐘。將匹配的二抗(抗兔IgG馬蘿卜過(guò)氧化物酶偶聯(lián))稀釋到1:10 000,攪拌1h/RT孵育。按照制造商的建議,將印跡沖洗并使用化學(xué)發(fā)光檢測(cè)試劑顯影。
ALEU蛋白合成為39 kDa的前原蛋白,去除21個(gè)氨基酸的信號(hào)肽,去除n端119個(gè)氨基酸的前肽,在成熟的功能性蛋白中不存在。因此,Western blot分析的表觀分子質(zhì)量大小為24kda。